張 晶，劉 建，周 婷，蘇 江，董 巍，周 彬

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 a.風(fēng)濕免疫科；b.中心實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610072)

白介素17及單核細(xì)胞趨化因子-1與長(zhǎng)程類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血管病變的相關(guān)性研究

張 晶a，劉 建a，周 婷a，蘇 江a，董 巍b，周 彬a

(四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 a.風(fēng)濕免疫科；b.中心實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610072)

目的 研究長(zhǎng)程類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者血清白介素17(IL-17)、單核細(xì)胞趨化因子1(MCP-1)與血管病變之間的相關(guān)性，進(jìn)而探討RA血管病變的發(fā)病機(jī)制。方法 選擇長(zhǎng)程RA患者(RA組)及健康體檢者(對(duì)照組)各94例，收集兩組紅細(xì)胞沉降率、C反應(yīng)蛋白、類風(fēng)濕因子、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體、DAS-28等實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，檢測(cè)兩組血清的IL-17和MCP-1濃度，采用動(dòng)脈硬化測(cè)定儀檢測(cè)肱-踝動(dòng)脈脈搏波傳導(dǎo)速度(baPWV)，分析各項(xiàng)指標(biāo)與baPWV的相關(guān)性。結(jié)果 RA組baPWV、IL-17和MCP-1顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)。多元回歸分析顯示baPWV與年齡、心率、IL-17及MCP-1呈正相關(guān)(P< 0.05)，四種影響因素對(duì)多元回歸方程貢獻(xiàn)率分別為8.04%、1.36%、23.39%和14.97%。結(jié)論 RA患者的baPWV、IL-17和MCP-1水平均顯著高于對(duì)照組，且IL-17及MCP-1可能與RA的血管病變機(jī)制有關(guān)，IL-17有望成為一種篩查RA患者血管病變的指標(biāo)。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；白介素-17；單核細(xì)胞趨化因子-1；血管病變

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種以慢性對(duì)稱性非化膿性多關(guān)節(jié)炎為典型特征的系統(tǒng)性自身免疫性疾病，血管病變是其關(guān)節(jié)外病變的表現(xiàn)之一。目前已有大量的研究顯示RA患者心血管疾病的發(fā)病率(3.43%)遠(yuǎn)高于一般人群(0.59%)，心血管事件占RA死因的42%，并且RA病程的長(zhǎng)短與心血管事件風(fēng)險(xiǎn)成正相關(guān)，使得RA患者的生存期縮短3～18年[1]。在RA的心血管事件中又以動(dòng)脈粥樣硬化病變?yōu)橹?，大量研究表明血管僵硬度增加與心腦血管事件死亡率密切相關(guān)[2，3]。研究也發(fā)現(xiàn)，RA患者存在動(dòng)脈僵硬度增加[4]，如何早期評(píng)估RA患者的血管病變并早期進(jìn)行干預(yù)對(duì)于改善RA的預(yù)后尤其重要。目前一致認(rèn)為炎癥反應(yīng)是動(dòng)脈硬化發(fā)生、進(jìn)展和斑塊破裂形成血栓的共同通道，大量的炎癥細(xì)胞及炎性介質(zhì)參與其中。白介素17(Interleukin-17，IL-17)作為一種誘導(dǎo)炎癥強(qiáng)有力的細(xì)胞因子，在多種自身免疫性疾病中發(fā)揮重要作用。其在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用也被廣泛研究，但仍存在爭(zhēng)議[5，6]。單核細(xì)胞趨化因子1(monocytechemoattracta protein-1，MCP-1)作為一種特異性單核細(xì)胞趨化因子，能促使動(dòng)脈粥樣硬化的形成，在其早期起重要作用[7]。本研究通過檢測(cè)長(zhǎng)程RA患者血漿中IL-17、MCP-1濃度，并結(jié)合近年開發(fā)的評(píng)估脈搏波傳導(dǎo)速度(pulse wave velocity，PWV)的新方法上臂-腳踝PWV(brachial-ankle pulse wave velocity，baPWV)來較準(zhǔn)確地綜合反映動(dòng)脈僵硬度[8]，觀察IL-17、MCP-1與baPWV是否存在關(guān)聯(lián)，初步探討它們之間的相關(guān)性，以期進(jìn)一步闡明IL-17、MCP-1在RA患者中動(dòng)脈硬化的可能機(jī)制，進(jìn)而有利于早期發(fā)現(xiàn)、改變其炎癥狀態(tài)，為治療RA的血管病變提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料 連續(xù)納入2012年10月至2014年4月在四川省人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院的RA患者94例，年齡24～70歲，均符合1987年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)的RA分類標(biāo)準(zhǔn)。病程均在5年以上，排除了踝臂血壓指數(shù)(ankle brachial index，ABI)異常6例。對(duì)照組94例，為與RA組年齡、性別、體重指數(shù)(BMI)水平相匹配的健康體檢者。入選對(duì)象均排除血脂異常、吸煙、嗜酒、心腦血管疾病史、原發(fā)性或繼發(fā)性高血壓、感染性疾病、惡性腫瘤，以及其他自身免疫性疾病、糖尿病及肝腎功不全的患者。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。兩組年齡、性別、體重指數(shù)、身高、心率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢查 兩組患者均測(cè)定C反應(yīng)蛋白(CRP)、類風(fēng)濕因子(RF)，并采用ELISA法檢測(cè)血清中IL-17和MCP-1的濃度水平。測(cè)定RA組DAS-28評(píng)分、血沉(ESR)及抗環(huán)瓜氨酸(CCP)抗體。

