張桂 袁梁 曹晶晶 隋文君 魯辛辛

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·論著·

γ-干擾素釋放試驗(yàn)與其他三種檢測(cè)技術(shù)臨床診斷能力的比較研究

張桂 袁梁 曹晶晶 隋文君 魯辛辛

目的 分析γ-干擾素釋放試驗(yàn)(IGRA，本研究采用IGRA-ELISA法)與齊爾-尼爾森(Ziehl-Neelsen)染色法(簡(jiǎn)稱“Z-N法”)、結(jié)核抗體(TB-Ab)膠體金快速檢測(cè)方法(簡(jiǎn)稱“TB-Ab法”)和熒光探針PCR法(簡(jiǎn)稱“熒光PCR法”)等檢測(cè)技術(shù)在北京同仁醫(yī)院應(yīng)用于TB輔助診斷中的作用，對(duì)IGRA-ELISA檢測(cè)技術(shù)作出客觀評(píng)價(jià)。方法 選取本院2012年8月至2013年7月進(jìn)行TB診斷的1228例患者作研究對(duì)象，其中包括IGRA-ELISA 827例、TB-Ab法 306例、Z-N法 324例和熒光PCR法 83例，共1540例次。采用SPSS 16.0軟件統(tǒng)計(jì)分析和繪制受試者工作特征(ROC)曲線，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，分別計(jì)算各技術(shù)ROC曲線下的面積(AUC)，比較各技術(shù)輔助診斷價(jià)值的大小。結(jié)果 IGRA-ELISA的陽(yáng)性檢出率為36.0% (298/827)，均高于TB-Ab法 (6.2%, 19/306)、Z-N法 (3.1%, 10/324)和熒光PCR法 (3.6%, 3/83)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為 98.6、128.9、 35.8,P值均<0.001)。IGRA-ELISA的陽(yáng)性診斷率10.3% (85/827)，均高于TB-Ab法 (1.3%, 4/306)、Z-N法 (2.5%, 8/324)和熒光PCR法 (3.6%, 3/83), 與TB-Ab法和Z-N法相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為 24.8、19.1，P值均<0.001)；而與熒光PCR法相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.8,P>0.05)。IGRA-ELISA的敏感度為97.7% (85/87), 均高于TB-Ab法 (17.4%, 4/23)、Z-N法 (28.6%, 8/28) 和熒光PCR法 (25.0%, 3/12)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2值分別為76.0、65.4、56.4,P值均<0.001)。IGRA-ELISA的特異度為71.2% (527/740), 均低于TB-Ab法 (94.7%, 268/283)、Z-N法 (99.3%, 294/296) 和熒光PCR法 (100.0%, 71/71)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為 65.1、101.6、27.7,P值均<0.001)。IGRA-ELISA的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為28.5% (85/298)，均低于Z-N法 (80.0%, 8/10)和熒光PCR法 (100.0%, 3/3)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.1, 7.3,P值均<0.01)；但高于TB-Ab法 (21.1%, 4/19) 且差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=0.5,P>0.05)。IGRA-ELISA的陰性預(yù)測(cè)值為99.6% (527/529)，均高于TB-Ab法 (93.4%, 268/287)、Z-N法 (93.6%, 294/314) 和熒光PCR法 (88.8%, 71/80)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2值分別為 28.9、27.8、46.3,P值均<0.001)。IGRA-ELISA的ROC曲線的AUC為0.846,P<0.001, 95%CI為0.815～0.877；AUC均大于TB-Ab法 (0.521)、Z-N法 (0.622)和熒光PCR法 (0.625)。結(jié)論 在本院的TB輔助診斷中，IGRA與其他3種檢測(cè)技術(shù)比較有較高的敏感度，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值不高卻有較高的陽(yáng)性檢出率和陽(yáng)性診斷率，特異度較低因陰性預(yù)測(cè)值較高有較好的陰性排查能力，AUC最大有相對(duì)較好的輔助診斷價(jià)值。

干擾素γ釋放試驗(yàn)； 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定； 聚合酶鏈反應(yīng)； 結(jié)核/診斷； 對(duì)比研究

