萬素琴　周瑋　顏春榮　徐春祥

摘要：建立了白酒中3種鄰苯二甲酸酯類的GC-MS分析方法，通過比較不同的前處理方法，確定白酒的提取方法，同時確定質(zhì)譜條件。試驗表明：方法檢出限0.05 mg/kg，相關(guān)系數(shù)大于0.998，線性范圍為0.05～5mg/kg，高中低濃度添加回收率為84-115%。該方法前處理過程簡單、凈化效果好，可用于白酒樣品中3種鄰苯二甲酸酯類增塑劑的測定。

關(guān)鍵詞：白酒 鄰苯二甲酸酯 氣質(zhì)聯(lián)用儀

中圖分類號：TS262.3 文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2015）02-0014-02

鄰苯二甲酸酯（Phthalic Acid Esters，PAEs），是鄰苯二甲酸形成的酯的統(tǒng)稱，俗名叫“增塑劑”。它是一種環(huán)境荷爾蒙，廣泛分布于各種食物內(nèi)，其毒性超過三聚氰胺20倍。塑化劑DEHP的作用類似于人工荷爾蒙，其生物毒性主要屬雌激素與抗雄激素活性，對人體的健康危害極大。目前其測定方法主要有薄層掃描法、傅里葉變換紅外光譜法、氣相色譜法、液相色譜法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法和GC-MS法，GC-MS方法能進行選擇性離子進行定性定量，抗干擾能力較強[1-3]。因此，本文擬采用GC-MS法對白酒中鄰苯二甲酸酯類化合物進行測定，以提高測定精度。

塑化劑包括鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP）和鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）以及鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）等17種，本實驗主要以DIBP，DBP，DEHP為分析目標物，建立白酒中PEAs的GC-MS測定方法。

1 實驗部分

（1）儀器與試劑。Agilent7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS），超聲波發(fā)生器，正己烷（色譜純），乙腈（色譜純），丙酮（色譜純），無水硫酸鈉（分析純，200℃烘3h后備用），無水乙醇（色譜純），氯化鈉（色譜純），3種鄰苯二甲酸酯標準品（純度均在95%以上）。

（2）試驗所用玻璃器皿。所有試驗用玻璃器皿均用丙酮浸泡12h后200℃烘烤2h。

（3）原料。白酒。

（4）標準溶液的制備。準確稱取DIBP、DBP、DEHP標準品各0.05g，分別用正己烷稀釋定容至50mL，配制成1000mg/L的單標儲備液于棕色容量瓶中。分別移取上述3種單標儲備液各1mL，用正己烷定容至10mL，配制成100mg/L的混合標準儲備液，置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

（5）標準曲線繪制。取100mg/L儲備溶液，60%乙醇溶液稀釋成0.5、1、2、5、10mg/L工作液，以DIBP、DBP、DEHP含量為橫坐標，峰面積為縱坐標制作標準曲線。

（6）樣品處理。準確移取5ml白酒樣品至25mL具塞試管中，85℃水浴30min（期間振蕩混勻數(shù)次），從而蒸發(fā)乙醇。加入5ml正己烷，渦旋振蕩1min，加入1g氯化鈉30min后靜置分層，取上層進樣分析，過濾膜供氣相色譜-質(zhì)譜檢測[3-4]。

2 色譜條件

色譜柱：HP-5MS 30m×0.25mm×0.25μm，載氣為高純氦氣（純度為99.99%），恒流模式，柱流速1mL/min，進樣口溫度250℃，不分流進樣，進樣量為1μL。升溫程序：柱溫60℃保持1min，以20℃/min升溫至220℃，保持1min，再以5℃/min升溫至280℃，保持4min。

MS條件：EI離子源，電子能源70eV，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃，連接線溫度為280℃。電子倍增器電壓2300V，GC-MS接口溫度280℃，分析結(jié)果運用NIST標準譜庫進行檢索，列出匹配度大于90%的結(jié)果，并結(jié)合圖譜進行定性分析，利用外標法計算已定性物質(zhì)的含量。

3 結(jié)果與分析

3.1 提取溶劑及體積的選擇

以不含塑化劑的空白酒樣為基質(zhì)，在5ml酒樣品加入1ml濃度為 3mg/L的標準溶液，分別以正己烷、甲醇、三氯甲烷為提取溶劑，按照（6）同法處理。結(jié)果見表1。提取結(jié)果表明甲醇、三氯甲烷超聲提取的效果不及正己烷。因此，實驗選擇以正己烷作為提取溶劑（見表1）。

在5ml酒樣品加入1ml濃度為 3mg/L的標準溶液，分別以正己烷、甲醇、三氯甲烷為提取溶劑，按照（6）同法處理。結(jié)果表明選擇2ml正己烷的提取效率較好（見表2）。

