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        HPLC法在現(xiàn)代中藥中的應(yīng)用

        2015-05-30 00:38:44韓磊
        科技創(chuàng)新與應(yīng)用 2015年17期
        關(guān)鍵詞:綜述應(yīng)用

        韓磊

        摘 要:高效液相色譜法,又稱高壓液相色譜法,在現(xiàn)代科學(xué)尤其在藥學(xué)研究領(lǐng)域占有非常重要的地位,是藥學(xué)方面常用的研究手段,是在液相色譜基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種色譜方法,已在天然藥物中獲得廣泛應(yīng)用,發(fā)揮作用巨大。文章主要介紹了高效液相色譜法在現(xiàn)代中藥中的應(yīng)用。

        關(guān)鍵詞:HPLC法;現(xiàn)代中藥;應(yīng)用;綜述

        引言

        高效液相色譜法,自上世紀(jì)世紀(jì)六十年代崛起,經(jīng)過(guò)不斷的發(fā)展,從理論、實(shí)踐方面日臻完善,應(yīng)用范圍較廣,涉及醫(yī)藥領(lǐng)域、環(huán)境保護(hù)、生命科學(xué)、石化等基礎(chǔ)和應(yīng)用領(lǐng)域。大多數(shù)有機(jī)化合物可以用HPLC來(lái)分析測(cè)定。在藥物分析機(jī)分離中的應(yīng)用尤其廣泛,發(fā)展尤其快速。按分離機(jī)理的不同,主要有:吸附色譜法、液-液分配色譜法、離子交換色譜法、分子排阻色譜法、親和色譜法、手性色譜法等。高效液相色譜法自五年版《中國(guó)人民共和國(guó)藥典》收載以來(lái),在藥物分析領(lǐng)域的應(yīng)用發(fā)展迅速,藥品質(zhì)量控制中的作用日益突顯,已發(fā)展成為一種主流的色譜分析方法。

        1 高效液相色譜法在有效成分分析中的應(yīng)用

        1.1 黃酮類化合物中的應(yīng)用

        中藥的成分復(fù)雜多樣,多數(shù)含有黃酮類化合物,也是天然藥物中非常重要的一類化合物,隨著黃酮類化合物的廣泛研究,其分析和分離的手段不斷得到改進(jìn),高效液相色譜法在析和分離黃酮類化合物方面的應(yīng)用也非常廣泛。田娜等人采用制備液相色譜法,從荷葉中分離和制備了一類黃酮化合物。方法是采用60%乙醇回流提取,粗提取液濃縮,以D-101柱與聚酰胺色譜分離,后經(jīng)Symmetry PrepTMC18柱分離,采用水-乙腈為流動(dòng)相,進(jìn)行梯度洗脫,流速以5ml/min,最后分析出3種黃酮類化合物。利用紫外、紅外、核磁共振、質(zhì)譜等分析,確定以上三個(gè)化合物分別為紫云英苷、異槲皮苷和金絲桃苷。三種化合物的純度都達(dá)到了97%以上。其中紫云英苷為首次從荷葉中分離[1]。Justesen等采用液相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)15種藥材中的黃酮進(jìn)行了分析和分離,分析發(fā)現(xiàn)歐芹的芹菜素含量最高,達(dá)到了510-630mg/100g[2]。Chen等研究漆樹(shù)黃酮在小鼠體內(nèi)的代謝,采用HPLC分離漆樹(shù)黃酮及其代謝物,并采用質(zhì)譜和HPLC,最終確定了代謝產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)[3]。

        1.2 皂苷類化合物中的應(yīng)用

        皂苷類成分也屬于中藥中常見(jiàn)的活性成分,多數(shù)沒(méi)有紫外吸收,或者只有末端吸收,易受試劑干擾,因此使用紫外檢測(cè)法有一定的局限性。采用用高效液相色譜與蒸發(fā)光檢測(cè)器,可以有效檢測(cè)皂苷類成分。在分析浙麥冬、川麥冬中麥冬皂苷D含量的應(yīng)用較好[4],在對(duì)酸棗仁中酸棗仁皂苷的含量測(cè)定[5],柴胡中柴胡皂苷的含量測(cè)定[6],黃芪中黃芪甲苷的含量測(cè)定[7],天麻中天麻苷含量測(cè)定[8]都取得很好的分析效果。

        2 HPLC-ELSD在中藥分析中的應(yīng)用

        一方面中藥的化學(xué)成分很多,結(jié)構(gòu)復(fù)雜,其中一些成分不存在紫外吸收,有的只在紫外末端有吸收。另一方面,色譜分離困難和流動(dòng)相存在干擾,致使紫外檢測(cè)在定性定量方面的分析有一定的難度。而ELSD在一定程度上彌補(bǔ)了此方面的不足,因此應(yīng)用較廣在糖類成分、內(nèi)酯類成分、皂苷類成分、氨基酸、萜類成分和生物堿類成分等其他成分分析中,得到了較好的分析效果[9]。

        3 結(jié)束語(yǔ)

        中藥成分的復(fù)雜性和多樣性卻是現(xiàn)代中藥研究者們所頭疼的問(wèn)題,同時(shí)也在制約中藥制劑的發(fā)展和臨床上的應(yīng)用,中藥的資源不斷地豐富與發(fā)展,但質(zhì)量卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒(méi)有一個(gè)科學(xué)的量化標(biāo)準(zhǔn)體系,而實(shí)現(xiàn)這些就得通過(guò)精密的分析和檢測(cè)手段。作者通過(guò)對(duì)相關(guān)資料的查閱,綜述了高效液相色譜法在黃酮、皂苷、糖類等中藥化學(xué)成分中的分析和分離方面的應(yīng)用,HPLC法具有良好的分離性能、選擇性好、分析速度快、適用范圍廣、樣品用量少、靈敏度高等諸多優(yōu)點(diǎn)。

        參考文獻(xiàn)

        [1]田娜,劉仲華,黃建安,等.高效制備液相色譜法從荷葉中分離制備黃酮類化合物[J].色譜,2007(1):88-92.

        [2]Justesen UJ,knuthsen p.Composition of flavnoids in fresh herbs and calculation of flavonoid intake by use of herbs in traditional Danish dishes [J].Food chemistry,2001(73):245-250.

        [3]Chen H,Zuo Y G,Deng Y W.Separation and determination of flavonoids and other phenolic compounds in cranberry juice by highperformance liquid chromatography [J].J.Chromatogr.A.2001,913:387-395.

        [4]俞建平,馬月光,邵建峰,等.ELSD-HPLC法測(cè)定浙麥冬、川麥冬中麥冬皂苷D含量的方法研究[J].中藥新藥與臨床藥理,2002,13(4):253.

        [5]李會(huì)軍,李萍.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器測(cè)定酸棗仁中酸棗仁皂苷A及B的含量[J].藥物分析雜志,2000,20(2):82.

        [6]陳妍.HPLC-ELSD法測(cè)定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量[J].天津藥學(xué),2002,14(3):73.

        [7]田南卉,楊國(guó)紅,方穎,等.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射器測(cè)定黃芪甲苷的含量[J].藥物分析雜志,2000,20(3):199.

        [8]魏泱,丁明玉,李紅霞.高效液相色譜-蒸發(fā)光散射和紫外檢測(cè)法測(cè)定天麻中天麻甙含量[J].高等學(xué)?;瘜W(xué)學(xué)報(bào),2001,22(4):563.

        [9]黃永焯,王寧生.HPLC/ELSD在天然藥物分析中的應(yīng)用[J].中藥新藥與臨床藥理,2001,12(6):444.

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