由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis, Mtb)感染所致的結(jié)核病(tuberculosis, TB)是一種常見感染性疾病，TB近年來(lái)在全球范圍內(nèi)呈回升趨勢(shì)，發(fā)病率逐年上升，嚴(yán)重危害著人類健康。世界衛(wèi)生組織估計(jì)全球約20億人感染Mtb，每年新發(fā)TB患者約860萬(wàn)(WHO 2013年報(bào)告)[1]。因此，加強(qiáng)對(duì)結(jié)核感染者和TB患者的診斷，已成為TB控制工作的重點(diǎn)。近年來(lái)，以T細(xì)胞免疫為基礎(chǔ)的體外γ-干擾素釋放試驗(yàn)(Interferon-gamma release assays, IGRA)是結(jié)核免疫診斷技術(shù)的重要突破，該技術(shù)已被證實(shí)在Mtb感染檢測(cè)中有較好的特異度和敏感度[2-3]，并且在歐美國(guó)家已經(jīng)成為一種TB的臨床常規(guī)檢測(cè)方法[4-5]。目前該技術(shù)國(guó)際上較成熟的有兩種，其中一種是采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)的全血檢測(cè)(IGRA-ELISA)。北京同仁醫(yī)院檢驗(yàn)科于2012年開展了國(guó)產(chǎn)的IGRA-ELISA檢測(cè)技術(shù)運(yùn)用于本院的結(jié)核病輔助診斷。本研究選取2012年8月至2013年7月本院臨床各科室送到檢驗(yàn)科進(jìn)行結(jié)核病感染相關(guān)檢測(cè)的患者為研究對(duì)象，比較IGRA-ELISA與齊爾-尼爾森(Ziehl-Neelsen)染色法(簡(jiǎn)稱“Z-N法”)、結(jié)核抗體(TB-Ab)膠體金快速檢測(cè)方法(簡(jiǎn)稱“TB-Ab法”)和熒光探針PCR法(簡(jiǎn)稱“熒光PCR法”)等檢測(cè)技術(shù)在本院TB輔助診斷中的差異。

材料和方法

一、研究對(duì)象

2012年8月至2013年7月北京同仁醫(yī)院Mtb相關(guān)檢測(cè)包括IGRA-ELISA、Z-N法、TB-Ab法和熒光PCR法，臨床各科室送到檢驗(yàn)科進(jìn)行Mtb相關(guān)檢測(cè)且在病案系統(tǒng)中有明確診斷結(jié)果的住院及門診患者都納入本研究。其中包括IGRA-ELISA 827例，TB-Ab法 306例，Z-N法 324例和熒光PCR法 83例，共計(jì)1540例次(1228例患者)。4種TB檢測(cè)技術(shù)的送檢患者例數(shù)及男女構(gòu)成比、年齡情況詳見表1。

二、檢測(cè)方法

1. IGRA-ELISA：采用結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試劑盒(體外釋放酶聯(lián)免疫法)(北京萬(wàn)泰公司生產(chǎn))。該方法分體外抗原刺激全血培養(yǎng)釋放IFN-γ和用ELISA定量測(cè)定IFN-γ兩步。受試者靜脈血分裝到背景管、檢測(cè)管和陽(yáng)性管，于37 ℃培養(yǎng)(22±2)h，1500×g離心10 min，取上清液用ELISA方法檢測(cè)，得到各管吸光度值(A)，A值輸入配套軟件自動(dòng)判讀結(jié)果。洗板機(jī)為美國(guó)伯樂(lè)公司的Bio-Rad 3001，酶標(biāo)儀為美國(guó)安捷倫公司的Bio-tech30。

2. TB-Ab 法：采用結(jié)核分枝桿菌特異性抗體IgG檢測(cè)試劑盒(深圳惠安科技有限公司生產(chǎn))。100 μl血清加入檢測(cè)卡的加樣孔內(nèi)，15 min內(nèi)肉眼觀察結(jié)果。

表1 2012年8月至2013年7月北京同仁醫(yī)院采用不同TB檢測(cè)技術(shù)受檢者的性別、年齡分布情況

3.Z-N法：采用法國(guó)梅里埃公司的抗酸染色試劑盒。用5%石炭酸復(fù)紅初染；3%鹽酸酒精脫色；堿性美藍(lán)復(fù)染，油鏡觀察。背景及其他細(xì)菌為藍(lán)色，抗酸桿菌為紅色。

