唐毓勝 周正東 唐任光

卡式法在輸血前不規(guī)則抗體篩查中的應(yīng)用價值分析

唐毓勝 周正東 唐任光

目的 探討卡式法在輸血前不規(guī)則抗體篩查中的應(yīng)用價值。方法 選取需輸血的3823例患者采用卡式法進行不規(guī)則抗體篩查，再將陽性血清使用譜細胞鑒定其抗體類型。結(jié)果 3823例患者中13例患者顯陽性，陽性率為0.34%，陽性患者均存在妊娠史或輸血史。結(jié)論 卡式法在輸血前篩查不規(guī)則抗體具有重復(fù)性強、標(biāo)本用量較少、標(biāo)準(zhǔn)化程度較高、結(jié)果可靠明確、保存時間長的特點。輸血前對患者進行不規(guī)則抗體篩查，同時鑒定抗體的特異性，再選擇輸注不含有相應(yīng)抗原的血液，可避免發(fā)生溶血性反應(yīng)，對保證輸血安全具有重要的意義。

卡式法；不規(guī)則抗體；篩查；輸血安全

不規(guī)則抗體是指除抗-A、抗-B外的抗體[1]。不規(guī)則抗體可引起遲發(fā)性溶血性輸血及其交叉配血困難反應(yīng)，少數(shù)還可引起急性溶血性輸血放樣，導(dǎo)致無尿、少尿、腎衰竭和彌散性血管內(nèi)凝血，嚴(yán)重時可導(dǎo)致死亡[2]。不規(guī)則抗體是引起溶血性輸血反應(yīng)和遲發(fā)型免疫反應(yīng)的主要原因。近年來，國外在輸血前普遍使用卡式法篩查不規(guī)則抗體。本研究選取需輸血的3823例患者，采用卡式法進行不規(guī)則抗體篩查，旨在探討卡式法在輸血前不規(guī)則抗體篩查中的應(yīng)用價值?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年1月～2014年7月廣西百色市中心血站需輸血的3823例患者，其中男2376例，女1447例，年齡2～75歲，平均年齡（42.1±5.2）歲。

1.2 儀器與試劑 微柱凝膠抗人球蛋白檢測卡；安迪博特專用標(biāo)本孵育器和離心機；上海血液生物制品篩選紅細胞、譜細胞。

1.3 方法 輸血前抽取患者2 mL靜脈血，在EDTA抗凝室溫下1900 r/min離心10 min，分離血漿。往微柱凝膠抗人球蛋白檢測卡的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三號孔各加入50 μL 0.8%的篩選細胞，同時向微孔柱內(nèi)加入25 μL離心好的血漿，置于孵育器中孵育10 min，后在離心機下離心10 min，紅細胞未與相應(yīng)的抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，紅細胞可通過凝膠至微柱底部，為陰性；紅細胞與相應(yīng)的抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，紅細胞不可通過凝膠，擋在微柱的上端，為陽性。判定結(jié)果后，再將陽性血清使用譜細胞鑒定其抗體類型。

2 結(jié)果

3823例患者中13例患者顯陽性，陽性率為0.34%，經(jīng)使用譜細胞鑒定其抗體類型，其中抗-D 1例，抗-E 4例，抗-C 2例，抗-Ce 1例，抗-Ec 3例，抗-Lea 1例，抗-Leb 1例。其中男8例，女5例。經(jīng)詢問了解：8例男性患者均有輸血史，2例女性患者只存在妊娠史，3例女性患者既有輸血史又有妊娠史。見表1。

表1 不規(guī)則抗體篩查鑒定結(jié)果（n）

3 討論

隨著輸血檢驗技術(shù)的不斷發(fā)展，較少發(fā)生因血型不合而導(dǎo)致的溶血反應(yīng)，而目前引起溶血反應(yīng)主要由于血型的不規(guī)則抗體[3]。不規(guī)則抗體是引起溶血性輸血反應(yīng)和遲發(fā)型免疫反應(yīng)的主要原因。但因不規(guī)則抗體的檢出率較低，在臨床上易被忽視，尤其是多次輸血的患者、孕婦、嚴(yán)重消耗性疾病患者、腫瘤患者、自身免疫性疾病患者為不規(guī)則抗體的高危攜帶者[4]，為保證輸血的安全和有效，應(yīng)作為重點篩查對象。不規(guī)則抗體的質(zhì)量、數(shù)量與抗原、T細胞、B細胞及其附屬細胞等密切相關(guān)[5]。當(dāng)抗原刺激機體后，B細胞增殖分化為漿細胞或記憶細胞，記憶細胞在其細胞膜表達相應(yīng)的抗原，當(dāng)再次受到相同抗原的刺激后，可發(fā)生免疫反應(yīng)。輸血時，特別是多次輸血，紅細胞表面的少見抗原可刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，當(dāng)再次輸血時，組織相容性復(fù)合體MHCI及