3.2 提取時間的選擇

分別采用正己烷平行測定3組，震搖后超聲振蕩每組分為10min，20min，30min，60min。實驗表明30min時可得到最佳回收率。

3.3 除水試劑的選擇

分別采用氯化鈉、無水硫酸鈉、一水合碳酸鈉、氫氧化鈉。其中氯化鈉的吸水性較好（142g吸180g的水），選擇其作為除水試劑。根據(jù)上述中提取試劑選用2ml正己烷，且酒樣品中一般含水量為60%，可選用1g左右的氯化鈉。

3.4 特征離子的選擇

對樣品進行SCAN掃描，確定3種鄰苯二甲酸酯類的定量碎片離子（表3）。進行SIM模式，只對分析物某些特征離子進行選擇性檢測，因而分析物的色譜峰強度增大，同時消除了樣品基體中其他共存組分產(chǎn)生的影響，提高了分析方法的選擇性和靈敏度[5-7]。

將3種目標物的混合標準溶液通過SIM模式得到TIC離子流圖（圖1）。

3.5 方法的線性關(guān)系與檢出限

將三種標準溶液按上述實驗方法和儀器色譜質(zhì)譜條件進行測定，以鄰苯二甲酸酯的濃度X（mg/L）為縱坐標，峰面積Y為橫坐標進行線性回歸。各鄰苯二甲酸酯的質(zhì)量濃度在范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為：Y=217974X+56，相關(guān)系數(shù)r為0.998。以信噪比S/N=3，計算出檢出限，當取樣量為1.0g時，檢出限為0.05mg/L。

3.6 方法的回收率與精密度

取濃度為2.0mg/L的標準工作溶液，進樣1μL進行儀器分析，重復(fù)測定6次，峰面積RSD為2.19%。取酒樣加入（0.05mL，0.1mL，1mL，2mL） 1mg/L的標準溶液，按上述方法進行樣品前處理和測定，計算該方法回收率為84%～115%。

3.7 樣品的測定

測定了某白酒的含量，其中DIBP和DBP含量分別為0.13和0.23mg/kg。實際樣品TIC圖見圖2。

3.8 空白試驗

為了降低白酒中PAEs本底的干擾，經(jīng)試驗證明試驗過程中的試劑，器皿及其塑料用繩，對實驗有干擾（圖3），故實驗過程中應(yīng)注意如下幾點：

（1）試劑：選用純度較高的色譜純試劑，以降低試劑空白；無硫酸鈉裝于塑料瓶中是造成空白值高的主要原因之一，未被200℃烘烤的玻璃器皿采用1ml正己烷超聲提取后DEHP的含量為0.07mg/kg，且基線較不穩(wěn)。該試驗所用無水硫酸鈉均于200℃烘烤3h后在干燥器中保存。

（2）試驗用水：新制純水，減少實驗室空氣及盛水容器對試驗空白值的影響。

（3）器皿：稱取塑料用繩（1g），1ml正己烷超聲提取后DEHP的含量為0.15mg/kg.所有玻璃器皿經(jīng)12h浸泡、洗凈、200℃烘干的，瓶子上的繩子應(yīng)采用棉繩，防止塑料繩帶入的影響。

（4）人員操作時帶入的影響，如手套等。稱取手套（1g），1ml正己烷超聲提取后DEHP的含量為0.04mg/kg。

（5）儀器應(yīng)保持最佳狀態(tài)，樣品測定前應(yīng)考察儀器系統(tǒng)中殘留的PEAS本底值，本底值偏高時應(yīng)可采取措施：高溫烘烤離子源，多次進空白樣品。

參考文獻

[1]李升蓮，黃玉明，舒為群，曹佳.氣相色譜- 質(zhì)譜測定鄰苯二甲酸酯類內(nèi)分泌干擾物 西南師范大學(xué)學(xué)報[J]2008（4）：59-63.

[2]劉俊，朱然，田延河等.氣相色譜- 質(zhì)譜法對食品包裝材料中鄰苯二甲酸酯類與己二酸酯類增塑劑的同時測定分析測試學(xué)報 [J]2010（9）：934-947.

[3]陳福民.小心，到處插一腳的塑化劑.化工管理[J]：2013（1）：100-103.

[4]伊雯.塑化劑，白酒里的鬼.食品與生活[J]：2012（12）：19.

[5]熊含鴻，曾玩嫻.白酒中17種鄰苯二甲酸酯測定方法初探.釀酒[J]：2013（3）：94-95.

[6]邵棟梁.GC—MS法測定白酒中鄰苯二甲酸酯殘留量.化學(xué)分析計量[J]：2010（6）：33-35.

[7]才靜，張哲，周正香，孫婭娜，祝浩.塑料桶裝白酒中十六種鄰苯二甲酸酯的測定[J].商品與質(zhì)量2012（12）：259-266.

[8]中華人民共和國衛(wèi)生部，中國國家標準化管理委員會GB/T 21911-2008食品中鄰苯二甲酸酯的測定[S].