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        不同施灸方法對(duì)模型大鼠衰老相關(guān)因素的影響研究

        2015-07-13 02:13:44布仁圖亞斯欽圖
        中國(guó)民族醫(yī)藥雜志 2015年9期
        關(guān)鍵詞:造模直徑體重

        布仁圖亞 斯欽圖

        (1.赤峰市蒙醫(yī)中醫(yī)醫(yī)院,內(nèi)蒙古 赤峰 024000;2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院,內(nèi)蒙古 通遼 028000)

        1 材料與方法

        1.1 動(dòng)物:110 只純種4 月齡SD 大鼠,體重為雄性304 ±30g、雄性376 ±40 g、雌雄各半。

        1.2 器材:755B 紫外-可見分光光度機(jī)、固定熱水盒、電子分析天平、高速冷凍離心機(jī)、4-20 0C 和-80 0C 冰箱、水迷宮、游泳盒。

        1.3 試劑及施灸器:AUY120 型電子天平、MORRIS 水迷宮視屏跟蹤分析機(jī)、D-半乳糖(上??笊锛夹g(shù)有限公司,編號(hào):T0047)、艾灸由北京中醫(yī)醫(yī)藥大學(xué)提供。

        2 方法

        2.1 分組:將110 只SD 大鼠按體重隨機(jī)分成11 組。分別為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、治療組(用正交試驗(yàn)L9(34)設(shè)計(jì)組為:第1、2、3、4、5、6、7、8、9 組)。造模前將大鼠雌雄分開、在干凈舒適環(huán)境中飼養(yǎng)。每天將更換顆粒資料飲水和窩墊。試驗(yàn)第六wk 開始分別對(duì)所進(jìn)資料和飲水量進(jìn)行記錄。

        2.2 造模:成正常對(duì)照組外均用D-半乳糖按每wk 體重每日150mg/kg 的比例頸皮下注射,正常對(duì)照組注射同等劑量生理鹽水。在造模期間每wk 稱一次大鼠體重,并觀察大鼠運(yùn)動(dòng)舉止和皮毛的顏側(cè)色等外部特征。造模時(shí)間為6wk。出現(xiàn)大鼠皮毛顏色變黃脫落,眼光變呆,動(dòng)作緩慢,出現(xiàn)無精打采、駝背、怕冷,體重增加不明顯等外部特征,與文獻(xiàn)報(bào)道一致[2-5],即造模成功。

        3 標(biāo)本收集及檢測(cè)方法

        采用斷頭取血方法,將新取處的血放入低速離心機(jī),按3500rpm 的速度離心15min 后提取血清。超氧化歧酶(SOD)活性采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定,丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法測(cè)定,過氧化氫酶(CAT)含量采用比色法測(cè)定。

        4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

        采用正交設(shè)計(jì)助手v3.1 軟件處理。

        5 結(jié) 果

        5.1 造模狀況:正常對(duì)照組與模型對(duì)照組比較,體重有明顯的差異(P<0.01),表明造模后模型對(duì)照組體重增長(zhǎng)變化緩慢,見表1。

        造模后各灸療組與模型組大鼠體重比較,各灸療組大鼠體重增加比模型組快(P<0.05),說明造模成功后模型組大鼠體重增長(zhǎng)受限,見表2。

        除此之外,我們還觀察到,模型大鼠動(dòng)作比正常對(duì)照組拜年遲緩,毛色枯黃,精神萎靡不振等外部特征。

        表1 造模3wk 后正常對(duì)照組與模型對(duì)照組大鼠體重比較(±s,n=10)

        表1 造模3wk 后正常對(duì)照組與模型對(duì)照組大鼠體重比較(±s,n=10)

        組別 體重(g)P 316.82 ±23.49 <0.05模型對(duì)照組正常對(duì)照組283.76 ±27.32 <0.05

        表2 造模后各灸療組和模型對(duì)照組大鼠體重比較(±s,n=10)

        表2 造模后各灸療組和模型對(duì)照組大鼠體重比較(±s,n=10)

