徐秀云，周根水，童小燕，劉昕

(江西省兒童醫(yī)院輸血科，江西 南昌 330006)

正確的ABO血型鑒定是保證嬰幼兒輸血安全的前提和保障，傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為嬰幼兒尚未產(chǎn)生IgM抗體，其ABO血型鑒定只需進(jìn)行正定型檢測。為了探索嬰幼兒ABO血型IgM抗體產(chǎn)生的趨勢及規(guī)律，筆者對本院2013年3月至2014年3月嬰幼兒血樣標(biāo)本1733例進(jìn)行ABO血型鹽水試管法正反定型檢測，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對象 收集2013年3月至2014年3月期間A、B、O三種血型住院嬰幼兒血樣標(biāo)本 (排除AB型患兒)，共計(jì)1733例，年齡為1天~1歲之間。其中男性927例，女性806例；A型630例，B型500例，O型603例。按年齡從小到大依次分為3個(gè)組：新生兒組(28天內(nèi))、嬰兒大于28天小于6個(gè)月組、嬰兒大于6個(gè)月小于12月。

1.2 試劑來源 單克隆抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清和4%標(biāo)準(zhǔn)A型、B型和O型紅細(xì)胞懸液，均由上海血液生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 ABO血型鑒定方法采用鹽水試管法，均按照《臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》和試劑盒說明書中的要求進(jìn)行操作[1]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)處理采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包，兩組間抗體檢出率的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01代表有顯著性差異。

2 結(jié)果

對1733例嬰幼兒ABO血型正反定型進(jìn)行檢測，將其分為3個(gè)年齡組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，分別統(tǒng)計(jì)每個(gè)年齡組各種血型(A、B、O)檢出IgM 抗體的頻率(即檢出抗體人數(shù)與檢測總?cè)藬?shù)之比)。同時(shí)進(jìn)行組別間的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，具體結(jié)果見表1。

3 討論

ABO血型系統(tǒng)的A、B抗原實(shí)際上是鑲嵌在紅細(xì)胞膜中蛋白質(zhì)上結(jié)合的突出于細(xì)胞膜外的高度分支的糖鏈結(jié)構(gòu)。A型特異性抗原即其糖類決定族是N-乙酰氨基半乳糖，B型特異性抗原的糖類決定族是D-半乳糖[2]。ABO血型抗體在未經(jīng)免疫刺激(輸血或妊娠)的健康人群體內(nèi)主要以IgM性質(zhì)為主，該類ABO抗體是人體天然免疫發(fā)揮效應(yīng)的產(chǎn)物。Springer GF[3-5]、Irei T[6]等研究者的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明ABO血型IgM抗體產(chǎn)生的原因與免疫機(jī)制在于環(huán)境中廣泛存在的多種微生物如不少細(xì)菌膜表面的糖類分子與人類ABO血型抗原存在相同或相似結(jié)構(gòu)，人體的部分天然免疫細(xì)胞通過“模式識別受體”識別微生物的這類糖類抗原，被并活化后產(chǎn)生了IgM類抗體，這些抗體可以與微生物的相應(yīng)糖類抗原反應(yīng)外，還可以凝集人類A、B抗原，并在實(shí)驗(yàn)室中被檢測到稱之為抗A、抗B抗體。舉例來說，大腸桿菌O86進(jìn)入A型人體內(nèi)，細(xì)菌被巨噬細(xì)胞吞噬，菌體O抗原即(細(xì)胞壁脂多糖)經(jīng)過加工處理，其中與自身紅細(xì)胞A抗原相同的N-乙酰氨基半乳糖被免疫忽視，“異己”的B物質(zhì)(D-半乳糖或類似物)被識別，并以“非T細(xì)胞依賴抗原”(T1-2)形式提呈給執(zhí)行固有免疫的B1細(xì)胞，B1細(xì)胞活化后在較短時(shí)間內(nèi)(48h)就產(chǎn)生了IgM抗B抗體。由于人體在自然環(huán)境中是持續(xù)暴露接觸各類細(xì)菌的，使得這種B1細(xì)胞持續(xù)產(chǎn)生IgM抗體，并使其濃度維持在一定水平。

表1 1733例嬰幼兒ABO血型血清抗體鹽水法檢測結(jié)果

傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為，嬰幼兒出生后因其ABO抗體產(chǎn)生不足或不產(chǎn)生，只需進(jìn)行ABO血型正定型檢測。但據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，嬰幼兒血清中ABO血型IgM抗體在出生時(shí)就開始合成、且隨著年齡增長其合成量也逐漸增多[7，8]。我們在實(shí)際工作中也發(fā)現(xiàn)有相當(dāng)多的一部分嬰幼兒血清中已經(jīng)產(chǎn)生了較強(qiáng)的IgM類抗A、抗B抗體，這對于我們正確鑒定嬰幼兒ABO血型以保障患兒輸血安全具有重要意義。為了探索嬰幼兒ABO血型IgM抗體產(chǎn)生趨勢及規(guī)律，筆者認(rèn)為對嬰幼兒血型鑒定回顧性分析是很有必要的。

