曾朱君，任燕歌，戴小波

(1、廣東省中醫(yī)院珠海醫(yī)院檢驗科；2、珠海高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，廣東 珠海519015)

《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》[1]和《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力的專用要求》[2]要求申請認(rèn)可的實驗室應(yīng)對設(shè)備、檢測系統(tǒng)或方法的主要分析性能進(jìn)行驗證，證實其能夠達(dá)到臨床檢測所要求的標(biāo)準(zhǔn)[3]。新的儀器在安裝后或經(jīng)大型維修、更換主要部件后，必須對儀器的主要性能進(jìn)行驗證，對廠商提供的評價資料中的主要參數(shù)予以確認(rèn)，這對保證檢驗質(zhì)量起著重要作用[4,5]。Sysmex XE-2100全自動血液分析儀(以下簡稱“XE-2100”)是新一代的全血細(xì)胞分析儀器。該儀器采用流式細(xì)胞術(shù)、熒光技術(shù)及特殊化學(xué)試劑對血細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)與分類。為了了解本科室XE-2100的主要性能，本研究根據(jù)WS/T406-2012《臨床血液學(xué)檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量要求》及其他相關(guān)文獻(xiàn)資料要求對本實驗室XE-2100的主要性能進(jìn)行驗證，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 樣本來源 隨機選擇試驗當(dāng)日本院門診體檢正常人群及部分住院患者血常規(guī)檢測樣本共20例，采用EDTA-K2抗凝。另選2014年衛(wèi)生部臨床檢驗中心室提供的低、中、高3個水平的5份質(zhì)控品，批號分別為201411，201412，201413，201414，201415。所有樣品無溶血、黃疸及脂血。

1.2 儀器與試劑 Sysmex XE-2100全自動血液分析儀為日本SYSMEX公司生產(chǎn)的。所需的染液、稀釋液、溶血素均為SYSMEX公司提供的配套產(chǎn)品。顯微鏡為奧林巴斯CX31，由奧林巴斯廠家提供。

1.3 檢測方法[6]按照WS/T406-2012《臨床血液學(xué)檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量要求》及《CNAS-CL43醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床血液學(xué)檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用說明》以及全國臨床檢驗操作規(guī)程對XE-2100進(jìn)行準(zhǔn)確度、本底計數(shù)、攜帶污染率、精密度、線性、可比性等方面性能驗證。

1.3.1 準(zhǔn)確度驗證 (1)血細(xì)胞計數(shù) 采用2014年衛(wèi)生部臨床檢驗中心室提供的3個水平的5個質(zhì)控品為驗證樣本，XE-2100檢測紅細(xì)胞計數(shù)(RBC)、血細(xì)胞比容 (HCT)、血紅蛋白 (Hb)、白細(xì)胞計數(shù)(WBC)、和血小板計數(shù)(PLT)等5項指標(biāo)，以反饋的質(zhì)評結(jié)果為靶值，計算實驗結(jié)果與相對應(yīng)的靶值相對偏倚，為該項目準(zhǔn)確度數(shù)據(jù)。(2)細(xì)胞分類取5份新鮮全血樣本，分析儀每份樣本測試2次，計算均數(shù)。參照白細(xì)胞分類計數(shù)參考方法[7]，每份樣本制作2張血片，由本科室有工作經(jīng)驗的2位主管檢驗技師進(jìn)行手工分類計數(shù)，分類計數(shù)200個白細(xì)胞，分別取其均值，要求每人之間的分類結(jié)果，必須在可接受的范圍；以手工方法為標(biāo)準(zhǔn)，計算標(biāo)準(zhǔn)誤，以95%為致信區(qū)間。

1.3.2本底計數(shù)驗證 取稀釋液為驗證樣本在XE-2100上連續(xù)檢測3次，取最高值作為檢測結(jié)果。

1.3.3 攜帶污染率驗證 取高濃度臨床血液樣本(WBC＞90×109/L,RBC＞6.2×1012/L,Hb＞220g/L,PLT＞900×109/L)，混合均勻后連續(xù)測定三次，測定值分別為 H1、H2、H3；再取低濃度臨床血液樣本(WBC＜3×109/L,RBC＜1.5×1012/L,Hb＜50g/L,PLT＜30×109/L)，混合均勻后連續(xù)測定3次，測定值分別為L1、L2、L3。計算攜帶污染率 CR，CR(%)=|L1-L3|/(H3-L3)×100%。

