李艷鳳

2-甲氧基雌二醇緩控釋制劑的體外釋藥研究

李艷鳳

【摘要】目的 考察2-甲氧基雌二醇緩控釋制劑的體外釋藥情況。 方法 按照2010年版《中華人民共和國藥典》規(guī)定的第一法，分別在pH 7．4 及pH 5．5的釋藥介質(zhì)中考察2-甲氧基雌二醇緩控釋制劑的體外釋藥情況。結(jié)果 在pH 7．4及 pH 5．5釋藥介質(zhì)中，與2-甲氧基雌二醇溶液對照組相比，所制備緩控釋制劑均顯示出緩釋效果且在pH 5．5釋藥介質(zhì)中釋藥相對較快。結(jié)論 制備的制劑具有緩控釋特性及對腫瘤靶部位的選擇性。

【關(guān)鍵詞】2-甲氧基雌二醇；緩控釋；體外釋藥

Objective Study the release characteristics of 2-methoxyestradio in vitro of targeted delivery system． Methods According to the first method of the“pharmacopoeia of the People＇s Republic of China”（2010）． In vitro drug release were carried out in the pH 7．4 and pH 5．5 dissolution medium． Results Compared with the control group，the preparation released slowly and released quickly relatively in pH 5．5 dissolution medium． Conclusion The preparation has a sustained release characteristic and tissue targeting selectively in tumour．

【Key words】 2-methoxyestradio，Sustained and controlled release，Drug release in vitro

2-甲氧基雌二醇（2-ME）為體內(nèi)雌二醇的代謝產(chǎn)物，存在于人體的血液及尿液中。2-ME與雌激素受體的結(jié)合率低， 而對多種腫瘤細胞具有抑制作用，不良反應發(fā)生率小［1］。其口服膠囊已被FDA批準完成二期臨床研究［2］。然而2-ME血漿消除率快，生物利用度低，所以如何使其在體內(nèi)達到一個長期有效的血藥濃度是該藥物研究的重難點。

理想的載藥體系，不僅應具備較高的載藥率，而且還要能實現(xiàn)藥物可控緩釋，在傳送過程（如參與血液循環(huán)）中不釋放或釋放少量藥物，當?shù)竭_癌細胞內(nèi)部或病變區(qū)域且在一定的外界條件下（如pH值變化、溫度變化等）才釋放出藥物從而實現(xiàn)高效治療［3］。本研究采用本課題組已制備的2-甲氧基雌二醇緩控釋制劑（2-MEFA-CHI-SWNTs），對其進行體外釋藥的研究，考察其緩控釋性能及對腫瘤靶部位的選擇性。

1　實驗材料

RF-5301型熒光分光光度計（日本島津儀器公司）；十二烷基磺酸鈉（天津市光復精細化工研究所）；2-甲氧基雌二醇緩控釋制劑（鄭州大學藥學院）；透析袋，截留分子量：8 000～12 000（美國聯(lián)合碳化公司）。

2　實驗方法

2.1 體外釋藥介質(zhì)中的2-ME標準曲線的建立

2-甲氧基雌二醇具有熒光特性，可以用熒光分光光度法進行定量。分別以pH 7.4（血液pH）及pH 5.5（細胞溶酶體pH）的釋藥介質(zhì)作為溶劑，配制濃度為10 μg/ml，5 μg/ml ，2 μg/ml ，1 μg/ml ，0.5 μg/ml 的2-ME溶液。利用熒光分光光度計，Ex=290 nm，Em=318 nm測定其熒光強度，并分別建立標準曲線。

2.2 體外釋藥的考察

透析法：分別精密移取1 ml制劑和2-ME同濃度的對照液，裝于透析袋內(nèi)，兩頭扎牢，置于轉(zhuǎn)籃內(nèi)，按照2010年版《中華人民共和國藥典》規(guī)定的第一法進行測定。釋放介質(zhì)為pH 7.4和pH 5.5含有0.4%十二烷基硫酸鈉的PBS溶液各100 ml，設置搖床轉(zhuǎn)速為100 r/min，溫度為（37.00±0.15）℃。分別在固定的時間點適量取樣，同時補充等量等溫的釋放介質(zhì)。樣品通過微孔濾膜，取續(xù)濾液進行熒光檢測。計算樣品各時間點2-ME的累積釋放量，以時間為橫坐標，以累計釋放百分率為縱坐標，可分別得到在中性和酸性環(huán)境中的體外釋藥曲線。

3　結(jié)果與討論

3.1 體外釋藥介質(zhì)中的標準曲線

因為熒光物質(zhì)的熒光強度會受到pH值的影響，所以本實驗分別建立了在pH 7.4和pH 5.5體外釋藥介質(zhì)中2-ME的標準曲線，分別是y=6.575 7x＋3.207 3，R2=0.999 4（pH 7.4）；y=6.725 4x＋1.738 2，R2=0.999 6（pH 5.5）。并分別選取了高、中、低三個濃度的標準溶液，測其回收率均在98%～102%，符合測定要求。

3.2 體外釋藥的考察

按試驗方法2.2項下所示對制劑的體外釋藥情況進行考察，分別獲得制劑在中性和酸性條件下的釋藥曲線。見圖1。

2-甲氧基雌二醇緩控釋制劑在體外釋放特點和2-ME溶液對照組相比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），累積釋放百分率見圖1所示。開始的5 h內(nèi)，2-ME溶液組藥物累積釋放率已達到93.8%，緩控釋制劑組在pH 7.4介質(zhì)中的累積釋放率不足45%，在pH 5.5介質(zhì)中的累積釋放率也僅為66%。溶液對照組的釋放在5 h就基本完成，緩控釋制劑組釋放則相對慢且平穩(wěn)，在酸性介質(zhì)中釋藥在10 h內(nèi)基本完成，而在中性介質(zhì)中釋藥則長達24 h。由此可見，2-甲氧基雌二醇緩控釋制劑無論在中性還是酸性環(huán)境下都具有一定的緩釋效果。由緩控釋制劑在pH 7.4及pH 5.5的釋放曲線的對比可以看出制劑在酸性介質(zhì)中釋藥相對較快，2 h內(nèi)釋放接近50%，而在pH 7.4中性介質(zhì)中釋放不足30%，可見緩控釋制劑對2-ME的釋放具有一定的pH響應特性，更有利于藥物到達內(nèi)環(huán)境偏酸性的腫瘤靶部位，從而增強藥物的選擇性。

圖1　緩控釋制劑體外藥物釋放曲線

參考文獻

［1］ 胡海英，張麗娜，張正全，等． 小鼠體內(nèi)2-甲氧基雌二醇靜脈乳劑的藥動學及組織分布特征［J］． 鄭州大學學報：醫(yī)學版，2011，46（1）：100-103．

［2］ 劉春紅，周倩，王凱． 甲氧基雌二醇的生物功能及其在子癇前期發(fā)生中的作用［J］． 生殖與避孕，2014，34（10）：852-856．

［3］ 李琳琳，陳東，丁明慧，等． 磁性微膠囊的制備及其藥物緩控釋性能［J］．物理化學學報，2007，23（12）：1969-1973．

The Study on Release Characteristics of 2-methoxyestradiol in Vitro of Targeted Delivery System

LI Yanfeng Seventh People’s Hospital of Zhengzhou City，Zhengzhou 450016，China

【Abstract】

【中圖分類號】R94

【文獻標識碼】A

【文章編號】1674-9316（2015）32-0136-02

doi：10．3969/j．issn．1674-9316．2015．32．096

作者單位：450016 鄭州市第七人民醫(yī)院藥學部