4. 熒光PCR法：采用結(jié)核分枝桿菌核酸測(cè)定試劑盒(上海之江技術(shù)有限公司)。堿裂解法提取核酸，40 μl反應(yīng)體系，核酸擴(kuò)增：37 ℃預(yù)熱2 min，94 ℃變性2 min，再40個(gè)循環(huán)，每個(gè)循環(huán)包括93 ℃變性15 s，60 ℃退火延伸1 min，在60 ℃單點(diǎn)取熒光，選用FAM熒光通道檢測(cè)。嚴(yán)格按說(shuō)明書判讀結(jié)果。核酸擴(kuò)增儀為安捷倫公司的MX3000P。

三、診斷標(biāo)準(zhǔn)

肺結(jié)核和肺外結(jié)核患者均符合《肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS288-2008)》和《肺結(jié)核門診診療規(guī)范(2012年版)》臨床診斷的標(biāo)準(zhǔn)。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 16.0軟件統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。用SPSS 16.0軟件繪制受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve, ROC曲線)，分別計(jì)算各個(gè)檢測(cè)技術(shù)的ROC曲線下的面積(area under the curve, AUC)，比較各種檢測(cè)方法的診斷價(jià)值。

結(jié) 果

一、四種TB檢測(cè)技術(shù)的陽(yáng)性檢出率和陽(yáng)性診斷率比較

2012年8月至2013年7月本院開展的IGRA-ELISA、TB-Ab法、Z-N法和熒光PCR法等4種TB檢測(cè)技術(shù)的送檢患者分別為827例、306例、324例和83例；IGRA-ELISA的陽(yáng)性檢出率為36.0% (298/827)，均高于TB-Ab法 (6.2%, 19/306)、Z-N法 (3.1%, 10/324)和熒光PCR法 (3.6%, 3/83)且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2值分別為98.6、128.9和35.8,P值均<0.001)；IGRA-ELISA的陽(yáng)性診斷率10.3% (85/827)，均高于TB-Ab法 (1.3%, 4/306)、Z-N法 (2.5%, 8/324)和熒光PCR法 (3.6%, 3/83), 且與TB-Ab法和Z-N法相比較其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2值分別為24.8和19.1，P值均<0.001)，而與熒光PCR法相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=3.8，P>0.05)(表2)。

二、四種檢測(cè)技術(shù)檢出TB的情況及臨床診斷指標(biāo)

根據(jù)病案給出的臨床診斷結(jié)果，判斷IGRA-ELISA、TB-Ab法、Z-N法及熒光PCR法各技術(shù)檢測(cè)結(jié)果：真陽(yáng)性、假陽(yáng)性、假陰性和真陰性，統(tǒng)計(jì)出4種檢測(cè)技術(shù)檢出TB的情況(表3)。根據(jù)這些數(shù)據(jù)計(jì)算出4種TB技術(shù)各自的敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值等臨床診斷指標(biāo)(表3)。IGRA-ELISA的敏感度為97.7%, 均高于TB-Ab法 (17.4%)、Z-N法 (28.6%) 和熒光PCR法 (25.0%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為76.0、65.4、56.4，P值均<0.001)；IGRA-ELISA的特異度為71.2%, 均低于TB-Ab法 (94.7%)、Z-N法 (99.3%)和熒光PCR法 (100.0%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2值分別為 65.1、101.6、27.7，P值均<0.001))；IGRA-ELISA的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為28.5%，均低于Z-N法 (80.0%)和熒光PCR法 (100.0%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2值分別為12.1、7.3，P值均<0.01)，高于TB-Ab法 (21.1%)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=0.5，P>0.05)；IGRA-ELISA的陰性預(yù)測(cè)值為99.6%，均高于TB-Ab法 (93.4%)、Z-N法 (93.6%)和熒光PCR法 (88.8%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2值分別為 28.9、27.8、46.3，P值均<0.001)。