MHCII分子調(diào)節(jié)T細胞的反應(yīng)，從而調(diào)控機體的抗體反應(yīng)，且在細胞因子、B細胞免疫耐受、神經(jīng)內(nèi)分泌作用等作用下，多次輸血的患者、骨髓瘤、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、孕婦、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、肝硬化、嚴(yán)重消耗性疾病患者、腫瘤患者、肺結(jié)核、自身免疫性疾病等患者血液中IgM、IgG抗體會增加[6]。

傳統(tǒng)不規(guī)則抗體篩查的方法為使用間接抗人球蛋白試驗篩查，可解決部分抗體的劑量效應(yīng)，但該方法耗時較長，不利于常規(guī)檢測[7]。基于傳統(tǒng)的間接抗人球蛋白試驗，卡式法可避免試管液體介質(zhì)Coombs試驗需多次清洗費時、繁瑣的缺點?？ㄊ椒ㄊ抢梦⒅z免疫抗體抗原的特異性反應(yīng)和微孔過濾作用，微柱孔隙只允許通過1個紅細胞，紅細胞若未遇見相應(yīng)的抗體或被致敏，則離心后可被離心至凝膠底部，說明被篩查的血清中不存在相應(yīng)的抗體和致敏紅細胞[8]。若被篩查的血清存在特異性抗體，如IgM抗體，可與紅細胞結(jié)合直接形成可見的復(fù)合物，若是IgG抗體，該復(fù)合物可與抗球蛋白結(jié)合形成可見的復(fù)合物，復(fù)合物被擋在凝膠的上部，故篩查不規(guī)則抗體的特點有：（1）具有重復(fù)性強、標(biāo)本用量較少、標(biāo)準(zhǔn)化程度較高、結(jié)果可靠明確，保存時間長；（2）可克服傳統(tǒng)抗人球蛋白試驗的費時、煩瑣的缺點，不需洗滌，快捷簡便；（3）標(biāo)本使用量較少，減少操作過程帶來的污染；（4）可攝像拷貝，提供永久性的記錄。

本研究結(jié)果顯示，3823例患者中13例患者顯陽性，陽性率為0.34%，與報道的0.3%～2%的相符，但陽性患者一旦宿主具有相應(yīng)抗原的紅細胞，與體內(nèi)的抗體發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)，嚴(yán)重時可威脅患者的生命安全。可運用于在醫(yī)院輸血科在不規(guī)則抗體篩查與鑒定、交叉配血、輸血反應(yīng)、溶血性貧血等血清學(xué)檢驗中，值得在臨床上推廣使用。綜上所述，輸血前對患者進行不規(guī)則抗體篩查，同時鑒定抗體的特異性，再選擇輸注不含有相應(yīng)抗原的血液，可避免發(fā)生溶血性反應(yīng)，對保證輸血安全具有重要的意義。

[1] 曹榮袆，劉鳳華，于洪敏.微柱凝膠法檢測不規(guī)則抗體的臨床應(yīng)用[J].臨床輸血與檢驗，2010，12(2):149-151.

[2] 黃麗雅，孫愛農(nóng)，陳勇高，等．中山地區(qū)萬例患者不規(guī)則抗體微柱凝膠篩查的研究[J]．檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2009，16(6):1319-1321．

[3] 石興景.臨床輸血現(xiàn)狀分析[J].中國社區(qū)醫(yī)師（醫(yī)學(xué)專業(yè)），2011，13（26）：331-332.

[4] 張晨光，張倩倩，龐桂芝，等.血型不規(guī)則抗體檢測的方法學(xué)評價[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2010，25（12）：929-933.

[5] 樊鳳艷，王洪波，魏少平，等.不規(guī)則抗體導(dǎo)致ABO正反定型不符處理探討[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2012，27（10）：822-824.

[6] 李燕瓊.2360例有妊娠史女性血清中不規(guī)則抗體的調(diào)查分析[J].中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2010，13（1）：68.

[7] 毛娟，吳大洲，王滿妮，等.凝聚胺漏檢抗Lea致溶血性輸血反應(yīng)一例[J].中國輸血雜志，2013，26（2）：178-179.

[8] 王玲，劉毅，吳敏慧.抗-Jka免疫性抗體致速發(fā)性溶血性輸血反應(yīng)探討[J].臨床輸血與檢驗，2012，14(2):168-170.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.25.044

廣西 533000 廣西百色市中心血站 （唐毓勝 周正東 唐任光）