武桂芝 段文婷 李秀梅 周雪梅 白音夫

(1.內(nèi)蒙古自治區(qū)中醫(yī)醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020;2.內(nèi)蒙古易和皮膚病醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010;3.內(nèi)蒙古藥品食品監(jiān)督所，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010055)

本品唇形科糙蘇屬植物糙蘇Phlomis umbrosa Turcz.，以地上全草或根入藥。夏秋采割地上全草，秋季挖取根部，去凈泥土和雜質(zhì)，曬干。系蒙古族習(xí)用藥材，蒙藥名渥古樂金-突來。本品甘，糙，溫，平;止咳祛痰，祛風(fēng)活絡(luò)，消腫。用于感冒，慢性支氣管炎，風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛，腰痛，跌打損傷，瘡癤腫毒，是蒙醫(yī)常用藥［1］。目前尚無含量測定標(biāo)準(zhǔn)，本文依據(jù)糙蘇成分建立該品的綠原酸含量測定方法。

1 儀器與試劑

高效液相色譜儀(美國安捷倫公司)，TJ-912 型色譜分析平臺(太極計算機(jī)公司)。綠原酸對照品(110753-200413)由中國藥品生物制品檢定所提供;乙腈為色譜純;其他均為分析純試劑;水為純化水;糙蘇采于呼和浩特市蠻漢山。

2 方法學(xué)考察

2.1 色譜條件：色譜柱填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，色譜柱Kromasi-C18 (4.6mm×200mm，5μm)，流動相乙腈-水-磷酸(65：440：1)，流速1mL·min-1，柱溫30℃，檢測波長328nm，進(jìn)樣量10μL，理論板數(shù)按綠原酸峰≥5000。

2.2 測定溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備：精密稱取綠原酸對照品適量，置棕色量瓶中，甲醇溶解，配制成1mL 含0.28 mg 綠原酸對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備：取糙蘇，粉碎，過100 目篩，精密稱定50mg，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10mL，稱重，超聲處理30min ，放冷，稱重，補(bǔ)足減失重量，濾過，搖勻，即得。

2.3 線性關(guān)系考察：取綠原酸對照品溶液0.25、0.5、1、2、3、4、5(mL)，分置10mL 量瓶內(nèi)，甲醇稀釋至刻度，分別精密吸取10μL 進(jìn)樣，按上述色譜條件測定。結(jié)果，綠原酸在7 ～140 μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，回歸方程A=5452 +7008C，r=0.999 。

2.4 精密度試驗：取同一供試品溶液，在上述色譜條件下，連續(xù)進(jìn)樣6 次，測定綠原酸峰面積積分值，RSD 0.31%，精密度良好。

2.5 提取率的考察：供試品溶液行10、20、30、40 (min)的超聲處理。20min 后綠原酸含量不再增加，確定30min 為最適合提取時間。

2.6 穩(wěn)定性試驗：取同一份供試品溶液，分別于0、2、6、8(h)進(jìn)行測定，結(jié)果，綠原酸在8h 內(nèi)的峰面積積分值基本穩(wěn)定不變。

2.7 重復(fù)性試驗：取同一批號供試品(葉子)6 份，各約50mg，精密稱定，分別按上述擬定方法制備供試品及測定。樣品平均含量0.21%，RSD 0.52%。

2.8 回收率試驗：取上述含量的同批樣品6 份，每份約60mg，置50 mL 量瓶中，依次精密加入分別加入0.1mL(每mL 含綠原酸5.41mg)對照品溶液，揮去溶劑，按供試品溶液的制備操作，測定含量，計算回收率。綠原酸平均回收率為101.1%，RSD 為0.88%

2.9 樣品含量測定：取糙蘇藥材不同部位，按2.2.2 項下方法制備供試品溶液，按擬定的色譜條件測定綠原酸含量，根部0.11%，葉0.22%，莖枝0.08%，花0.51%，平均含量0.23%。

2.10 方法的專屬性：在擬定的色譜條件下，分別取對照品溶液和供試品溶液進(jìn)樣測定，得到特征峰，與雜質(zhì)分離良好，無干擾，見圖。

圖1 HPLC 圖譜

3 結(jié)論

綠原酸是糙蘇的主要活性成分，含量根部0.11%，葉0.22%，莖枝0.08%，花0.51%，平均含量0.23%。

方法學(xué)研究表明，HPLC 法測定糙蘇綠原酸含量，測定方法穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，準(zhǔn)確度高，色譜分離度好，無干擾。

［1］衛(wèi)生部藥典委員會. 衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)蒙藥分冊［S］.1998：57.