1.3.4 批內(nèi)不精密度驗證 取1例正常臨床樣本，其濃度要求如下，WBC(4～10)×109/L； RBC(3.5～5.5)×1012/L ；Hb(110～160)g/L；HCT(35～55)%；PLT(100～300)×109/L；MCV (80 ～100)fL；MCH (27~34)pg；MCHC：(320～360)g/L)。該臨床樣本隨機插入當(dāng)日樣本中重復(fù)檢測11次，計算后10次檢測結(jié)果的算術(shù)平均值()和標(biāo)準(zhǔn)差(s)，計算變異系數(shù)×100%。批內(nèi)不精密度可接受標(biāo)準(zhǔn)小于1/4衛(wèi)生部臨床檢驗中心質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)。

1.3.5 批間不精密度驗證 分別取正常和異常 (高值)質(zhì)控物在分析儀上每日檢測一次，連續(xù)檢測31天，剔除失控結(jié)果，計算在控結(jié)果的S、CV。批間不精密度可接受標(biāo)準(zhǔn)為小于1/3TEa。

1.3.6 線性范圍驗證 選取一份最接近廠家可報告范圍上限的高值臨床驗證樣本，分別按100%、50%、25%、12.5%、6.25%、3.125%、0%的比例進(jìn)行稀釋，每個稀釋度重復(fù)測定3次，計算均值，計算y=ax+b，驗證線性范圍。若a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975，則線性驗證合格。

1.3.7 可比性驗證 取20份臨床樣本(濃度要求見表9)，以XS-1000i分析儀為參考儀器，每份樣本分別使用XS-1000i分析儀和XE-2100進(jìn)行檢測，以XS-1000i分析儀測定結(jié)果為靶值，XE-2100測定結(jié)果為測定值，計算兩者相對偏倚，每個檢測項目的相對偏倚符合WS/T406-2012《臨床血液學(xué)檢驗常規(guī)項目分析質(zhì)量要求》中要求的比例應(yīng)≥80%。

2 結(jié)果

2.1 準(zhǔn)確度 (1)從衛(wèi)生部室間質(zhì)評結(jié)果回報看，血細(xì)胞計數(shù) 5個批號3個水平的質(zhì)控物WBC、RBC、Hb、PLT的偏倚值均小于5%，符合WS/T406-2012判斷標(biāo)準(zhǔn)，說明XE-2100對全血細(xì)胞計數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。(2)分類計數(shù) 與人工顯微鏡分類比較淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞分類相關(guān)性較好，標(biāo)準(zhǔn)誤達(dá)到95%的置信區(qū)間。

2.2 本底計算 分析儀測試WBC、RBC、Hb及PLT本底值均為“0”，符合WS/T406-2012判定標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 攜帶污染率 WBC、RBC、Hb及PLT的CR分別為0.09%、0.00%、0.00%、0.00%， 均小于 1%，符合WS/T406-2012判定標(biāo)準(zhǔn)。

2.4 批內(nèi)不精密度 正常濃度水平臨床樣本W(wǎng)BC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC 批 內(nèi) CV分 別 為 1.13% 、0.69% 、0.43% 、0.55% 、2.81% 、0.68%、0.45%、0.61%，均小于 WS/T406-2012判定標(biāo)準(zhǔn)(3.75%、1.50%、1%、1.5%、4%、1%、2%、2%)，批內(nèi)不精密度驗證結(jié)果在可接受范圍之內(nèi)。

2.5 批間不精密度 檢測兩個水平濃度質(zhì)控品，WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC 批間CV均小于WS/T406-2012判定標(biāo)準(zhǔn)。批間不精密度驗證結(jié)果在可接受范圍之內(nèi)。

