阮莉莎谷勇侯杰榮

(1.宜賓衛(wèi)生學(xué)校，四川 宜賓 644000；2.瀘州醫(yī)學(xué)院，四川 瀘州 646000)

芍藥甘草湯對蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位的影響

阮莉莎谷勇1△侯杰榮2

(1.宜賓衛(wèi)生學(xué)校，四川 宜賓 644000；2.瀘州醫(yī)學(xué)院，四川 瀘州 646000)

目的：觀察芍藥甘草湯對蟾蜍離體坐骨神經(jīng)動作電位閾刺激、不應(yīng)期及傳導(dǎo)速度的影響，研究其對坐骨神經(jīng)電生理特性的作用。方法：將制備的蟾蜍坐骨神經(jīng)干分為閾刺激、不應(yīng)期、傳導(dǎo)速度3組，引導(dǎo)神經(jīng)干動作電位，分別測其正常時與加藥后的閾刺激、不應(yīng)期、傳導(dǎo)速度的變化。結(jié)果：芍藥甘草湯能夠提高蟾蜍離體坐骨神經(jīng)閾刺激，延長不應(yīng)期，與對照組比有顯著性差異(P <0.01)；減慢傳導(dǎo)速度，與對照組比有顯著性差異(P<0.01)。結(jié)論：芍藥甘草湯對蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位的抑制作用與提高閾刺激、延長不應(yīng)期、減慢傳導(dǎo)速度相關(guān)。

芍藥甘草湯；離體蟾蜍坐骨神經(jīng)干；動作電位

芍藥甘草湯源于東漢張仲景《傷寒論·太陽篇》，該方藥少而力專，是緩急止痛的著名方劑，由芍藥和甘草組成，主治營陰不足、肝脾不和，癥見脘腹諸痛， 四肢攣急等證候。隨著現(xiàn)代藥理和臨床研究的不斷發(fā)展，其應(yīng)用范圍非常廣泛，主要應(yīng)用于呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、神經(jīng)肌肉系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)等方面的疾病，實驗研究證實本方具有明顯的鎮(zhèn)痛、抗炎、解痙等藥理作用[1]。據(jù)文獻(xiàn)報道芍藥甘草湯或芍藥甘草湯加味方治療坐骨神經(jīng)痛療效較好[2-3]。本實驗從電生理的角度，觀察芍藥甘草湯煎液對蟾蜍坐骨神經(jīng)復(fù)合動作電位閾刺激、不應(yīng)期、傳導(dǎo)速度等的影響，以進(jìn)一步研究和開發(fā)利用芍藥甘草湯這類方劑資源。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗材料

白芍、甘草購于宜賓市皮仁堂藥材公司；中華大蟾蜍18只，雌雄兼用，由瀘州醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供；任氏液，所用試劑均為化學(xué)純；BL-420 生物機(jī)能實驗系統(tǒng)(成都泰盟)；電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；神經(jīng)屏蔽盒(四川成都泰盟科技有限公司)。

1.1.2 芍藥甘草湯的制備

分別稱取白芍30 g、甘草15 g，加水浸泡30 min后，加熱煮沸20 min，濾過；濾渣繼續(xù)加水煮沸30 min。合并兩次水煎液用文火濃縮至生藥濃度為1.0 g·mL-1[4]。

1.2 方法

1.2.1 實驗動物分組與坐骨神經(jīng)干標(biāo)本制備

取蟾蜍18 只，按要求制備蟾蜍的坐骨神經(jīng)干標(biāo)本[5]，游離后均置于任氏液中5 min以穩(wěn)定其興奮性，待其生理指標(biāo)穩(wěn)定后隨機(jī)分成閾刺激、不應(yīng)期、傳導(dǎo)速度3組，每組12 條，測閾刺激，含芍藥甘草湯濾紙片置神經(jīng)干電極刺激端；測不應(yīng)期與速度，含芍藥甘草湯濾紙片置神經(jīng)干兩對引導(dǎo)電極之間，加藥前后對比。

1.2.2 動作電位的引導(dǎo)并記錄

分別將制備好的坐骨神經(jīng)干標(biāo)本置于神經(jīng)屏蔽盒的電極上，外周端接刺激電極，中樞端接引導(dǎo)電極，每隔2 min測量每一復(fù)合動作電位的閾刺激、不應(yīng)期及傳導(dǎo)速度，分別記錄。

1.2.3 測量指標(biāo)的描述

(1)動作電位引導(dǎo)：以最小正電壓至刺激前基線為準(zhǔn)，引導(dǎo)出動作電位的刺激強(qiáng)度；(2)動作電位不應(yīng)期的測定：按動作電位記錄方法引導(dǎo)動作電位，記錄不應(yīng)期；(3)傳導(dǎo)速度的測定：按動作電位記錄方法引導(dǎo)動作電位，記錄兩對引導(dǎo)電極動作電位起始部時間差(t，s)和兩對引導(dǎo)電極之間的距離(d，m)，根據(jù)下列公式計算動作電位的傳導(dǎo)速度：V(m·s-1)=d(m)/t(s)[6]。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果

