薛白,李靖,王奔放
(江蘇護理職業(yè)學院檢驗藥學系,江蘇 淮安223300)
血尿是泌尿系統(tǒng)疾病最常見的臨床表現(xiàn)之一。血尿來源的確定對于疾病的臨床治療有著較為重要的意義。鑒別血尿來源的方法有很多,國內(nèi)相繼使用相差顯微鏡[1]、掃描電鏡、血細胞分析儀、全自動尿沉渣分析儀、普通光鏡(染色或不染色)[2]等。這些方法通過對尿紅細胞形態(tài)的檢查,幫助我們鑒別血尿的來源,主要包括腎小球源性血尿和非腎小球源性血尿。
目前應用相差顯微鏡或聯(lián)合全自動尿沉渣分析儀觀察血尿中紅細胞形態(tài)來鑒別血尿來源己有較多研究[3],而普通光學顯微鏡由于其使用方便、成本低等特點也逐漸受到各醫(yī)院,特別是基層醫(yī)院的青睞。但就使用普通光學顯微鏡來檢查尿紅細胞形態(tài),進而對血尿的定位診斷價值仍存有爭議。本實驗室通過在普通光學顯微鏡下確定血尿診斷的敏感性和特異性,從而對普通光鏡檢測血尿來源的可行性提供參考。
1.1 一般資料 收集2014年3-7月筆者所在醫(yī)院門診及病房泌尿科患者183例新鮮中段尿液樣本,其中男98例,女85例,年齡6~75歲。102例經(jīng)臨床病史、實驗室檢查、B超、靜脈腎盂造影、膀胱鏡、CT、和(或)腎活檢等,證實為腎小球病變.其中急慢性腎小球腎炎87例、狼瘡性腎炎5例、腎囊腫3例、腎病綜合征7例;另81例行泌尿系造影或膀胱鏡或B超檢查等,確診為非腎小球病變,其中腎結(jié)石42例、輸尿管結(jié)石14例、膀胱癌9例、尿路感染16例。
1.2 方法
1.2.1 設備儀器選用 Olympus顯微鏡、改良牛鮑計數(shù)板、刻度離心管、離心機等。
1.2.2 操作方法 取患者清晨新鮮中段尿液20 ml,注入一次性刻度離心管中立即送檢,1500 r/min離心5 min,棄去上清液,留0.2 ml尿沉渣,輕輕混勻后取1滴充入牛鮑計數(shù)板中,用普通光學顯微鏡觀察尿中紅細胞形態(tài),記錄尿紅細胞數(shù)、畸形紅細胞數(shù)及紅細胞畸形率。
1.3 尿紅細胞形態(tài)判斷標準
1.3.1正常尿紅細胞形態(tài) 紅細胞形態(tài)較為完整,膜光滑,血紅蛋白充盈好,胞體大小基本正常。常見的形態(tài)有:(1)正常紅細胞大小形態(tài)與外周血正常紅細胞相似,呈雙面凹圓盤狀;(2)球形紅細胞胞體正?;蚱?,表面光滑呈球形;(3)淡影樣紅細胞扁平腫脹,直徑較大,表面光滑,血紅蛋白含量減少或消失;(4)桑葚形紅細胞呈皺縮球形[4]。
1.3.2 畸形尿紅細胞形態(tài) 紅細胞膜有缺損,血紅蛋白多逸出,細胞形態(tài)大小差異明顯。常見的形態(tài)有:(1)芽孢狀,細胞質(zhì)外伸,細胞膜外凸,帶有1個或多個芽孢;(2)線狀,紅細胞呈線形甚至扭曲折疊;(3)炸面包卷樣,紅細胞膜呈明顯的內(nèi)外兩圈、四周肥厚、形似炸面包卷;(4)串珠樣,紅細胞膜下致密顆粒狀沉淀;(5)酵母樣:紅細胞固縮呈酵母菌樣;(6)戒形、靶形紅細胞;(7)膜缺損紅細胞:紅細胞膜不完整,部分血紅蛋白丟失;(8)膜穿孔樣紅細胞:細胞質(zhì)有空白亮點;(9)碎片狀,紅細胞碎裂成片狀或碎屑。以上參照黃鋒先等[5],李雪峰和王厚照[6]尿紅細胞形態(tài)分類方法。
1.4 血尿判斷標準 尿中紅細胞>8000個/ml。腎小球性血尿:尿畸形紅細胞類型在2種以上(非均一性血尿),且占紅細胞總數(shù)>70%[7];非腎小球性血尿:尿中大部分為正常紅細胞或異常細胞種類不超過2種(均一性血尿),畸形細胞<30%;混合型血尿:為上述兩種血尿的混合,尿中畸形紅細胞數(shù)>30%,但<70%,胞體大小差異明顯,且有血紅蛋白逸出。
1.5 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 13.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計,計數(shù)資料采用卡方檢驗,P<0.05具有統(tǒng)計學意義。
腎小球性血尿與非腎小球性血尿中畸形紅細胞含量見表1,以出現(xiàn)非均一性形態(tài)計算紅細胞畸形率;從中得出,光鏡下尿畸形紅細胞對診斷腎小球性血尿敏感性為87.3%,特異性為82.7%;兩組尿畸形紅細胞含量(%)組間比較P=0.00<0.05,結(jié)果差別有統(tǒng)計學意義。
