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        芷歸片對(duì)復(fù)方地芬諾酯便秘模型小鼠的治療作用研究

        2015-06-15 18:20:30祝飛美李俊龍倪小清詹雁阮佳徐超群劉小康
        四川生理科學(xué)雜志 2015年1期
        關(guān)鍵詞:麻仁墨汁復(fù)方

        祝飛美 李俊龍 倪小清 詹雁 阮佳 徐超群 劉小康△

        (1.四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院藥理教研室,四川 成都 610041;2.四川省中醫(yī)藥科學(xué)院,四川 成都 610041)

        芷歸片對(duì)復(fù)方地芬諾酯便秘模型小鼠的治療作用研究

        祝飛美1李俊龍1倪小清1詹雁2阮佳2徐超群2劉小康1△

        (1.四川大學(xué)華西基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與法醫(yī)學(xué)院藥理教研室,四川 成都 610041;2.四川省中醫(yī)藥科學(xué)院,四川 成都 610041)

        目的:研究芷歸片對(duì)復(fù)方地芬諾酯(DC)便秘模型小鼠的治療作用。方法:昆明種小鼠雌雄各半按體重隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照麻仁丸(6g·kg-1)組、芷歸片低、中、高(1.8、3.6、7.2 g·kg-1)分別相當(dāng)于生藥量13.392、26.784、53.568 g·kg-1)劑量組,觀察芷歸片對(duì)復(fù)方地芬諾酯(DC)便秘模型小鼠小腸碳墨推進(jìn)率、首次黑便排出時(shí)間和6 h排出黑便顆粒數(shù)的影響。結(jié)果:芷歸片高劑量組可明顯縮短小鼠首次排便時(shí)間(P<0.05),增加6 h排便顆粒數(shù)(P<0.05),并且能增加小腸碳墨推進(jìn)率(P<0.05)。結(jié)論:芷歸片能夠有效的改善便秘癥狀,提高患者的生活質(zhì)量。

        芷歸片;復(fù)方地芬諾酯;首次排便時(shí)間;排黑便數(shù);小腸推進(jìn)率

        便秘是一種綜合性臨床疾病,而不是單獨(dú)一種疾病,在消化內(nèi)科疾病中較為常見,發(fā)病率高,各年齡段人群均會(huì)發(fā)生,其中女性對(duì)于男性,老年多于青壯年。其臨床癥狀主要表現(xiàn)在排便次數(shù)減少、糞便量減少、糞便干結(jié)、排便費(fèi)力等。通常以排便頻率減少為主,一般每2-3天或更長(zhǎng)時(shí)間排便一次或每周<3次即為便秘,如超過(guò)6個(gè)月即為慢性便秘[1]。便據(jù)調(diào)查顯示北京、上海、廣州、西安、成都、沈陽(yáng)6個(gè)地區(qū)8252名60歲以上老年人的便秘發(fā)生率為11.5%,且發(fā)病率隨年齡上升而增加[2]。它不僅影響患者的生理功能,還會(huì)影響患者的生活質(zhì)量。由于便秘的復(fù)雜性,早期以及合理的治療,對(duì)改善患者生活質(zhì)量有顯著提升。

        芷歸片依據(jù)中醫(yī)對(duì)便秘的辨證論治,以傳統(tǒng)方劑二靈散為基礎(chǔ),且輔以決明子形成新處方。處方中當(dāng)歸為君藥,味甘、辛、微苦,香郁行散,可升可降,具有補(bǔ)血,活血,調(diào)經(jīng)止痛,潤(rùn)腸通便的功效[3]。白芷為臣藥,其辛,溫,白芷能松弛平滑肌,其水提物、醚提物和白芷香豆素,均具有對(duì)抗乙酰膽堿,松弛家兔腸管痙攣性收縮的作用,對(duì)大便受情緒影響者療效明顯[4]。決明子所含的有效成分具有調(diào)節(jié)免疫、抑菌、抗癌、降血壓、調(diào)節(jié)血脂及明目通便等作用[5]。為了驗(yàn)證芷歸片是否具有通便功能,本研究以小鼠為試驗(yàn)對(duì)象,通過(guò)建立復(fù)方地芬諾酯(DC)便秘模型,觀察芷歸片對(duì)小鼠排便功能的影響。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 藥物與試劑

        芷歸片(批號(hào):20017),由四川省中醫(yī)藥研究院提供。麻仁丸膠囊(批號(hào):31105),湖北諾得勝制藥有限公司。復(fù)方地芬諾酯片(批號(hào):20130912),常州康普藥業(yè)有限公司。墨汁的制備:阿拉伯樹膠100 g,加水800 ml,煮沸至溶液透明,加入活性碳50 g煮沸三次,待溶液涼后加水定容至1000 ml,4℃保存,用前搖勻使用[6]。

        1.1.2 動(dòng)物

        昆明種小鼠120只,體重18-22 g,雌雄各半。由成都達(dá)碩人類疾病模型動(dòng)物輸送中心提供,動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(川)2013-24。

