張建東，郭連峰，李 寧，劉北陸，尹學(xué)敬(哈勵遜國際和平醫(yī)院:.檢驗科；.產(chǎn)科,河北衡水 053000)

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·臨床探討·

酒精依賴對機體組織中腺苷脫氨酶含量的研究*

張建東1，郭連峰1，李 寧1，劉北陸1，尹學(xué)敬2(哈勵遜國際和平醫(yī)院:1.檢驗科；2.產(chǎn)科,河北衡水 053000)

目的 探討酒精依賴對大鼠機體組織腺苷脫氨酶(ADA)含量的影響。方法 40只大鼠隨機分為對照組(10只)和酒精依賴組(30只),應(yīng)用腺苷脫氨酶檢測試劑盒檢測各組大鼠腦頂葉、脾、肝臟、小腸、肌肉中 ADA含量。結(jié)果 與對照組比較，酒精依賴組腦組織和小腸中ADA(30、60 d)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，90 d組ADA含量明顯升高(P<0.05)；酒精依賴組脾中ADA含量均高于對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；酒精依賴組肝臟中ADA含量均明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；酒精依賴組肌肉中ADA(30、60、90 d)與對照組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但90 d組有升高趨勢。結(jié)論 酒精依賴使機體組織中ADA含量增高,促進嘌呤核苷酸分解代謝。

酒精依賴； 腺苷脫氨酶； 核苷酸

目前人們對酒的消費量逐漸增大，長期大量飲用易使人成癮，但酒精依賴機制尚未明確。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為神經(jīng)適應(yīng)機制可能是酒精致依賴的主要機制。本研究通過前期研究表明酒精依賴可導(dǎo)致機體血尿酸水平升高。尿酸是嘌呤核苷酸代謝產(chǎn)物，腺苷脫氨酶(ADA)是嘌呤核苷酸分解代謝的關(guān)鍵酶?，F(xiàn)通過檢測大鼠機體組織中ADA含量變化，研究酒精是否通過調(diào)控核苷酸代謝的關(guān)鍵酶而影響機體的核酸代謝。報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般材料 河北省實驗動物中心提供的健康成年SD雄性大鼠40只，體質(zhì)量(200±20)g,腺苷脫氨酶檢測試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 動物分組 參照 Turchan等方法建立酒精依賴動物模型。40只大鼠隨機分為2組，分別為對照組10只,酒精依賴組30只。大鼠普通固體飼料，且同條件飼養(yǎng)。

1.2.2 動物模型制備 對照組：大鼠飲自來水,自由進食,每天 9:00更換飲水。酒精依賴組： 實驗大鼠的飲水為含6% (v/v)乙醇的水溶液,作為飲水的惟一來源,24 h自由飲水,自由進食,每天9:00配制酒精水溶液。實驗30、60、90 d處死。2組大鼠均用乙醚麻醉,快速取腦頂葉、脾、肝臟、小腸、肌肉組織標(biāo)本,立即置-20 ℃保存,備用。

1.3 樣本檢測 腦頂葉、脾、肝臟、小腸、肌肉中ADA測定，按ADA檢測試劑盒說明書嚴(yán)格操作,采用比色法。

2 結(jié) 果

2組大鼠ADA含量檢測結(jié)果比較：(1)腦中ADA ：與對照組比較，酒精依賴組(30、60 d)ADA含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，酒精依賴組(90 d)ADA含量明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(2)脾中ADA：酒精依賴組ADA含量均高于對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。(3)肝臟ADA：酒精依賴組ADA含量均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(4)小腸ADA：酒精依賴組ADA 含量變化與腦中相似，30 d和60 d組ADA含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，90 d組ADA含量升高明顯 (P<0.05)。(5)肌肉ADA：酒精依賴組(30、60、90 d)與對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但90 d組有升高趨勢(P<0.05)。見表1。

表1 2組大鼠各組織ADA檢測結(jié)果比較

注：-表示無數(shù)據(jù)。

3 討 論

尿酸是嘌呤核苷酸分解代謝的終產(chǎn)物。流行病學(xué)研究提示高尿酸血癥還會引起尿酸增高，與高血壓、高脂血癥、動脈粥樣硬化、肥胖、胰島素抵抗的發(fā)生密切相關(guān)[1-2]。嘌呤核苷酸分解代謝過程中的關(guān)鍵酶有ADA 和黃嘌呤氧化酶,其在機體廣泛存在，ADA占優(yōu)勢地位。最新研究表明，ADA活性的增加會升高機體體內(nèi)黃嘌呤與次黃嘌呤的產(chǎn)生量并引起細胞毒性，而其活性降低則能提高機體的抗炎能力[3-4]。嘌呤核苷酸的分解代謝過程中,ADA將腺嘌呤核苷催化生成為次黃嘌呤核苷。XOD將次黃嘌呤催化生成黃嘌呤,然后進一步催化生成尿酸。通過檢測組織中ADA活性可反映嘌呤核苷酸在體內(nèi)的分解代謝情況。

本研究酒精依賴組各組織(腦、脾、肝臟、小腸)中ADA活性均升高，說明酒精在機體整體水平上使嘌呤核苷酸分解代謝增加。脾中ADA活性升降幅度不明顯，分析原因可能為ADA在脾中含量較高，而構(gòu)建動物模型為慢性酒精依賴模型，每天的飲酒量相對較低，經(jīng)血液流經(jīng)到脾的含量就更低，相對于高含量的ADA，酒精的作用就不明顯。腦組織中ADA活性均升高比較慢，酒精依賴組(90 d)升高有明顯差異，戒酒后腦組織ADA含量雖有下降趨勢,但與酒精依賴組(90 d)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),提示酒精對腦組織中核苷酸的代謝影響是一個較長過程，腦內(nèi)核苷酸合成能力較低，其合成主要依賴補救合成途徑。因此酒精對腦組織的影響更明顯而持久。肌肉中只有90 d組ADA有升高趨勢，可見酒精依賴對肌肉的作用較緩慢，這與臨床上酒精依賴患者晚期出現(xiàn)肌肉乏力、震顫等癥狀原因一致。

綜上所述,酒精依賴可以使各組織(腦、脾、肝臟、小腸)中ADA含量增高,促進嘌呤核苷酸分解代謝，為酒精依賴作用的生化藥理學(xué)機制提供新認(rèn)識。

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[3] Yury K，Elena K．AMP deaminase and adenosine deaminase activities in liver and brain regions in acute ammonia intoxication and subacute toxic hepatitis[J]．Brain Research，2010，1311(85):175-181.

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河北省衛(wèi)生廳醫(yī)學(xué)科學(xué)研究課題資助項目(20130342)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.18.043

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1672-9455(2015)18-2753-02

2015-03-15

2015-04-10)