1.3 baPWV的測(cè)量 采用歐姆龍BP-203RPEⅢ動(dòng)脈硬化測(cè)定儀測(cè)量baPWV和ABI值。患者靜息 15 min以上，室溫25 ℃左右，平臥于檢查床上，四肢縛以四個(gè)示波血壓袖帶，連接好I導(dǎo)聯(lián)心電圖(ECG)電極，并將一個(gè)心音圖(PCG)傳感器放置在心電圖胸導(dǎo)聯(lián)V2 的位置上，4 個(gè)袖帶同時(shí)充放氣，并監(jiān)測(cè)I 導(dǎo)聯(lián)ECG 和PCG。上臂波形的波峰和踝部波形的波峰之間的時(shí)間間隔被定義為上臂到踝部的時(shí)間間隔(△tba)，根據(jù)患者的身高自動(dòng)計(jì)算出baPWV 測(cè)量點(diǎn)之間的距離：從心臟到上臂的距離(lb)=0.2195×身高(cm)-2.0734，從心臟到腳踝的距離(la)=0.8129×身高(cm)+12.328，baPWV=(la-lb)/△tba。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間指標(biāo)的比較采用t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用中位數(shù)表示，使用Wilcoxon符號(hào)秩檢驗(yàn)比較；計(jì)數(shù)資料以構(gòu)成比描述；各項(xiàng)臨床指標(biāo)與baPWV的關(guān)系采用多元逐步回歸分析法分析。P< 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的比較 兩組之間CRP、RF、IL-1、MCP-1及baPWV值比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P< 0.01)。因健康對(duì)照組未行ESR、抗CCP抗體及DAS-28檢查，故未做相關(guān)比較。

表2 兩組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.2 baPWV與各臨床指標(biāo)間的多元逐步回歸分析 將年齡、性別、BMI、心率、病程、DAS-28、CRP、ESR、RF、抗CCP、IL-17、MCP-1進(jìn)行多元逐步回歸法分析，比較其與baPWV的關(guān)系。結(jié)果表明：年齡、心率、IL-17、MCP-1與baPWV呈正相關(guān)，四種影響因素對(duì)多元回歸方程貢獻(xiàn)率分別為年齡(8.04%)、心率(1.36%)、IL-17(23.39%)、MCP-1(14.97%)。而性別、病程、BMI、DAS-28、CRP、ESR、RF、抗CCP抗體均未進(jìn)入最終的回歸模型。

表3 以baPWV作為應(yīng)變量的多元回歸分析

3 討論

RA的血管病變是其關(guān)節(jié)外病變的表現(xiàn)之一，主要表現(xiàn)為血管壁淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及漿細(xì)胞浸潤(rùn)，血管內(nèi)膜增生，纖維蛋白樣壞死或血栓形成。其機(jī)制尚未完全清楚，可能有多因素的參與：如慢性系統(tǒng)性炎癥、免疫因素、糖皮質(zhì)激素的使用、傳統(tǒng)的危險(xiǎn)因素等。而動(dòng)脈粥樣硬化是其血管病變的早期表現(xiàn)。已有研究證實(shí)動(dòng)脈血管僵硬度是獨(dú)立于其他心血管事件危險(xiǎn)因素的一重要危險(xiǎn)因素[9]，PWV 是判斷動(dòng)脈僵硬度的經(jīng)典無創(chuàng)性指標(biāo)之一[10]，是指心臟每一次跳動(dòng)泵出血液的沖擊波動(dòng)傳到動(dòng)脈末梢的傳導(dǎo)速度，可以早期檢測(cè)動(dòng)脈血管功能的異常。而本研究采用的baPWV是近年較為常用的一種方法，通過肘窩至腳踝一段動(dòng)脈僵硬度的綜合反映，能夠較準(zhǔn)確地評(píng)估PWV及預(yù)測(cè)未來心血管事件的發(fā)生[8]。在本研究中，RA組的baPWV高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P= 0.008)。提示RA患者常伴有較高的動(dòng)脈硬化發(fā)生率，這可能是心血管事件的又一大類潛在高危人群，故在臨床中應(yīng)對(duì)RA患者進(jìn)行常規(guī)心血管疾病方面的篩查，以便早期診治，改善預(yù)后。

