王潔蓮，閻會(huì)平（山西省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)監(jiān)測中心，山西太原030025）

氣相色譜法同時(shí)檢測蘋果中的6種農(nóng)藥殘留的分析

王潔蓮，閻會(huì)平
（山西省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)監(jiān)測中心，山西太原030025）

摘要：建立氣相色譜法測定蘋果中氟啶脲、毒死蜱等6種農(nóng)藥殘留檢測的方法。此方法采用乙腈提取蘋果中氟啶脲、毒死蜱等6種農(nóng)藥，用氨基柱對(duì)樣品進(jìn)行凈化，利用氣相色譜作為檢測手段，ECD檢測器進(jìn)行定性定量分析。研究表明：測定蘋果中6種農(nóng)藥殘留含量重復(fù)性試驗(yàn)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.97%～4.92%，定量限為0.002mg/kg～0.04mg/kg，檢出限為0.000 5mg/kg～0.02mg/kg。6種農(nóng)藥在0.05mg/kg～2.0mg/kg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r值均大于0.999。此方法檢測蘋果中氟啶脲、毒死蜱等6種農(nóng)藥殘留檢測準(zhǔn)確，可行，符合國家標(biāo)準(zhǔn)要求。

關(guān)鍵詞：農(nóng)藥殘留；蘋果；氣相色譜法

根據(jù)GB2763-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》規(guī)定[1]，氟啶脲在蘋果中的最大殘留限量為0.5mg/kg；毒死蜱在蘋果中的最大殘留限量為1.0mg/kg；蟲螨腈在蘋果中的最大殘留限量為1.0mg/kg；啶蟲脒在蘋果中的最大殘留限量為0.8mg/kg；苯醚甲環(huán)唑在蘋果中的最大殘留限量為0.5mg/kg；二甲戊靈在蘋果中的最大殘留限量無規(guī)定。這6種農(nóng)藥近幾年來在果園使用廣泛，也成為水果的必檢參數(shù)。但目前的檢測方法是液相色譜法和質(zhì)譜法[2-3]為主，質(zhì)譜法可以同時(shí)檢測很多參數(shù)，但儀器價(jià)格昂貴且運(yùn)行成本高，只在大型級(jí)實(shí)驗(yàn)室才有；液相色譜的的檢測方法參數(shù)單一[4-6]，沒有同時(shí)檢測這6種參數(shù)的報(bào)道?，F(xiàn)有的檢測方法不適合檢測參數(shù)的普及。毒死蜱和啶蟲脒應(yīng)用報(bào)道在氣相色譜多一些[7-8]；其他四種農(nóng)藥的檢測報(bào)道在氣相色譜上沒有。本文以普及的氣相色譜（GC/ ECD）法檢測蘋果中的6種農(nóng)藥殘留，為確保蘋果的質(zhì)量安全提供了必要的檢測手段。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

1.1.1樣品來源

蘋果：太原市市售。

1.1.2主要試劑

氯化鈉：天津市風(fēng)船化學(xué)試劑有限公司；于630℃灼燒4 h后備用，乙腈﹑正已烷﹑甲醇﹑二氯甲烷均為色譜純：迪馬科技；1 000mg/mL氨基固相萃取柱：美國Agilent公司。標(biāo)準(zhǔn)品為氟啶脲、毒死蜱、啶蟲脒、二甲戊靈、蟲螨腈和苯醚甲環(huán)唑共6種，濃度均為1 000mg/L全部購自農(nóng)業(yè)部天津環(huán)保所。

1.1.3主要儀器

Agilent7890A氣相色譜儀：美國Agilent公司；μ-ECD檢測器、T25basic高速勻漿機(jī)、RV05basic旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、TKA MS3旋窩混勻器：德國IKA公司；氮吹儀：美國Thermo公司。

1.2檢測方法

1.2.1樣品的提取與凈化

提?。簻?zhǔn)確稱取15.0 g蘋果待測樣品于100mL小燒杯中，加入30m L乙腈，高速勻漿2min后用濾紙過濾，收集濾液；裝入含4 g～6 g氯化鈉的具塞量筒，加塞后劇烈振蕩1min，在室溫下靜置30min；吸取10mL上層乙腈相于150mL雞心瓶中，于35℃下旋蒸濃縮至近干；加入2mL甲醇∶二氯甲烷=5∶95（體積比）的混合溶劑溶解，待凈化。

凈化：用5.0mL甲醇∶二氯甲烷=5∶95（體積比）的混合溶劑預(yù)淋洗氨基柱，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即加入上述待凈化溶液，用15mL玻璃試管收集洗脫液，再分2次用6mL上述混合溶劑洗雞心瓶后過柱并收集洗脫液；于40℃水浴下，氮吹至近干，用正己烷準(zhǔn)確定容至2.50m L，混勻后用0.2μm濾膜過濾，待測。

1.2.2氣相色譜條件

色譜柱：DB-17毛細(xì)管柱（30m×0.32mm×0.25mm）；檢測器：μ-ECD；氣化室溫度235℃；檢測器溫度：300℃；進(jìn)樣量：1μL，分流進(jìn)樣；尾吹流量：60mL/min；程序升溫：初溫150℃保持1min，以10℃/min升到270℃，保持15min，以20℃/min升到280℃，保持1min；柱流量：2mL/min。

