佘有彬

(南京市六合區(qū)疾病預(yù)防控制中心，江蘇 南京211500)

南京市六合區(qū)位于長(zhǎng)江下游北岸，地型自南向北漸升高，南部多河網(wǎng)，是江灘型的血吸蟲病流行區(qū)。經(jīng)過(guò)50多年的積極防治，全區(qū)于2009年達(dá)到了血吸蟲病傳播控制標(biāo)準(zhǔn)[1，2]。為掌握達(dá)標(biāo)后血吸蟲病疫情變化，在該區(qū)東溝鎮(zhèn)大河口村設(shè)一個(gè)血吸蟲病防治監(jiān)測(cè)點(diǎn)，在2012年的病情監(jiān)測(cè)中，我們采用免疫學(xué)檢測(cè)(ELISA、DDIA)和病原學(xué)檢測(cè)(Kato-Katz法糞檢、糞便集卵孵化)4種診斷方法[3]，對(duì)583例受檢對(duì)象的血液和糞便樣本進(jìn)行對(duì)比檢測(cè)觀察，就4種診斷方法的敏感性、特異度及其相互間的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行了分析，結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 人群的選擇 2012年10-11月，選擇六合區(qū)東溝鎮(zhèn)大河口村6周歲以上(含6周歲)常住居民共583人為檢測(cè)對(duì)象。

1.2 儀器設(shè)備 檢測(cè)使用的設(shè)備有：Wellsccan MK3型自動(dòng)酶標(biāo)儀、Wellsccan MK3型自動(dòng)洗板機(jī) 、電熱恒溫培養(yǎng)箱(HH、BII、420)、光照培養(yǎng)箱(LRH-250-G)、 可調(diào)移液器 (0~200μl)、 三角燒瓶、Kato-Katz定量板、Olympus顯微鏡等

1.3 檢測(cè)方法 采用ELISA和DDIA法檢測(cè)待測(cè)血清中抗體，ELISA法是一種特殊的試劑分析方法,在免疫酶技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù)[4]，使用上海市寄生蟲病防治研究所生產(chǎn)的試劑盒，DDIA法采用無(wú)錫賽德科技開發(fā)有限公司生產(chǎn)的試劑盒。

采用尼龍絹集卵孵化法(3送3檢)和改良加藤法(kato-katz法，1送3檢)檢測(cè)毛蚴和蟲卵。

免疫學(xué)檢測(cè)和病原學(xué)檢測(cè)的操作要求參見(jiàn) 《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 血吸蟲病診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS261-2006)，附錄 B 和附錄 C》。

2 結(jié)果

2.1 血清學(xué)與病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果 對(duì)583例受檢對(duì)象的血液和糞便檢測(cè)結(jié)果為，ELISA法、DDIA法、集卵孵化法、Kato-Katz陽(yáng)性率分別為3.26%(19/583)，3.43%(20/583)，0.34%(2/583)和 0.34%(2/583)，由此可見(jiàn)血清學(xué)檢測(cè)方法的陽(yáng)性率與當(dāng)?shù)鼐用窨贵w水平有關(guān)。

2.2 集卵孵化法與Kato-Katz法的比較 結(jié)果見(jiàn)表1，一致性檢驗(yàn)顯示集卵孵化法與改良加藤法的檢測(cè)方法敏感度完全一致(Kappa=1.0)。

表1 集卵孵化法與改良加藤法的檢測(cè)結(jié)果

2.3 ELISA法與DDIA法的比較 結(jié)果見(jiàn)表2，一致性檢驗(yàn)顯示ELISA法與DDIA法的檢測(cè)方法敏感性一致程度相當(dāng)滿意(Kappa=1.0)。

表2 ELISA法與DDIA法的檢測(cè)結(jié)果

3 討論

在大規(guī)模血吸蟲病防治中連續(xù)多年的擴(kuò)大化療和預(yù)防服藥必然使血吸蟲的排卵及卵的孵化收到抑制[5]，導(dǎo)致病原學(xué)檢測(cè)的檢出率低。本文結(jié)果顯示：集卵孵化法與Kato-Katz法兩者一致性檢驗(yàn)?zāi)苡邢喈?dāng)滿意的一致程度，但孵化法在現(xiàn)場(chǎng)大規(guī)模使用很困難、成本高、需花費(fèi)大量的人力、物力，而Kato-Katz法操作比較簡(jiǎn)單、省工省力等，現(xiàn)場(chǎng)大規(guī)模病原學(xué)查病中，Kato-Katz法的適用性優(yōu)于孵化法。

ELISA與DDIA都有較高的檢出率，一致性檢驗(yàn)?zāi)苡邢喈?dāng)滿意的一致程度，ELISA法在檢測(cè)過(guò)程中費(fèi)時(shí)、需要專用儀器設(shè)備、操作煩瑣，而DDIA法省時(shí)、不需儀器設(shè)備、操作簡(jiǎn)單、判斷直觀[6]。所以在現(xiàn)場(chǎng)免疫學(xué)查病方法DDIA法優(yōu)于ELISA法。按全國(guó)血吸蟲病綜合治理重點(diǎn)項(xiàng)目查病化療技術(shù)方案開展現(xiàn)場(chǎng)工作時(shí)，免疫學(xué)檢測(cè)的特異性都不夠理想，且抗體檢測(cè)難以區(qū)分過(guò)去感染(包括經(jīng)化療治愈者)與現(xiàn)癥感染，檢測(cè)陽(yáng)性不一定是反映出現(xiàn)癥病人，其診斷價(jià)值有限。所以本文認(rèn)為在現(xiàn)場(chǎng)查病時(shí)，用免疫學(xué)檢測(cè)方法過(guò)篩后，陽(yáng)性者再用病原學(xué)檢測(cè)方法確定體內(nèi)有無(wú)活蟲存在，效果會(huì)更好。

[1]雷正龍,鄭浩,張利娟,等.2010年全國(guó)血吸蟲病疫情通報(bào)[J].中國(guó)血吸蟲病雜志,2011,2(6):599-604.

[2]梁幼生,黃軼昕,洪清標(biāo),等.江蘇省實(shí)現(xiàn)血吸蟲病傳播控制的新策略與新技術(shù)[J].中國(guó)血吸蟲病防治雜志,2012,24(2):119-122.

[3]中國(guó)人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS261-2006.血吸蟲病診斷標(biāo)準(zhǔn)[S],2006:附錄 B,附錄 C.

[4]譚立明.ELISA法檢測(cè)的影響因素及其對(duì)策[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(4):300-305.

[5]祝紅慶,曹淳力,王強(qiáng),等.山丘型流行區(qū)血吸蟲感染者人數(shù)低估原因探討[J].中國(guó)血吸蟲病雜志,2006,18(3):214-216.

[6]孫樂(lè)平,黃軼昕,洪清標(biāo),等.膠體染料試紙條試驗(yàn)在血吸蟲病大規(guī)模現(xiàn)場(chǎng)查病中應(yīng)用價(jià)值的評(píng)價(jià) [J].中國(guó)血吸蟲病防治雜志,2004,16(6):426-431.