表1 183例腎性和非腎性血尿患者普通光鏡觀察紅細胞形態(tài)統(tǒng)計(n)
尿液中紅細胞數(shù)量增多,超過8000個/ml一般提示泌尿系統(tǒng)疾病,并且常伴隨著紅細胞形態(tài)異常,其形成原因有很多。尿液主要由血液經(jīng)過腎臟時,經(jīng)腎小球濾過膜濾過,大部分水和一些小分子物質(zhì)進入腎臟而形成。當腎小球濾過膜發(fā)生病變,孔徑變大時,血液中的紅細胞也進入腎臟,同時又受到腎小球濾過膜的擠壓變形,從而表現(xiàn)出多種畸形狀紅細胞,呈現(xiàn)形態(tài)的不均一性。除此以外,紅細胞形態(tài)也會受尿液中酸堿度和滲透壓值的影響。在堿性、高滲尿中紅細胞皺縮變形;在酸性、低滲尿中紅細胞脹大甚至破裂成影紅細胞或面包圈樣[8]。在非腎小球性血尿中,由于不存在腎小球濾過膜病變的前提,紅細胞形態(tài)一般不發(fā)生改變,即使有尿pH和滲透濃度的影響,也是呈現(xiàn)均一性的形態(tài)改變。
在本文一共183例標本中,利用普通光學顯微鏡診斷腎小球源性血尿的敏感性是87.3%,與國內(nèi)用相差顯微鏡診斷腎源性血尿的臨床數(shù)據(jù)敏感性[3]相近;而特異性是82.7%,與相關(guān)文獻報道有些差異[9],可能原因是標本收集后放置時間過久或離心時間過長等,從而出現(xiàn)皺縮或脹大的同時伴隨著裂片紅等形態(tài);也有可能是科室工作人員在細胞形態(tài)觀察上相對經(jīng)驗缺乏等。本文中腎性和非腎性紅細胞形態(tài)畸形率P<0.05,提示在腎源性血尿診斷上,腎小球源性紅細胞畸形率明顯高于非腎小球源性,與相關(guān)文獻報道基本一致[10]。說明將普通光學顯微鏡應用在尿紅細胞形態(tài)鑒別上,從而幫助臨床進行血尿的腎源性鑒別是可行的,并有較大的臨床應用價值。同時普通光鏡相比相差顯微鏡等儀器,成本較低,更易于在基層醫(yī)院檢驗科普及使用。但由于普通光學顯微鏡在細胞形態(tài)表現(xiàn)的清晰度上確是沒有相差顯微鏡高,這也要求檢測者具有較強的細胞形態(tài)辨認能力。同時,為提高結(jié)果準確性,也可以聯(lián)合尿化學檢測結(jié)果或病人臨床資料,從而做出更為正確的診斷。
[1]李樹平,劉文東.相差顯微鏡檢查腎小球性血尿的診斷標準評價[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2010,28(3):301-302.
[2]王平平,馬文.普通光鏡檢查尿紅細胞形態(tài)在血尿來源診斷中的價值[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2012,33(23):20-21.
[3]肖笑,葉任高,蔣文功.尿紅細胞位相顯微鏡檢查診斷腎小球性血尿的臨床評估[J].中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志,2004,5(3):32.
[4]范金斌.血尿紅細胞形態(tài)及其分類在臨床應用中的價值[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2011,29(6):645-646.
[5]黃鋒先,董秀清,葉任高,等.普通光鏡對血尿定位診斷的評價[J].中華腎臟病雜志,1996,12(2):104-105.
[6]李雪峰,王厚照.尿紅細胞形態(tài)鑒別血尿來源的應用價值探討[J].醫(yī)學論壇雜志,2010,31(14):35-36.
[7]劉成玉,羅春麗.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:170.
[8]從玉隆,馬駿龍.幾種檢側(cè)尿紅細胞方法的價值與互補關(guān)系[J].中華檢驗醫(yī)學雜志2002,25(5):263-264.
[9]許艷茹.光鏡下尿紅細胞形態(tài)檢查在血尿診斷中的應用價值[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2012,33(10):21-22.
[10]盧新兆,黃曉華.尿中紅細胞形態(tài)在腎小球腎炎診斷中的應用價值[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2011,8(16):27.