陳光明　趙光國　楊艷娟

摘要： [目的]研究川續(xù)斷種子的生物學(xué)特性與萌發(fā)特性。[方法]通過對(duì)川續(xù)斷種子的形態(tài)特征、解剖結(jié)構(gòu)的觀測(cè)，并測(cè)定了千粒重、吸水率等特征。同時(shí)，在不同溫度、不同光照條件、果皮去除與否等條件下測(cè)定了川續(xù)斷種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)。[結(jié)果]川續(xù)斷種子較小，呈四棱柱型，具有胚乳，千粒重為3.35 g，吸水率約為102%；川續(xù)斷種子在20 ℃的條件下發(fā)芽率較高，且萌發(fā)時(shí)需光照，而果皮的存在與否對(duì)萌發(fā)率影響不大。[結(jié)論]該研究為川續(xù)斷的擴(kuò)繁和大量栽培奠定了一定基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞： 川續(xù)斷；種子；生物學(xué)特性；萌發(fā)特性

中圖分類號(hào)：S567 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611（2015）08-043-02

川續(xù)斷（Dipsacus asperoides C.Y.cheng et T.M.Ai）為川續(xù)斷科川續(xù)斷屬植物[1]，以干燥的根入藥[2]，具有補(bǔ)肝腎、行血脈、續(xù)筋骨、安胎止漏的功效，是傷科與婦科的常用中藥[3]，在民間驗(yàn)方中使用廣泛?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，川續(xù)斷系“全能性”新型藥物，具有增強(qiáng)免疫、促進(jìn)骨損傷愈合、抗炎、抗氧化等作用[4]，用于治療風(fēng)濕性骨疼、腰膝酸疼、肝腎虛弱、遺精、尿頻、胎動(dòng)不安、月經(jīng)不調(diào)、崩漏、跌打損傷[5]，其主要藥用成分是三萜皂苷類化合物、生物堿類、環(huán)烯醚帖類、揮發(fā)油類等[6]，在2010版《中國藥典》中對(duì)川續(xù)斷的品種和質(zhì)量作了明確的規(guī)定[7]。

川續(xù)斷多為野生，由于多年的不斷采挖，使其資源量逐漸減少，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)需求。如果資源供給問題得不到解決，川續(xù)斷本身脆弱的原生生態(tài)系統(tǒng)將難以支撐市場(chǎng)需求，這必將導(dǎo)致續(xù)斷屬植物生物資源的減少和遺傳多樣性資源的喪失[8]。為了解決這一現(xiàn)狀必須進(jìn)行擴(kuò)大繁殖與人工栽培，而這又必須依賴于種子繁殖。但目前對(duì)川續(xù)斷種子特性及其發(fā)芽率等方面的研究較少。筆者在此通過對(duì)川續(xù)斷種子的形態(tài)特征、解剖結(jié)構(gòu)的觀測(cè)，初步研究了川續(xù)斷種子的生物學(xué)特性，并通過設(shè)置光照和溫度條件，尋找提高其發(fā)芽率的途徑，確定最佳萌發(fā)條件，以期為大量擴(kuò)大繁殖和人工栽培提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料來源 試驗(yàn)種子來源于云南農(nóng)業(yè)大學(xué)后山教學(xué)實(shí)踐基地，于2013年11月份采收，采回后于通風(fēng)干燥處保存。

1.2 所用儀器設(shè)備 智能人工氣候培養(yǎng)箱（ZRX-2580D）、JA1003A電子天平（精確0.001 g）、培養(yǎng)皿、燒杯、容量瓶、定性濾紙、解剖鏡。

1.3 方法

1.3.1 形態(tài)特征及解剖結(jié)構(gòu)觀察。 利用解剖鏡觀察川續(xù)斷的種子形態(tài)特征，并觀測(cè)其解剖結(jié)構(gòu)。