2.1 芍藥甘草湯對坐骨神經(jīng)干復(fù)合動作電位閾刺激和不應(yīng)期的影響

實驗組與對照組相比，藥物作用坐骨神經(jīng)干，閾刺激增大，興奮性降低，不應(yīng)期延長，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 芍藥甘草湯對蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位閾值、不應(yīng)期的影響

注：與對照組比較，*P <0.01。

2.2 芍藥甘草湯對坐骨神經(jīng)干復(fù)合動作電位傳導(dǎo)速度的影響

實驗組與對照組相比，藥物作用坐骨神經(jīng)干，傳導(dǎo)速度變慢，具有統(tǒng)計學(xué)意義，見表2。

表2 芍藥甘草湯對蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位傳導(dǎo)速度的影響

注：與對照組比較，*P <0.01。

3 討論

芍藥甘草湯為中醫(yī)臨床常用的組方，有確切的緩急止痛作用，廣泛被臨床醫(yī)生應(yīng)用于胃脘痛、頭痛、坐骨神經(jīng)痛、心絞痛、腎絞痛、行經(jīng)痛證、軟組織損傷痛、術(shù)后疼痛、肢體肌肉痛性痙攣、骨傷科疾病、癌癥疼痛、婦產(chǎn)科疾病等各種疼痛性疾病[7]?，F(xiàn)代藥理研究表明，芍藥甘草湯能明顯的提高熱板法中小鼠的痛閾值，減少扭體實驗中小鼠的扭體次數(shù)，顯著提高輻射熱照射大鼠的痛閾，具有明顯的鎮(zhèn)痛作用[8]；其鎮(zhèn)痛效果與方中白芍與甘草的配伍比例有關(guān)，報道認(rèn)為以2：1或3：1時鎮(zhèn)痛作用最佳[4]。本實驗結(jié)果表明芍藥甘草湯能提高蟾蜍離體坐骨神經(jīng)閾刺激，延長不應(yīng)期，降低興奮性，對坐骨神經(jīng)動作電位傳導(dǎo)具有明顯阻滯作用。

1 曹艷,旺建偉,段淑香,等. 芍藥甘草湯臨床及藥理研究近況[J]. 中醫(yī)藥信息, 2006, 23(3):41-43.

2 廖偉平. 活絡(luò)效靈丹合芍藥甘草湯治療坐骨神經(jīng)痛療效觀察[J]. 中醫(yī)臨床研究, 2013, 10(5):84-85.

3 張正社. 芍藥甘草湯加味治療坐骨神經(jīng)痛45例[J]. 湖南中醫(yī)藥導(dǎo)報, 2000, 7:28-29.

4 鄭富超,鄭秀麗,郭玉成,等. 芍藥甘草湯不同配伍比例鎮(zhèn)痛作用的實驗研究[J]. 承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 2008, 25(2):213-213.

5 李旭偉,張俊清,羅露,等. 辣椒堿對離體蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位的影響[J]. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生, 2011, 28(7):979-980.

6 汪瑤,謝偉英,沈潔波,等. 附子湯對蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位的影響[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報, 2012, 14(2):192-193.

7 何偉波. 芍藥甘草湯緩急止痛作用機(jī)制研究的探討[J]. 北方藥學(xué), 2013, 10(6):101-101.

8 日高隆雄.芍藥甘草湯對紫杉醇誘發(fā)疼痛小鼠模型的鎮(zhèn)痛效果[J]. 國外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊, 2002, 24(5):298-298.

Effects of Shaoyao gancao decoction on the compound action potential of toad′s sciatic nerves

Ruan Li-Sha1, Gu Yong1△, Hou Jie-Rong2

(1.Yibin Health School, Sichuan Yibin 644000;2.Pharmacetical School, Luzhou Medical College, Sichuan Luzhou 646000)

Objective：To investigate the effects of Shaoyao gancao decoction on toad sciatic nerve action potential threshold stimulation, refractory period and conduction velocity, and its influence on the electrophysiological characteristics of sciatic nerve. Methods: Prepared sciatic nerves were divided into three groups of the threshold of stimulation, refractory period and conduction velocity. Guiding the neural stem action potentials, its normal post-stimulation threshold, refractory period, conduction velocity changes were measured. Results: Shaoyao gancao decoction can significantly improve the threshold of toad sciatic nerve stimulation, prolong refractory period (P<0.01); Shaoyao gancao decoction can significantly slow conduction velocity(P<0.01). Conclusions: The inhibitory effect of Shaoyao gancao decoction on sciatic nerve action may be related with improving potential threshold stimulation, prolonging refractory period and slowing conduction velocity.

Shaoyao gancao decoction; Sciatic nerve of toad in vitro; Action potential

阮莉莎，女，講師，主要從事生理學(xué)教學(xué)、科研工作，Email：ruanlisha123@163.com。

△通訊作者：谷勇，男，講師，主要從事中藥鑒定及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究工作，Email：guyong9869@163.com。

2015-2-9)