2.6 線性范圍驗證 WBC、RBC、Hb及PLT的線性范圍驗證結(jié)果，見表 1：a(1±0.05)值及 r(≥0.975)均在WS/T406-2012判定標(biāo)準(zhǔn)要求范圍內(nèi)。

表1 XE-2100的線性范圍評價結(jié)果

2.7 可比性 Sysmex XE-2100分析儀與XS-1000i分析儀的可比性結(jié)果，20個樣本W(wǎng)BC、RBC、Hb、PLT、HCT、MCV及MCHC結(jié)果偏倚符合率分別為100%、90%、95%、100%、90%、90%及 85%，均大于80%，符合WS/T406-2012判定標(biāo)準(zhǔn)。

3 討論

血細(xì)胞分析儀是檢驗科最常用的分析儀器之一，其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響臨床醫(yī)生對疾病的診斷和治療[8]。EP15A美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)系列標(biāo)準(zhǔn)化文件之一，主要用于評價和驗證臨床實驗室定量分析的精密度和準(zhǔn)確度。本研究根據(jù)EP15A實驗方案，對XE-2100進(jìn)行性能驗證，精密度驗證結(jié)果顯示 RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC項目批內(nèi)、批間精密度與廠家提供的精密度參考數(shù)據(jù)基本一致(CV≤1.5%)。準(zhǔn)確度驗證結(jié)果顯示 WBC、RBC、Hb、PLT的偏倚值均小于5%，與人工顯微鏡分類計數(shù)比較相關(guān)性好，說明XE-2100i分析儀的準(zhǔn)確度、精密度均達(dá)到了實驗室的要求。這與杜肖彥[9]報道的結(jié)果相一致。

攜帶污染是指由于吸樣針沾染了上輪檢測的標(biāo)本或試劑對待檢標(biāo)本造成的污染。XE-2100可提供32個檢測參數(shù)，每小時檢測150份標(biāo)本。本研究結(jié)果顯示XE-2100攜帶污染率<0.1%，該儀器有極強的抗污染能力和自動清洗功能。本底計數(shù)結(jié)果均為 “0”， 在線性范圍內(nèi) WBC、RBC、Hb及PLT理論值與測定值相關(guān)系數(shù)r≥0.975，與XS-1000i分析儀比較，結(jié)果符合率均大于80%。這些性能驗證結(jié)果與冷平[10]對Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀的性能驗證結(jié)果相符合。

綜上所述，XE-2100的主要性能符合廠商的性能規(guī)格[11]，實驗結(jié)果具有可靠性，該檢測系統(tǒng)可以滿足醫(yī)院檢驗科分析臨床患者標(biāo)本的需要。

[1]CNAS-CL02.醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則[S].北京:中國合格評定國家認(rèn)可委員會,2008:1-36.

[2]GB/T22576-2008.醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力的專用要求[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2008:1-36.

[3]ISO15189.醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則[S].北京:中國合格評定國家認(rèn)可委員會,2008:1236．

[4]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京：東南大學(xué)出版社,2006:58-73.

[5]熊立凡,劉成玉.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].第4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:115-123.

[6]劉志昂,陸婷婷,蘇靖凱.BC-5380全自動血細(xì)胞分析儀的性能評價[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2013,31(4):407-408.

[7]朱新勤,韓秀華,曾素根,等.五分類血液分析儀白細(xì)胞分類參數(shù)的校準(zhǔn)及驗證[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2009，36(19):3725-3728.

[8]彭黎明,叢玉隆.我國血細(xì)胞自動分析中存在的問題及對策[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(9):885-887.

[9]杜肖彥,王永祥.SYSMX XE-2100全自動血液分析儀性能評估[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(10)：1249－1251．

[10]冷平,凌攀,姚安延.SYSMX XE-2100全自動血液分析儀的性能評價[J].四川省衛(wèi)生管理干部學(xué)院學(xué)報,2008,2(2):108-109.

[11]馮仁豐.臨床檢驗質(zhì)量管理技術(shù)基礎(chǔ)[M].第2版.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社,2007:37-39．