1.3.2 千粒重的測(cè)定。采用百粒法測(cè)千粒重。用數(shù)種器從試驗(yàn)樣品中隨機(jī)數(shù)取8份，每份100粒續(xù)斷種子，3次重復(fù)，分別稱重（g）保留小數(shù)位數(shù)參照GB/T3543-1995《農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程》。

1.3.3 吸水率測(cè)定。

取種子1 g，置于有蒸餾水的燒杯中，在25 ℃恒溫下使其吸水，每隔2 h將種子從燒杯中取出用吸水紙吸干表面水分后稱量，直到種子重量恒定。重復(fù)3次。

吸水量△W=Wt-W（Wt為吸水t時(shí)間后的種子重量，W為吸水前的重量，單位為g）；

種子吸水率（%）=△W/W×100[9]。

1.3.4 萌發(fā)特性研究。

1.3.4.1 溫度條件。

溫度對(duì)種子萌發(fā)的影響設(shè)為10、15、20、25、30 ℃ 5個(gè)溫度恒溫處理，在智能人工氣候培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

1.3.4.2 光照條件。光照對(duì)種子萌發(fā)的影響分為自然光照和黑暗2個(gè)處理。自然光照為每天光照12 h，黑暗用錫箔紙遮光直至試驗(yàn)結(jié)束，在智能人工氣候培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

1.3.4.3 剝?nèi)スぴ囼?yàn)。通過剝除果皮與有果皮在25 ℃相同條件下作發(fā)芽試驗(yàn)，測(cè)定初始發(fā)芽天數(shù)、發(fā)芽率及發(fā)芽勢(shì)間接說明果皮對(duì)種子發(fā)芽的影響。做萌發(fā)試驗(yàn)時(shí)用定性濾紙作萌發(fā)基質(zhì)，將其鋪在培養(yǎng)皿中，將種子整齊排列在定性濾紙上，試驗(yàn)期間注意保持定性濾紙濕潤。每個(gè)處理3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子。以胚芽伸出種子一半為萌發(fā)。自開始做試驗(yàn)起每天記錄發(fā)芽情況依據(jù)每天的發(fā)芽記錄計(jì)算發(fā)芽率。

發(fā)芽率（%）=（n/N）×100，式中，n為正常發(fā)芽的種子數(shù)，N為測(cè)定樣品種子數(shù)。發(fā)芽勢(shì)是指規(guī)定的時(shí)間內(nèi)正常發(fā)芽的種子數(shù)占測(cè)定樣品種子數(shù)的百分率。該試驗(yàn)中在萌發(fā)后第12天統(tǒng)計(jì)發(fā)芽勢(shì)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析 應(yīng)用Excel軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，并應(yīng)用最小差異顯著差值（LSD）進(jìn)行多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 形態(tài)特征及解剖結(jié)構(gòu)觀察 川續(xù)斷的果實(shí)較小，長3.5～4.5 mm，寬約1 mm，呈明顯的四棱柱形，每面中間略向外凸起；果皮表面被有纖細(xì)、白色、倒?fàn)畹亩倘崦?。果?shí)由下位子房發(fā)育而來，前端常殘留萼片及花柱，后端略凹（圖1）；剝掉果皮可見種皮為一膜質(zhì)結(jié)構(gòu)，較薄，側(cè)面有明顯的種臍，基底胎座，基部略狹，著生處形成一平面；長約3 mm（圖2）。

通過對(duì)橫切面和縱切面的觀察，川續(xù)斷的種子具有胚乳，包圍著胚，約占整個(gè)種子體積的一半（圖3a）；胚位于種子中央，通過與種臍垂直方向的縱切面，可見其胚為典型的雙子葉植物胚，兩片子葉較長，約占胚的2/3，胚芽較?。▓D3b）。

2.2 種子千粒重 川續(xù)斷種子千粒重為3.35 g（表1），可見其種子較小，在種子萌發(fā)的過程中自身貯藏的可以利用的營養(yǎng)物質(zhì)非常有限，因此，播種時(shí)一旦種子萌發(fā)后就應(yīng)適當(dāng)施肥以滿足成苗的營養(yǎng)需求。