1.2.3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確移取一定量（精確至0.01mL）的氟啶脲、毒死蜱、啶蟲脒、二甲戊靈、蟲螨腈和苯醚甲環(huán)唑單個(gè)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，用正已烷做溶劑，配制成100mg/L的農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（貯存在-18℃以下的冰箱中）。臨用前再以正己烷為溶劑將六種農(nóng)藥分別配制成質(zhì)量濃度為0.05、0.1、0.5、1.0和2.0mg/L的混合工作使用液。

1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取1.2.3章節(jié)的混合工作使用液依據(jù)1.2.2章節(jié)的氣相色譜條件，以質(zhì)量濃度（x）為橫坐標(biāo)，峰面積（y）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，每個(gè)濃度3次重復(fù)。

2　結(jié)果與討論

2.1前處理的優(yōu)化

查閱參考文獻(xiàn)[4-10]，這6種農(nóng)藥沒有氣相色譜的檢測標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)行的凈化方法是吸附劑（PSA/C18/GCB）凈化和SPE柱凈化，PSA/C18/GCB單獨(dú)使用和混合使用凈化背景干擾大，凈化效果不理想。（圖1）氟羅里矽柱對(duì)苯醚甲環(huán)唑有一定的吸附作用，氨基柱凈化能有效的祛除雜質(zhì)干擾，得到滿意的回收（圖2）。

圖1 PSA/C18/GCB聯(lián)合凈化Fig.1　PSA/C18/GCB joint clean-up

圖2氨基柱凈化Fig.2　Am ino colum n purification

2.2線性方程、檢出限和定量限

配制0.05μg/mL～1.0μg/mL系列質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以氣相色譜的優(yōu)化條件進(jìn)樣，外標(biāo)法定量。6種農(nóng)藥的的質(zhì)量濃度與峰面積均呈良好的線性關(guān)系。在最低添加濃度0.05mg/kg下，以3倍的信躁比和10的信躁比推斷檢出限和定量限。6種農(nóng)藥的線性方程、檢出限及定量限見表1。

2.3方法的準(zhǔn)確度和精密度

在已知的陰性蘋果樣品分別加入6種農(nóng)藥的單個(gè)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，添加水平為0.05、0.1、1.0 mg/kg，每個(gè)加標(biāo)樣品做3個(gè)平行試驗(yàn)，重復(fù)測定3次，按1.2.2章節(jié)的氣相色譜條件測定回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），計(jì)算平均回收率為79%～125%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為不大于5%（見表1）。說明本方法靈敏度高，穩(wěn)定性好，準(zhǔn)確可靠，可作為蔬菜中6種農(nóng)藥殘留的檢測方法。圖3為標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，圖4為樣品添加色譜圖。

圖3～圖4中，依照順序依次為：1-氟啶脲；2-毒死蜱；3-二甲戊靈；4-氟啶脲；5-蟲螨腈；6-啶蟲脒；7-苯醚甲環(huán)唑。

表1　6種農(nóng)藥線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限、定量限、回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=3）Table1　6 kindsof pesticides linear equation，correlation coefficient，detection lim it，quantitation lim it，recovery and relative standard deviation（n=3）

圖3 標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖Fig.3　Chromatogram of thestandard solution

圖4 蘋果加標(biāo)樣品色譜圖Fig.4　App lespiked sam ple chromatogram s

2.4實(shí)際樣品分析

按本方法檢測山西省11個(gè)地市的蘋果樣品110個(gè)。從110個(gè)樣品中隨機(jī)抽取10個(gè)樣品按0.5mg/kg做加標(biāo)回收率試驗(yàn)，回收率為79%～125%，說明本方法能滿足實(shí)際樣品的分析要求。

3　結(jié)論

本文建立了蘋果中的6種農(nóng)藥在氣相色譜儀上的檢測方法。利用氨基柱凈化樣品，μ-ECD檢測器檢測樣品6種農(nóng)藥在3個(gè)加標(biāo)水平下的回收率為79%～125%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為不大于5%，定量限為0.006mg/kg～0.04mg/kg說明本方法靈敏度高，穩(wěn)定性好，可作為蔬菜中6種農(nóng)藥殘留的檢測方法。

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DO I：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.19.040

收稿日期：2014-12-29

作者簡介：王潔蓮（1980—），女（漢），高級(jí)農(nóng)藝師，碩士，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。

Simultaneous Determ ination for Six Pesticide Residues in Apple by Gas Chromntography w ith Electron Capture Detector

WANGJie-lian，YANHui-ping
（AgriculturalProductsQuality SafetyMonitoring Centerof ShanxiProvince，Taiyuan 030025，Shanxi，China）

Abstract：An analyticalmethod for determination of chlorfluazuron，Chlorpyrifosand six other residues in app le using gaschromatographywith electron capturedetector（GCECD）was developed.The sampleswere extracted with acetonitrile，further clean-up on amino column.The result showed that the relative standard deviations of six pesticide residues content was 1.97%-4.92%under this method for determination.The limits of quantification were 0.002 mg/kg-0.04 mg/kg and the limits of detection were 0.000 5 mg/kg-0.02 mg/kg.Six pesticides had a good linearity was obtained from range 0.05 to 2.0 mg/L and the r valueswere greater than 0.999，Themethod is feasibility and accurate for using to determinechlorfluazuron，Chlorpyrifos and six other residues in apple，the resultisaccordwith national level.

Key words：pesticide residues；apple；gas chromatography