        1.2 方法

        1.2.1 動(dòng)物分組及給藥

        將60只昆明種小鼠按體重隨機(jī)分成6組,分別為陰性對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照麻仁丸組、芷歸片低、中、高劑量組(1.8、3.6、7.2 g·kg-1),相當(dāng)于生藥量13.392、26.784、53.568 g·kg-1,每組10只,雌雄各半,給藥量為人體臨床用量對(duì)于小鼠等效劑量的5、10、20倍。陰性對(duì)照組給予10 mg·kg-1淀粉,陽(yáng)性對(duì)照麻仁丸組給予6 g·kg-1麻仁丸。連續(xù)給藥7 d,期間自由飲食。

        1.2.2 復(fù)方地芬諾酯(DC)便秘模型的建立[7]

        末次給藥結(jié)束,各實(shí)驗(yàn)組小鼠禁食不禁水16 h,陰性對(duì)照組給予蒸餾水和淀粉的混懸液10 mg·kg-1,其余每組給予復(fù)方地芬諾酯片10 mg·kg-1灌胃。30 min后造成便秘模型。

        1.2.3 芷歸片對(duì)便秘小鼠排便的影響

        造模30 min后,各實(shí)驗(yàn)組給予含相應(yīng)受試物的墨汁灌胃,模型組和陰性對(duì)照組給予相應(yīng)體積的墨汁灌胃,灌胃體積為0.2 ml·10g-1體重。給藥后立即將小鼠單獨(dú)放入干凈的鼠籠內(nèi),并正常提供飼料和飲水,同時(shí)開始準(zhǔn)確計(jì)時(shí)。觀察記錄每只小鼠首次排出黑便的時(shí)間,并連續(xù)觀察6 h,記錄6 h內(nèi)小鼠排黑便粒數(shù)、干重及性狀。

        1.2.4 芷歸片對(duì)便秘小鼠腸蠕動(dòng)的影響

        另取60只昆明種小鼠,按照1.2.1方法進(jìn)行分組。末次給藥后,各實(shí)驗(yàn)組小鼠禁食不禁水16 h,除陰性對(duì)照組給予10 mg·kg-1淀粉外,其余各實(shí)驗(yàn)組給予復(fù)方地芬諾酯片10 mg·kg-1。造模30 min后,各給藥組給予含相應(yīng)受試物的墨汁,模型組和陰性對(duì)照組給予相應(yīng)體積墨汁,灌胃體積為0.2 ml·10g-1體重。給予墨汁25 min后,脫頸處死小鼠,打開腹腔分離腸系膜,立刻剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管,平鋪于玻璃板上,輕輕將小腸拉成直線進(jìn)行測(cè)量。腸管長(zhǎng)度為“小腸總長(zhǎng)度”,從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度”。墨汁推進(jìn)率=[墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度(cm)/小腸總長(zhǎng)度(cm)]×100%。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

        2 結(jié)果

        2.1 芷歸片對(duì)便秘小鼠排便的影響

        結(jié)果顯示與模型組比較,芷歸片中劑量和高劑量組的首次排黑便時(shí)間均有所增加,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),且高劑量組6 h內(nèi)排黑便數(shù)也有所增加(P<0.05)。提示芷歸片具有促進(jìn)排便的作用。見表1。

        表1 芷歸片對(duì)小鼠排便的影響

        注:與陰性對(duì)照組比較,△P<0.01; 與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。

        2.2 芷歸復(fù)合物對(duì)便秘小鼠腸蠕動(dòng)的影響

        模型組與陰性對(duì)照組比較,腸推進(jìn)率具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),說(shuō)明便秘模型建模成功。與模型組比較,陽(yáng)性對(duì)照組的腸推進(jìn)率增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)組中、高劑量組小鼠的腸推進(jìn)率較于模型組,均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05和P<0.01),且隨著芷歸片劑量的增加,小鼠腸推進(jìn)率逐漸提高。高劑量組腸推進(jìn)率與麻仁丸對(duì)照組比較,兩者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),見表2。

        表2 芷歸片對(duì)便秘小鼠腸蠕動(dòng)的影響±SD,n=10)