        注:各灸療組與模型對(duì)照組比較,☆P <0.05。

        組別 體重模型對(duì)照組311.12 ±22.03治療1 組 340.64 ±45.98☆治療2 組 338.90 ±37.53☆治療3 組 340.87 ±41.09☆治療4 組 342.07 ±39.78☆治療5 組 354.98 ±35.56☆治療6 組 365.87 ±35.78☆治療7 組 342.09 ±35.98☆治療8 組 357.50 ±32.98☆治療9 組 337.25 ±38.36☆

        5.2 正交設(shè)計(jì)優(yōu)化SOD 的活性

        5.2.1 SOD 的因素及水平:根據(jù)文獻(xiàn)參考資料確定時(shí)間、灸墊、直徑作為考查因素缺,以測(cè)定SOD 的活性為考察指標(biāo),選用L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn)。因素及水平見表3。

        表3 因素水平設(shè)計(jì)表

        5.2.2 試驗(yàn)方法:按照L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn),并將測(cè)定結(jié)果填于表4 中,見表3、表4。

        表4 SOD 的活性優(yōu)化L9(34)表及實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        5.2.3 結(jié)果:從直觀分析及方差分析可知:SOD 的活性優(yōu)化。A、B、C 各因素水平之間均無顯著性差異,最佳SOD 的活性條件為A2B2C1 即為:用10min 時(shí)間0.2cm 灸墊0.8的直徑。

        表5 方差分析

        5.2.4 試驗(yàn)方法:按照L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn),并將測(cè)定結(jié)果填于表6 中,見表3、表6。

        表6 MDA 的活性優(yōu)化L9(34)表及實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        續(xù)表6 MDA 的活性優(yōu)化L9(34)表及實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        5.2.5 結(jié)果:從直觀分析及方差分析可知:MDA 的活性優(yōu)化。A、B、C 各因素水平之間均無顯著性差異,最佳MDA的活性條件為A2B2C2 即為:用10min 時(shí)間、0.2cm 灸墊、1.0 的直徑。

        表7 方差分析

        5.2.6 試驗(yàn)方法:按照L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn),并將測(cè)定結(jié)果填于表8 中,見表3 表8。

        表8 CAT 的活性優(yōu)化L9(34)表及實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        5.2.7 結(jié)果:從直觀分析及方差分析可知:CAT 的活性優(yōu)化。A、B、C 各因素水平之間均無顯著性差異,最佳CAT 的活性條件為A2B2C2 即為:用10min 時(shí)間、0.2cm 灸墊、1.0的直徑。

        表9 方差分析

        6 結(jié)論與討論

        根據(jù)上述試驗(yàn),不同施救方法對(duì)SOD 的活性最佳時(shí)間為10min、灸墊為0.2cm、直徑為0.8cm,MDA 的活性最佳時(shí)間為10min、灸墊為0.2cm、直徑為1.0cm,CAT 最佳時(shí)間為10min、灸墊為0.2cm、直徑為1.0cm。

        本實(shí)驗(yàn)通過正交設(shè)計(jì)對(duì)SOD 活性、CAT 和MDA 的含量進(jìn)行了優(yōu)化,通過多個(gè)因素、多個(gè)水平研究表明,蒙醫(yī)不同的灸療法施灸后可提高免疫功能。

        [1]斯欽圖,烏云格日樂,“胃穴”“火降穴”施灸對(duì)功能性消化不良大鼠的影響及其組穴原理[J],針灸臨床雜志,2008,3,(24):163-165.

        [2]徐智,吳國(guó)明,錢桂生,大鼠衰老模型的初步建立[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2003,4(25):9-11.

        [3]博·阿古拉,蒙醫(yī)傳統(tǒng)療法大成[M]. 赤峰:內(nèi)蒙古科學(xué)技術(shù)出版社,2000,3:172-174.

        [4]朱亞診,朱虹光,D-半乳糖致衰老動(dòng)物模型的建立及其檢測(cè)方法[J]. 針灸臨床雜志,2010,3,(14):160-161.

        [5]斯欽圖,博·阿古拉等,蒙醫(yī)灸療法抗衰老二三穴組穴配伍規(guī)律試驗(yàn)研究[J].期刊,2010,12(6):48-49.

        [6]烏云格日樂,斯欽圖. 蒙醫(yī)灸療的保健作用及其機(jī)理[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志,2007,4(4):122-124.

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