2.3 種子吸水率 由圖4可見，川續(xù)斷種子在前2 h內(nèi)迅速吸水，吸水率上升速度最快，這一階段屬于吸脹期。0～6 h內(nèi)吸水率呈逐漸上升趨勢(shì)，到6 h時(shí)吸水率平均為102%，6 h后吸水速度變緩，飽和時(shí)的吸水率為110%左右?？梢娫诿劝l(fā)過程中，前期水分充足是至關(guān)重要的，且果皮阻礙不是影響種子萌發(fā)的主要因素。

2.4 不同處理對(duì)川續(xù)斷種子萌發(fā)的影響

2.4.1 不同光照和溫度條件對(duì)川續(xù)斷種子萌發(fā)的影響。

由表2可見，川續(xù)斷在不同設(shè)置處理下發(fā)芽率呈顯著性差異。其次，果皮中可能存在抑制物質(zhì)影響種子的正常萌發(fā)。20 ℃

光照的平均發(fā)芽率最高，極顯著高于其他設(shè)置處理的發(fā)芽率，其次為20 ℃遮光。因此，保證川續(xù)斷種子發(fā)芽率的最佳條件應(yīng)為20 ℃有光照。發(fā)芽勢(shì)差異性不顯著，20 ℃遮光為最高，與20 ℃光照、25 ℃光照、25 ℃遮光、30 ℃光照、30 ℃遮光差異性不顯著，但顯著高于15 ℃遮光、15 ℃光照，極顯著高于10 ℃遮光、10 ℃光照。因此，在黑暗的條件下溫度適宜才能保證川續(xù)斷種子有較高的發(fā)芽勢(shì)。

2.4.2 果皮對(duì)種子萌發(fā)的影響。

由表3可見，在相同溫度和同樣果皮處理的條件下，無果皮的川續(xù)斷種子最先發(fā)芽。其中在溫度為20 ℃無果皮的條件下川續(xù)斷種子發(fā)芽最早，5 d就開始發(fā)芽，但在溫度20 ℃時(shí)果皮有無最終的發(fā)芽率沒有差異，說明果皮對(duì)種子的發(fā)芽率沒有影響。

3 小結(jié)與討論

種子大小是影響種子萌發(fā)的主要因素之一，較大的種子相對(duì)較小的種子具有較快的萌發(fā)速率和較大的萌發(fā)率。研究表明，種子大小能夠影響種子的萌發(fā)能力，直接影響幼苗的形態(tài)建成，最終影響整個(gè)群落的結(jié)構(gòu)[10]。川續(xù)斷的種子有明顯四棱，長3.5～4.5 mm，寬和厚近等，千粒重約為 3.35 g，可見其種子較小，說明種子萌發(fā)過程中自身可以利用的營養(yǎng)物質(zhì)非常有限，播種時(shí)一旦種子萌發(fā)后就應(yīng)適當(dāng)施肥或在播種前施足底肥以滿足后期成苗的營養(yǎng)需求。

川續(xù)斷種子吸水性良好，6 h后種子吸水率平均可以達(dá)102%。由于果皮的有無對(duì)種子的發(fā)芽勢(shì)有影響，而對(duì)最終發(fā)芽率沒有太大的影響，所以果皮對(duì)種子的發(fā)芽有一定影響但不是主要因素，可能存在某些抑制物質(zhì)，這有待于以后探索。

不同溫度和光照處理?xiàng)l件下川續(xù)斷發(fā)芽率差異性顯著，在溫度為20 ℃且有光照的條件下川續(xù)斷發(fā)芽率最高，在溫度為20 ℃遮光的條件下川續(xù)斷發(fā)芽勢(shì)最好，所以川續(xù)斷最適宜的萌發(fā)溫度為20 ℃，這為以后的擴(kuò)繁和大量栽培奠定了一定基礎(chǔ)。

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