游小鳳 石鶴坤 蔡靜靜 王幼妹 胡永獅▲

1.廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院采供辦，福建 漳州 363000；2.廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院藥學(xué)科，福建 漳州 363000

紅景天是景天科大花紅景天屬多年生草本植物，因其花、根、莖的浸出液皆為紅色而得名。在我國，早在兩千多年前西藏高原的人民便以之入藥用以強(qiáng)身健體有被喻為“高原人參”，“主養(yǎng)命以應(yīng)天，多服久服不傷人”，且有“輕身益氣、不老延年”等功效。現(xiàn)代藥理學(xué)研究認(rèn)為，紅景天的主要活性成分是紅景天苷和黃酮。研究表明，紅景天苷具有保護(hù)心血管、抗衰老、保護(hù)肝臟、抗炎鎮(zhèn)痛、抑制腫瘤、增強(qiáng)免疫等作用[1]；紅景天黃酮化合物具有抗氧化、抗輻射、抗癌、消炎抑菌、抗病毒、抗血栓、調(diào)節(jié)血脂、保護(hù)肝臟作用，此外還能影響學(xué)習(xí)記憶功能[2]。為進(jìn)一步闡明紅景天功能和效果，本研究通過力竭游泳試驗(yàn)，觀察紅景天對小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、運(yùn)動后血乳酸濃度及肝糖原儲備量變化，考察其抗疲勞運(yùn)動的作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

SPF級健康昆明種小鼠120只，雄性，體重18～22 g，鼠齡6～8周，購自福建省疾病控制中心動物實(shí)驗(yàn)場，合格證號：SCXK（閩）2012-0002。動物實(shí)驗(yàn)在廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，許可證號：SYXK（軍）2007-032。

1.2 藥物與試劑

紅景天粉末，江西江中（武寧）中藥飲片有限公司，批號：100303009；肌/肝糖原測定試劑盒，南京建成生物工程研究所，批號：20120319；乳酸檢測試劑盒，英國朗道生物試劑公司，批號：228934；濃硫酸，福建省三明市三圓化學(xué)試劑有限公司，批號：T20110914。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

UV-2250型紫外分光光度計(jì)，日本島津公司；Bs223s型電子天平，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；TGL-16G型臺式高速離心機(jī)，江蘇金壇江南儀器廠；420-A型電熱恒溫水浴鍋，天津市泰斯特儀器有限公司；ACS-6A型電子計(jì)算秤，上海友聲衡器有限公司；SIMENS ADVIA 2400型生化分析儀，德國西門子公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 紅景天粉末水提物的制備 取紅景天粉末200 g，10倍蒸餾水浸泡30 min后開始煎煮，待溶液沸騰后開始計(jì)時(shí)，保持沸騰30 min，過濾后8倍蒸餾水二次煎煮，合并兩次煎液，濃縮至0.1 g/mL。

1.4.2 小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn) 先取小鼠40只，按體重分成4個(gè)組，分別為：對照組（每天給予等體積的蒸餾水）、低劑量組（0.78 g/kg）、中劑量組（1.56 g/kg）、高劑量組（3.12 g/kg）。每天以0.4 mL/10 g鼠重灌胃給藥，連續(xù)7 d，灌胃期間自由攝食和飲水 （末次給藥的前14 h對小鼠進(jìn)行禁食）。于末次灌胃給藥30 min后，用總重為小鼠體重5%的鉛絲固定于小鼠尾部。將小鼠置于40 cm×30 cm×30 cm的游泳箱中游泳，水溫（25±1）℃，記錄小鼠從游泳開始至死亡的時(shí)間（以小鼠沉入水底，10 s內(nèi)不能浮出水面為溺死指標(biāo)），作為小鼠負(fù)重游泳的時(shí)間[3]。

1.4.3 小鼠血乳酸測定試驗(yàn) 另取小鼠40只，小鼠分組及灌胃給藥方法同“1.4.2”項(xiàng)所述。于末次灌胃給藥30min后，將小鼠置于40 cm×30 cm×30 cm的游泳箱中游泳，水溫（25±1）℃，不負(fù)重游泳 90 min。游泳結(jié)束后，立即摘除各組小鼠眼球進(jìn)行采血，將所采得的血置于離心機(jī)中以3000 r/min的轉(zhuǎn)速離心8 min，分離血清，4～8℃下保存待檢。按試劑盒說明書測定血漿中乳酸的含量[4]。

1.4.4 小鼠肝糖原測定試驗(yàn) 取剩余的40只小鼠，小鼠分組及灌胃給藥方法同“1.4.2”項(xiàng)所述。于末次灌胃給藥30 min后，將小鼠頸椎脫臼處死，取出小鼠肝臟，經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，采用試劑盒法[5]測定肝糖原含量，即：精確稱取肝臟100 mg，將樣本與堿液按1∶3加入試管為水解液，沸水浴20 min后，流水冷卻，將肝糖原水解液配制成1%檢測液，配制空白液與標(biāo)準(zhǔn)液，混勻，沸水浴5 min，冷卻，于620 nm波長比色，按下列公式計(jì)算肝糖原含量：

肝糖原含量（mg/g組織）=[（A/B）×0.01×100×10]/1.11

A為測定管OD值；B為標(biāo)準(zhǔn)管OD值；0.01為糖原標(biāo)準(zhǔn)管含量0.01 mg；100為樣本測試前稀釋倍數(shù)；10為測試過程中的稀釋倍數(shù)；1.11為將葡萄糖換算成糖原的系數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 12.0對所測得的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，正態(tài)分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