既往研究發(fā)現(xiàn)IL-17和MCP-1是與早期動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)的炎癥因子[5～7]。IL-17是由輔助性 T 細(xì)胞 Th17 分泌產(chǎn)生的特征性細(xì)胞因子。IL-17 家族細(xì)胞因子已在人動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中被檢測(cè)到[11]。大量研究表明，在人或小鼠模型的血管性疾病中 IL-17 表達(dá)是增加的，包括：原發(fā)性自身免疫性血管炎、動(dòng)脈粥樣硬化中的慢性血管炎癥，并且與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[5，12]。然而也有研究顯示IL-17在動(dòng)脈粥樣硬化中可能起保護(hù)作用[6]。目前無論是基礎(chǔ)研究還是臨床研究IL-17在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用仍存在爭(zhēng)議。IL-17 似乎是通過多層次的炎癥變化如細(xì)胞粘附、外滲、細(xì)胞活化 T 細(xì)胞共刺激/增殖和抗原提呈在動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)[5，12]中參與促動(dòng)脈粥樣硬化過程。而IL-17具有調(diào)控作用，不僅是炎癥及免疫反應(yīng)的重要調(diào)節(jié)因子，使T細(xì)胞的作用增強(qiáng)，調(diào)節(jié)先天及適應(yīng)性免疫反應(yīng)，并且可激活RhoA/Rho激酶信號(hào)通路，從而導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙，其可能是促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的因子，可能與動(dòng)脈粥樣硬化存在因果聯(lián)系。在本研究中，我們初步觀察到RA患者組血清IL-17濃度明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P= 0.000)，且與baPWV呈正相關(guān)，進(jìn)一步證明了IL-17對(duì)動(dòng)脈硬化的促進(jìn)作用。提示在除了年齡、心率這兩種影響動(dòng)脈硬化的因素外，對(duì)血清IL-17水平的監(jiān)測(cè)有望成為一種判斷長(zhǎng)程RA患者動(dòng)脈粥樣硬化病情進(jìn)展、預(yù)后及指導(dǎo)臨床診治的手段。

MCP-1作為一種特異性單核細(xì)胞趨化因子，通過與相對(duì)應(yīng)的受體結(jié)合，使血液中的單核細(xì)胞遷入血管內(nèi)膜下，活化為巨噬細(xì)胞，攝取已進(jìn)入內(nèi)膜并發(fā)生修飾的脂蛋白形成單核細(xì)胞源泡沫細(xì)胞，促使動(dòng)脈粥樣硬化的形成，在動(dòng)脈粥樣硬化的早期起重要作用[7]。同時(shí)還可刺激成纖維細(xì)胞上調(diào)TGF-β和增加基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)而使膠原纖維增多[13]。本研究發(fā)現(xiàn)RA患者組血清MCP-1水平明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P= 0.000)，并且與baPWV呈正相關(guān)，但其貢獻(xiàn)率低于IL-17，高于年齡和心率。因IL-17可誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等多種細(xì)胞分泌MCP-l[14，15]，故我們推測(cè)IL-17即可通過誘導(dǎo)MCP-1的表達(dá)間接介導(dǎo)單個(gè)核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞向炎癥部位的遷移、浸潤(rùn)，從而參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展[16]。但在動(dòng)脈粥樣硬化過程中IL-17與MCP-1之間的信號(hào)通路及產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)還需進(jìn)一步研究。

在本研究中，雖然RA組與對(duì)照組之間CRP、RF的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但與baPWV無明顯相關(guān)性，提示CRP、RF可能只是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生時(shí)伴隨的一種現(xiàn)象，不能從本質(zhì)上反應(yīng)動(dòng)脈硬化的作用機(jī)制。本研究同時(shí)觀察到病程這一因素與baPWV也無明顯相關(guān)性，可能與本研究入組患者均為長(zhǎng)程RA患者，統(tǒng)計(jì)上存在一定偏倚有關(guān)，有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本種類深入大規(guī)模的隨訪研究。