        注:與陰性對(duì)照組比較,△P<0.05;與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。

        3 討論

        便秘從病因上可分為器質(zhì)性和功能性兩類。器質(zhì)性便秘主要是有腸管器質(zhì)性病變,直腸、肛門病變等引起的,功能性便秘就目前而言發(fā)病原因仍不清晰,可能與濫用藥物、精神因素以及生活方式有關(guān)。目前臨床上通常將慢性便秘分為4型:慢傳輸型便秘、排便障礙型便秘、混合型便秘和正常傳輸型便秘[8]。而目前對(duì)于慢性便秘的治療主要是容積性、潤(rùn)滑性、滲透性以及刺激性瀉劑[9]。容積性和刺激性瀉劑有時(shí)會(huì)導(dǎo)致胃腸功能紊亂、胃動(dòng)力不足。此外,瀉劑的長(zhǎng)期使用會(huì)破壞腸道內(nèi)的生態(tài)環(huán)境,使腸道內(nèi)水分大量丟失,還會(huì)導(dǎo)致腸道分泌功能不足,加重便秘。緩瀉藥雖然是良好的通便藥,但是如果長(zhǎng)期服用,會(huì)影響脂溶性維生素以及鈣、磷的吸收,或降低神經(jīng)的敏感性。目前市場(chǎng)上使用的通便藥物大部分都含有瀉藥類的成分,使用不慎就有可能會(huì)對(duì)患者造成二次傷害。芷歸片3味藥材中白芷和決明子均屬于國(guó)家公布的藥食同源(既是食品又是藥品的物品名單),當(dāng)歸屬于國(guó)家公布的可用于保健食品的中藥材,價(jià)格低廉、毒副作用低,安全性好。且三者的合理配伍,不但能夠有效降低藥材使用量,而且能夠使每味藥材相互協(xié)同發(fā)揮作用。

        在本次實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)觀察芷歸片對(duì)DC模型小鼠在首次排黑便時(shí)間、6 h內(nèi)排黑便數(shù)以及腸內(nèi)容物推進(jìn)率的影響,來(lái)判斷其是否對(duì)通便存在促進(jìn)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該芷歸片能顯著縮短首次排黑便時(shí)間、增加6 h內(nèi)排黑便數(shù),促進(jìn)腸內(nèi)容物推進(jìn)。在改善胃腸功能方面起著明顯的潤(rùn)腸通便作用,在防治便秘方面有著良好的應(yīng)用前景。

        1 陶伊莉,周黎.老年患者便秘護(hù)理[J]. 內(nèi)蒙古中醫(yī)藥, 2013, 32(33):135-136.

        2 吳光杰,田穎剛,謝明勇,等. 車前子多糖對(duì)便秘模型小鼠通便作用的研究[J]. 食品科學(xué), 2007, 28(10):514-516.

        3 張渙,王一濤.當(dāng)歸與川芎藥理作用研究進(jìn)展與比較[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2008, 19(2):293-295.

        4 王夢(mèng)月,賈敏如,馬逾英,等. 白芷總香豆素的藥理作用研究[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2005, 16(10):954-956.

        5 張加雄,萬(wàn)麗,胡軼娟,等. 決明子提取物瀉下作用研究[J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2005, 16(6):467-468.

        6 吳光杰,田穎剛,謝明勇,等. 車前子多糖對(duì)便秘模型小鼠通便作用的研究[J]. 2007, 28(10):514-516.

        7 李業(yè)鵬,崔生輝,江濤,等. 小鼠便秘模型的建立[J]. 中國(guó)食品衛(wèi)生雜志, 2000, 12(1):1-4.

        8 宋建亭,孔利霞,趙士鵬. 慢傳輸型便秘的病因及病理生理研究進(jìn)展[J]. 疑難癥雜志, 2013, 12(10):812-815.

        9 柏愚,鄒多武. 瀉藥在慢性便秘治療中的應(yīng)用[J]. 臨床消化病雜志, 2007, 19(3):142-143.

        Effects of zhigui tablet on mice constipation induced by compound diphenoxylate

        Zhu Fei-Mei1, Li Jun-Long1, Ni Xiao-Qing1, Zhan Yan2, Ruan Jia2, Xu Chao-Qun2, Liu Xiao-Kang1△

        (1.Department of Pharmacology, West China School of Preclinical and Forensic Medicine, Sichuan University,Sichuan Chengdu 610041; 2.Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences, Sichuan Chengdu 610041)

        Objective:To study the treatment effect of zhigui tablet on constipation in compound diphenoxylate induced mice. Methods: Kunming mice with half males and half females were randomly be divided into negative control group, model group and positive control group which accepted 6 g·kg-1maren pills, and the low-dose, middle-dose, high-dose of zhigui tablet groups (1.8, 3.6, 7.2 g·kg-1) which equals to 13.392, 26.784, 53.568 g·kg-1crude drugs respectively. We observed that the time of first black stool discharge as well as the dark stool points in 6h and the pushing rate of intestine. Results: Compared with the control group, high dose of Zhigui tablet significantly decreased the time of first black stool discharge, but on the contrary, increased the intestine pushing rate(P<0.05), meanwhile increased the black stool points in 6 h(P<0.05) in the constipation model mice which induced by compound diphenoxylate. Conclusions: Zhigui tablet could offer beneficical effects to constipation and improve the life quality.

        Zhigui tablet; Compound diphenoxylate tablets; Time of first black stool discharge; Black stool points; Intestine pushing rate

        祝飛美,女,碩士研究生,主要從事藥理學(xué)研究,Email:250123999@qq.com。

        △通訊作者:劉小康,男,副教授,主要從事藥理學(xué)研究,Email:liuxiaokang6@163.com。

        2014-12-30)

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