韓磊

摘 要：高效液相色譜法，又稱高壓液相色譜法，在現(xiàn)代科學(xué)尤其在藥學(xué)研究領(lǐng)域占有非常重要的地位，是藥學(xué)方面常用的研究手段，是在液相色譜基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種色譜方法，已在天然藥物中獲得廣泛應(yīng)用，發(fā)揮作用巨大。文章主要介紹了高效液相色譜法在現(xiàn)代中藥中的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：HPLC法；現(xiàn)代中藥；應(yīng)用；綜述

引言

高效液相色譜法，自上世紀(jì)世紀(jì)六十年代崛起，經(jīng)過(guò)不斷的發(fā)展，從理論、實(shí)踐方面日臻完善，應(yīng)用范圍較廣，涉及醫(yī)藥領(lǐng)域、環(huán)境保護(hù)、生命科學(xué)、石化等基礎(chǔ)和應(yīng)用領(lǐng)域。大多數(shù)有機(jī)化合物可以用HPLC來(lái)分析測(cè)定。在藥物分析機(jī)分離中的應(yīng)用尤其廣泛，發(fā)展尤其快速。按分離機(jī)理的不同，主要有：吸附色譜法、液-液分配色譜法、離子交換色譜法、分子排阻色譜法、親和色譜法、手性色譜法等。高效液相色譜法自五年版《中國(guó)人民共和國(guó)藥典》收載以來(lái)，在藥物分析領(lǐng)域的應(yīng)用發(fā)展迅速，藥品質(zhì)量控制中的作用日益突顯，已發(fā)展成為一種主流的色譜分析方法。

1 高效液相色譜法在有效成分分析中的應(yīng)用

1.1 黃酮類化合物中的應(yīng)用

中藥的成分復(fù)雜多樣，多數(shù)含有黃酮類化合物，也是天然藥物中非常重要的一類化合物，隨著黃酮類化合物的廣泛研究，其分析和分離的手段不斷得到改進(jìn)，高效液相色譜法在析和分離黃酮類化合物方面的應(yīng)用也非常廣泛。田娜等人采用制備液相色譜法，從荷葉中分離和制備了一類黃酮化合物。方法是采用60%乙醇回流提取，粗提取液濃縮，以D-101柱與聚酰胺色譜分離，后經(jīng)Symmetry PrepTMC18柱分離，采用水-乙腈為流動(dòng)相，進(jìn)行梯度洗脫，流速以5ml/min，最后分析出3種黃酮類化合物。利用紫外、紅外、核磁共振、質(zhì)譜等分析，確定以上三個(gè)化合物分別為紫云英苷、異槲皮苷和金絲桃苷。三種化合物的純度都達(dá)到了97%以上。其中紫云英苷為首次從荷葉中分離[1]。Justesen等采用液相質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)15種藥材中的黃酮進(jìn)行了分析和分離，分析發(fā)現(xiàn)歐芹的芹菜素含量最高，達(dá)到了510-630mg/100g[2]。Chen等研究漆樹黃酮在小鼠體內(nèi)的代謝，采用HPLC分離漆樹黃酮及其代謝物，并采用質(zhì)譜和HPLC，最終確定了代謝產(chǎn)物的化學(xué)結(jié)構(gòu)[3]。

1.2 皂苷類化合物中的應(yīng)用

皂苷類成分也屬于中藥中常見(jiàn)的活性成分，多數(shù)沒(méi)有紫外吸收，或者只有末端吸收，易受試劑干擾，因此使用紫外檢測(cè)法有一定的局限性。采用用高效液相色譜與蒸發(fā)光檢測(cè)器，可以有效檢測(cè)皂苷類成分。在分析浙麥冬、川麥冬中麥冬皂苷D含量的應(yīng)用較好[4]，在對(duì)酸棗仁中酸棗仁皂苷的含量測(cè)定[5]，柴胡中柴胡皂苷的含量測(cè)定[6]，黃芪中黃芪甲苷的含量測(cè)定[7]，天麻中天麻苷含量測(cè)定[8]都取得很好的分析效果。

2 HPLC-ELSD在中藥分析中的應(yīng)用

一方面中藥的化學(xué)成分很多，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，其中一些成分不存在紫外吸收，有的只在紫外末端有吸收。另一方面，色譜分離困難和流動(dòng)相存在干擾，致使紫外檢測(cè)在定性定量方面的分析有一定的難度。而ELSD在一定程度上彌補(bǔ)了此方面的不足，因此應(yīng)用較廣在糖類成分、內(nèi)酯類成分、皂苷類成分、氨基酸、萜類成分和生物堿類成分等其他成分分析中，得到了較好的分析效果[9]。

3 結(jié)束語(yǔ)

中藥成分的復(fù)雜性和多樣性卻是現(xiàn)代中藥研究者們所頭疼的問(wèn)題，同時(shí)也在制約中藥制劑的發(fā)展和臨床上的應(yīng)用，中藥的資源不斷地豐富與發(fā)展，但質(zhì)量卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)沒(méi)有一個(gè)科學(xué)的量化標(biāo)準(zhǔn)體系，而實(shí)現(xiàn)這些就得通過(guò)精密的分析和檢測(cè)手段。作者通過(guò)對(duì)相關(guān)資料的查閱，綜述了高效液相色譜法在黃酮、皂苷、糖類等中藥化學(xué)成分中的分析和分離方面的應(yīng)用，HPLC法具有良好的分離性能、選擇性好、分析速度快、適用范圍廣、樣品用量少、靈敏度高等諸多優(yōu)點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)

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