紅景天各劑量組的游泳時(shí)間均高于對照組，其中紅景天低劑量組影響不明顯（P＞0.05），紅景天中、高劑量組均較對照組明顯延長（P＜0.01）。紅景天低劑量組與中劑量組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），中劑量組與高劑量組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），呈劑量效應(yīng)。與對照組比較，紅景天各劑量組小鼠的血乳酸均明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01），但低劑量組與中劑量、高劑量組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與對照組比較，紅景天各劑量組小鼠的肝糖原含量均明顯升高 （P＜0.01），差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），紅景天各劑量組間兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05或P＜0.01），呈劑量效應(yīng)。見表1。

表1 紅景天粉末水提物對小鼠運(yùn)動性疲勞指標(biāo)的影響（n=10，）

表1 紅景天粉末水提物對小鼠運(yùn)動性疲勞指標(biāo)的影響（n=10，）

注：與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與紅景天低劑量組比較，△P＜0.05，△△P ＜ 0.01；與紅景天高劑量組比較，▲P ＜ 0.05，▲▲P ＜ 0.01；“-”表示無數(shù)據(jù)

組別 劑量[g/（kg·d）]游泳時(shí)間（min）血乳酸值（mmol/L）肝糖原（mg/g）對照組紅景天低劑量組紅景天中劑量組紅景天高劑量組-0.78 1.56 3.12 7.78±2.34 10.18±3.15 15.19±4.77**△25.86±4.13**▲▲4.49±1.04 3.63±0.84*3.50±0.94*3.21±0.87**2.01±0.63 12.13±3.19**26.99±5.35**△△34.81±7.07**▲

3 討論

疲勞是一種普遍的生理現(xiàn)象，主要包括精神疲勞和軀體疲勞兩種，在我國因?yàn)檫^度疲勞致病甚至致死的病例數(shù)逐年增加，全球調(diào)查顯示35%人群處于疲勞狀態(tài)[6-7]。在運(yùn)動過程中，當(dāng)生理過程不能繼續(xù)維持在特定水平上或不能維持預(yù)訂的運(yùn)動強(qiáng)度時(shí)，即稱之為運(yùn)動性疲勞[8]?？蛊谀芰υ鰪?qiáng)的最直接體現(xiàn)就是運(yùn)動時(shí)間延長，即運(yùn)動耐力增加[9]。本實(shí)驗(yàn)通過力竭游泳試驗(yàn)[10]測定小鼠負(fù)重游泳時(shí)間來觀察小鼠的疲勞程度。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示中、高劑量組紅景天水提物能夠延長小鼠的負(fù)重游泳時(shí)間，表明紅景天水提物對運(yùn)動耐力具有提高作用。

紅景天中主要的活性成分是紅景天苷，另外還含有蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉等化合物及鋁、鋅、鐵、鉬、鈦等微量元素，具有扶正固本、滋補(bǔ)強(qiáng)身、補(bǔ)氣養(yǎng)血等功效[11]。紅景天可通過調(diào)節(jié)機(jī)體耗能、促進(jìn)新陳代謝、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)等功能，從而起到抗疲勞及提高機(jī)體免疫力的作用[12-13]。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，紅景天能夠增強(qiáng)心臟功能、減輕心臟的負(fù)荷、擴(kuò)張冠脈血管、增加血氧含量，從而降低了心肌的耗氧量[14]，還可以降低血液黏度及增加血液中紅細(xì)胞的數(shù)量等。

另外，糖原的儲存量直接影響機(jī)體的運(yùn)動能力，同時(shí)儲量大小與疲勞的延緩也有直接關(guān)系。長時(shí)間運(yùn)動時(shí)，為機(jī)體內(nèi)的血糖維持平衡水平，肝糖原儲備量下降[15]。持續(xù)運(yùn)動將導(dǎo)致機(jī)體相對缺氧、糖酵解加快，進(jìn)而產(chǎn)生大量的乳酸，使肌肉組織內(nèi)的pH值下降，最終導(dǎo)致疲勞，因此血乳酸水平也是反映機(jī)體有氧代謝能力和疲勞程度的重要指標(biāo)[16-19]。本實(shí)驗(yàn)以小鼠運(yùn)動的血乳酸濃度變化及肝糖原儲備量為指標(biāo)，對紅景天的抗運(yùn)動性疲勞作用進(jìn)行考察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，在持續(xù)性運(yùn)動后血乳酸測定實(shí)驗(yàn)中，給藥組小鼠的血乳酸值均顯著低于對照組（P＜0.05），而在肝糖原測定實(shí)驗(yàn)中，給藥組小鼠的肝糖原含量均高于對照組（P＜0.05）；表明紅景天水提物對減少乳酸蓄積、增加糖原儲備具有促進(jìn)作用。

綜上所述，紅景天粉末水提物對運(yùn)動性疲勞具有改善作用。特殊營養(yǎng)品有調(diào)節(jié)身體功能、加快消除疲勞、促進(jìn)功能恢復(fù)進(jìn)而提高運(yùn)動能力的作用，因而日益受到教練員和隊(duì)醫(yī)的重視，但是這些營養(yǎng)品也有不同程度的副作用，若使用不當(dāng)，反而會產(chǎn)生不良后果，損害運(yùn)動員的身體健康[20]。按照《中國藥典》2010版，紅景天的成人推薦劑量為3～6 g。本實(shí)驗(yàn)中采用的劑量遠(yuǎn)高于藥典推薦劑量，試驗(yàn)中組間的結(jié)果呈一定的劑量反應(yīng)關(guān)系，但未能找到最佳劑量。對于最佳的劑量，有待進(jìn)一步的研究。

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