陳波，王小明，廖潔

(萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 萍鄉(xiāng)337055)

梅毒螺旋體(Treponema pallidum，TP)是嚴(yán)重危害人類健康的性傳播疾病-梅毒(syphilis)的病原體[1]。TP感染人體后病程漫長(zhǎng)，早期侵犯生殖器官和皮膚，晚期幾乎累及全身所有臟器并產(chǎn)生多種多樣的癥狀，給機(jī)體造成嚴(yán)重危害。TP的早期診斷對(duì)于梅毒的預(yù)防和控制具有重要的意義。

現(xiàn)階段，國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室常用的梅毒螺旋體確證試驗(yàn)方法為TPPA(Treponema pallidum particle agglutination test)。雖然TPPA具有較高的特異性及敏感性，但是實(shí)際工作中仍然會(huì)出現(xiàn)一些“可疑”反應(yīng)(注：參照賽樂(lè)迪亞TPPA說(shuō)明書(shū)，粒子形成小環(huán)狀，呈現(xiàn)出外周邊緣均勻且平滑的圓形，判定為“可疑”)，從而對(duì)臨床診斷造成一定的困擾。所以，本文將對(duì)造成TPPA結(jié)果呈“可疑”的相關(guān)因素進(jìn)行一個(gè)初步的探討。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 收集2011年1月1日至2013年8月30日我院門、急診和住院臨床可疑梅毒患者血清樣本3403份。臨床可疑梅毒患者包括有梅毒可疑臨床表現(xiàn)、或有高危行為、或母親患有梅毒的嬰幼兒、或既往有梅毒病史、梅毒暴露史等。

1.2 儀器與試劑 TPPA法試劑由日本富士瑞必歐株式會(huì)社提供，均在有效期內(nèi)使用。

1.3 方法 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。室溫條件下在U型板上用稀釋液將血清依次稀釋，然后分別加入未致敏和致敏粒子，震蕩數(shù)秒，靜置2h后觀察結(jié)果(以1:80稀釋倍數(shù)為準(zhǔn))。為減少實(shí)驗(yàn)操作的偶然誤差，所有結(jié)果均由兩位檢驗(yàn)人員共同判讀；所有“可疑”結(jié)果均用不同批次試劑重復(fù)2遍實(shí)驗(yàn)，由兩位檢驗(yàn)人員最終判讀。判讀標(biāo)準(zhǔn)：粒子形成小環(huán)狀，呈現(xiàn)出外周邊緣均勻且平滑的圓形，判定為“可疑”。陰性及陽(yáng)性判讀嚴(yán)格按操作說(shuō)明書(shū)判讀。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 19.0軟件處理，采用χ2檢驗(yàn)分析結(jié)果,以P<0.05為差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

通過(guò)對(duì)2011年1月1日至2013年8月30日我院門、急診和住院臨床可疑梅毒患者樣本3403份進(jìn)行TPPA檢測(cè)，其中結(jié)果判讀為“陽(yáng)性”或“陰性”標(biāo)本為3363例，判讀為“可疑”標(biāo)本為40例。具體統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表1~表3。分析，χ2=21.257，ν=2，P<0.05(雙側(cè))，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。年齡≤1歲及≥60歲的患者血清TPPA檢測(cè)更易出現(xiàn)可疑結(jié)果。

表1 不同年齡組的TPPA檢測(cè)結(jié)果

表2 HSV、TPPA聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果

表2的結(jié)果經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，結(jié)果顯示HSV陽(yáng)性與TPPA結(jié)果呈“可疑”的發(fā)生存在顯著相關(guān) (P<0.05)；并且風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估顯示，“可疑”的OR值為13.234，OR值的95%可信區(qū)間為4.414~39.675，不包含1，提示HSV可能是導(dǎo)致TPPA結(jié)果呈“可疑”的影響因素。

表3 HIV、TPPA聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果

表3的結(jié)果經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，結(jié)果顯示HIV陽(yáng)性與TPPA結(jié)果呈“可疑”的發(fā)生存在顯著相關(guān) (P<0.05)；并且風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估顯示，“可疑”的OR值為5.266，OR值的95%可信區(qū)間為 1.572~17.634，不包含1，提示HIV可能是導(dǎo)致TPPA結(jié)果呈“可疑”的影響因素。

3 討論

梅毒的血清學(xué)檢測(cè)一直是梅毒診斷的主要方法，目前常用的主要為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、TPPA及TRUST等等[2]。由于TPPA具有相對(duì)較高的敏感性(85%~100%)及特異性(98%~100%)[3]，通常被視為梅毒的確證實(shí)驗(yàn)[4]。但是在臨床工作中，還是會(huì)遇見(jiàn)TPPA結(jié)果不易判讀，即呈“可疑”的情況。

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析，年齡≤1歲及≥60歲的患者血清TPPA檢測(cè)更易出現(xiàn)“可疑”結(jié)果。這可能是與這部分人的自身免疫環(huán)境的改變有關(guān)。有報(bào)道稱，老年人常伴有心腦血管疾病、糖尿病、腫瘤及白血病等慢性疾病，產(chǎn)生交叉性梅毒抗體成分而發(fā)生交叉反應(yīng)以及其他原因?qū)е耇PPA血清學(xué)結(jié)果不易判讀[5]。TPPA主要是檢測(cè)血清中TP-IgG，通常新生兒感染TP后需要4~12周甚至更久才能明確檢出[6]，而梅毒孕婦體內(nèi)的TP-IgG可穿透胎盤滋養(yǎng)層進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，在15%未感染的嬰兒體內(nèi)存留12~15個(gè)月[7]，這可能是導(dǎo)致嬰幼兒血清TPPA檢測(cè)易出現(xiàn)“可疑”結(jié)果的原因。

另外本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，有HSV或HIV感染的患者的TPPA結(jié)果也較容易出現(xiàn)“可疑”結(jié)果。這可能是HSV的抗體與TP抗體有交叉的緣故，不過(guò)有待進(jìn)一步證實(shí)。當(dāng)然，有報(bào)道稱，有些合并感染HSV的梅毒患者，梅毒的Real-time PCR結(jié)果反而會(huì)呈現(xiàn)陰性[8]。同時(shí)，也有一些HIV感染影響梅毒檢測(cè)結(jié)果的報(bào)道，如Turbadkar D等[9]研究發(fā)現(xiàn)HIV感染可使患者血清中產(chǎn)生抗心磷脂抗體和抗卵磷脂抗體，從而影響梅毒初篩實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，導(dǎo)致HIV感染患者性病研究實(shí)驗(yàn)室玻片試驗(yàn)或RPR假陽(yáng)性率高于非HIV感染者?？桌椎萚10]報(bào)道，合并HIV感染的梅毒患者血清學(xué)檢查可呈假陰性或陽(yáng)性結(jié)果的延遲出現(xiàn)。Maple PA等[11]報(bào)道了26例TPPA呈假陰性的梅毒患者，其中有14例合并有HIV感染，其分析可能因?yàn)镠IV陽(yáng)性患者體內(nèi)免疫功能受損，梅毒抗體滴度過(guò)低所致。

總之，TPPA檢測(cè)結(jié)果可作為樣本中是否含有TP抗體的判斷依據(jù)，但由于各種干擾因素的影響，實(shí)際工作中仍然存在“可疑”結(jié)果，還需要結(jié)合其他檢測(cè)結(jié)果和臨床癥狀進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。

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