從本次調(diào)查結(jié)果中可以發(fā)現(xiàn)：(1)1組 (新生兒組)與2組(6月內(nèi))產(chǎn)生抗體無顯著性差異；(2)3組(6~12月)產(chǎn)生抗體率明顯高于前兩組接近成人水平。首先，與已報(bào)道文獻(xiàn)相比，本次調(diào)查的新生兒組的抗體產(chǎn)生率偏高[9,10]。這是因?yàn)槲以洪_展新生兒溶血病檢測較早，周邊地區(qū)疑患新生兒溶血病的病例大多轉(zhuǎn)診至我院，使得新生兒組標(biāo)本中有一部分是ABO溶血病例，由于這部分病例受到來自母體IgG抗A、抗B的影響，且IgG抗體半衰期為23d左右[11]，這增加了新生兒組抗體產(chǎn)生率的權(quán)重，比其他文獻(xiàn)報(bào)道的數(shù)據(jù)偏高。其次，6個(gè)月以后的嬰幼兒可能處于戶外活動(dòng)增加、添加輔食、食物多樣性的階段，加大了嬰幼兒通過呼吸道、消化道接觸菌群的幾率，大大提高了其產(chǎn)生IgM抗體的幾率，使得6個(gè)月以后的嬰幼兒抗體產(chǎn)生率高達(dá)96.5%，接近成人水平。因此，可以認(rèn)為 ABO血型IgM抗體生成的數(shù)量和效價(jià)是隨時(shí)間呈遞增的趨勢[12，13]，尤其是6個(gè)月以后的嬰幼兒IgM 抗體有顯著的增加，其血清中的ABO血型IgM抗體逐步達(dá)到了鹽水法檢測的閾值。對于尚未產(chǎn)生相應(yīng)抗體的嬰幼兒,若在ABO正定型中尚存不確定時(shí),可以考慮采用更為先進(jìn)的分子生物學(xué)方法進(jìn)行檢測[14]。

綜上所述，業(yè)內(nèi)規(guī)定6個(gè)月以內(nèi)近幾年來嬰幼兒可以不做反定型，可以理解為6個(gè)月以內(nèi)嬰幼兒正反相符率不高，只有不到60%，而6個(gè)月以后則接近成人水平，高達(dá)96%。將界限定在6個(gè)月有一定的合理性。下一步我們將進(jìn)一步細(xì)化數(shù)據(jù)分組，看IgM抗體產(chǎn)生率與月齡之間是否還有其他規(guī)律，這將進(jìn)一步明確嬰幼兒ABO血型正反定型的必要性，也將有助于正確鑒定嬰幼兒ABO血型，從而確保嬰幼兒臨床輸血的安全和提高嬰幼兒臨床輸血的療效。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006:246-249．

[2]杰夫·丹尼爾.人類血型[M].北京:科學(xué)出版社,2007:8-16.

[3]Springer GF,Horton RE,Forbes M.Origin of antihuman blood group B agglutinins in germfree chicks[J].Ann NY Acad Sci,1959,78:272-275.

[4]Springer GF,Horton RE,Forbes M.Origin of antihuman blood group B agglutinins in white Leghorn chicks[J].J Exp Med,1959,110(2):221-244.

[5]Springer GF,Horton RE.Blood group isoantibody stimulation in man by feeding blood group-active bacteria[J].J Clin Invest,1969,48(7):1280-1291.

[6]Irei T,Ohdan H,Zhou W,et al.The persistent elimination of B cells responding to blood group A carbohydrates by synthetic group A carbohydrates and B-1 cell differentiation blockade:novel concept in preventing antibody-mediated rejection in ABO-incompatible transplantation[J].Blood,2007,110(13):4567-4575.

[7]馬曙軒,徐樨巍,宋文琪,等.276例6月齡以下嬰兒ABO血型IgM抗體分析[J].中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志,2008,16(4):919-921．

[8]馬曙軒.嬰幼兒ABO血型IgM抗-A、抗-B產(chǎn)生及效價(jià)分布調(diào)查[J].中國輸血雜志,2013,26(2):109-110.

[9]沈健,陳秉宇.嬰幼兒ABO血型IgM抗體分析[J].臨床血液學(xué)雜志(輸血與檢驗(yàn)版),2010,23(2):65-68.

[10]符小玲.198例嬰幼兒ABO血型IgM抗體分析 [J].海南醫(yī)學(xué),2010,21(21):113-115.

[11]高曉明.免疫學(xué)教程[M].北京:高等教育出版社,2006:138.[12]沈健.162例嬰幼兒ABO血型IgM抗體回顧性分析[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2009,119(12):2959-2960.

[13]農(nóng)榮欣.新生兒ABO血型鑒定結(jié)果分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2014,32(4):462-463.

[14]Roback JD,Barclay S,Hillyer CD.An automatable format for accurate immunohematology testing by flow cytometry[J]．Transfusion,2003,43(7):918.