綜上所述，本研究就 IL-17、MCP-1在RA患者血清中的水平與血管病變嚴(yán)重程度之間作一初步探討，觀察到二者與動(dòng)脈硬化之間有正相關(guān)性，然而其與RA相關(guān)血管損害的作用機(jī)制、因果聯(lián)系及其對(duì)其他心血管疾病的預(yù)測(cè)及評(píng)估價(jià)值仍有待進(jìn)一步深入研究及探討，以期有利于早期發(fā)現(xiàn)、改變RA患者伴動(dòng)脈粥樣硬化時(shí)的炎癥狀態(tài)，為RA患者的血管病變提供新的監(jiān)測(cè)、預(yù)測(cè)指標(biāo)，而IL-17作為一種血管炎癥因子，在RA并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防及治療領(lǐng)域有著廣闊的前景。

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The correlation between IL-17，MCP-1 and vasculopathy in rheumatoid arthritis patients with long course

ZHANG Jinga，LIU Jiana，ZHOU Tinga，SU Jianga，DONG Weib，ZHOU Bina

(a.Department of Rheumatology and Immunology，b.clinical laboratory，Sichuan Academy of Medical Sciences & Sichuan Provincial People’s Hospital，Chengdu 610072，China)

ZHOUBin

Objective To study the relationship between the serum concentrations of interleukin-17(IL-17)，monocytechemoattracta protein-1(MCP-1)and vasculopathy in rheumatoid arthritis(RA)patients with long course，and to investigate the mechanism of vasculopathy in RA.Methods Ninety-four RA patients with long course and ninety-four normal persons were collected，and recorded laboratory indexes，including erythrocyte sedimentation rate(ESR)，C-reactive protein(CRP)，rheumatoid factor(RF)，anti cyclic citrullinated peptide antibody and DAS-28.Serum concentrations of IL-17 and MCP-1 were determined.Atherosclerosis Tester was used to examine baPWV in 94 RA patients and 94 healthy controls.The relationship between all indexes and baPWV was examined.Results Compared with controls，we found that RA patients had a significantly higher prevalence of baPWV，IL-17and MCP-1.The concentration of IL-17，MCP-1，age and heart rate were positively related to the baPWV by multiple regression analysis，the R2change was 23.39%，14.97%，8.04% and 1.36% respectively.Conclusion There was a significantly higher prevalence of baPWV，IL-17 and MCP-1 in RA group than control group.IL-17 and MCP-1 may be involved in the occurrence and development of vasculopathy in RA，and IL-17 may become an index for early screening of high risk population suffering from vasculopathy in patients with RA.

Rheumatoid arthritis； Interleukin-17； Monocytechemoattracta protein-1； Vasculopathy

四川省衛(wèi)生廳科研基金資助項(xiàng)目(編號(hào)：110250)

周 彬，男，主任醫(yī)師，碩士研究生導(dǎo)師。中華醫(yī)學(xué)會(huì)風(fēng)濕病學(xué)分會(huì)委員，中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)風(fēng)濕免疫科醫(yī)師分會(huì)委員，中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)免疫吸附學(xué)術(shù)委員會(huì)常務(wù)委員，中華醫(yī)學(xué)生物免疫學(xué)會(huì)首屆學(xué)術(shù)委員會(huì)常務(wù)委員，國(guó)家風(fēng)濕病數(shù)據(jù)中心專家委員會(huì)委員，中國(guó)系統(tǒng)性紅斑狼瘡研究協(xié)作組(CSTAR)執(zhí)行委員會(huì)委員，中國(guó)健康促進(jìn)基金會(huì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡專項(xiàng)基金專家委員會(huì)委員，四川省免疫學(xué)會(huì)常務(wù)理事，四川省免疫學(xué)會(huì)風(fēng)濕免疫專業(yè)委員會(huì)主任委員，四川省風(fēng)濕病學(xué)專業(yè)委員會(huì)副主任委員，四川省醫(yī)師協(xié)會(huì)風(fēng)濕免疫分會(huì)候任會(huì)長(zhǎng)。主要研究方向：彌漫性結(jié)締組織病的發(fā)病機(jī)制及免疫治療。

R593.22

A

1672-6170(2015)05-0062-04

2015-07-17)