表2 IGRA-ELISA與其他3種檢測(cè)技術(shù)的陽(yáng)性檢出率和陽(yáng)性診斷率比較

注a：陽(yáng)性檢出率=陽(yáng)性檢出患者/送檢例數(shù)×100%;b: 陽(yáng)性診斷率=陽(yáng)性診斷患者/送檢例數(shù)×100%;c：與TB-Ab法、Z-N法和熒光;PCR法分別比較，其χ2值分別為98.6、128.9、35.8，P值均<0.001；d：與TB-Ab法、Z-N法和熒光PCR法分別比較(χ2=24.8，P<0.001；χ2=19.1，P<0.001；χ2=3.8，P>0.05)

表3 IGRA-ELISA與其他3種檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)結(jié)核的情況及其臨床診斷評(píng)價(jià)指標(biāo)的比較

注 TB(+)：TB陽(yáng)性；TB(-)：TB陰性；TP：真陽(yáng)性；FP：假陽(yáng)性；TN：真陰性；FN：假陰性。a：與TB-Ab法、Z-N法和熒光PCR法相比較，χ2值分別為76.0、65.4和56.4，P值均<0.001。b：與TB-Ab法、Z-N法和熒光PCR法相比較，χ2值分別為65.1、101.6和27.7，P值均<0.001。c：與Z-N法和熒光PCR法相比較，χ2=12.1，P<0.001；χ2=7.3，P<0.01；與TB-Ab法相比較，χ2=0.5,P>0.05。d：與TB-Ab法、Z-N法和熒光PCR法相比較，χ2值分別為28.9、27.8和46.3,P值均<0.001

三、四種TB檢測(cè)技術(shù)對(duì)臨床診斷的支持作用

4種TB檢測(cè)技術(shù)得到的檢測(cè)結(jié)果對(duì)照由病案給出的臨床診斷結(jié)果繪制的ROC曲線見圖1，分別計(jì)算各個(gè)檢測(cè)技術(shù)的AUC并進(jìn)行比較(表4)。IGRA-ELISA、TB-Ab法、Z-N法和熒光PCR法的AUC分別為0.846、0.521、0.622和0.625。AUC表示診斷價(jià)值的大小，AUC在0.5～0.7時(shí)有較低準(zhǔn)確性，在0.7～0.9時(shí)有一定準(zhǔn)確性，在0.9以上時(shí)有較高的準(zhǔn)確性。IGRA-ELISA相比其他3種技術(shù)診斷價(jià)值較大，并且其P<0.001, 95%CI為0.815～0.877(表4)。

圖1 4種檢測(cè)技術(shù)診斷結(jié)核病敏感度與特異度的ROC曲線

檢測(cè)技術(shù)AUC標(biāo)準(zhǔn)誤P值a95%CIIGRA-ELISA0.8460.016<0.0010.815～0.877TB-Ab法0.5210.0570.7050.409～0.633Z-N法0.6220.0640.0330.497～0.746熒光PCR法0.6250.0990.1680.430～0.820

注 AUC:ROC曲線下的面積；a：曲線下面積=0.5為零假設(shè)

討 論

控制結(jié)核病需要快速診斷和及時(shí)治療活動(dòng)性TB患者，TB的實(shí)驗(yàn)室診斷是發(fā)現(xiàn)傳染源的主要途徑和手段。IGRA-ELISA是TB檢測(cè)免疫技術(shù)的重大突破，在本院開展時(shí)間不長(zhǎng)，較Z-N法、TB-Ab法和熒光PCR法檢測(cè)技術(shù)在臨床開展的時(shí)間短，本研究將IGRA-ELISA與這3種檢測(cè)技術(shù)在TB診斷中的價(jià)值進(jìn)行了比較分析。

一、IGRA-ELISA與其他3種檢測(cè)技術(shù)的TB輔助診斷價(jià)值比較

在本院的TB診斷中，IGRA較其他3種檢測(cè)技術(shù)有較高的敏感度(表3)，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值不高卻有較高的陽(yáng)性檢出率和陽(yáng)性診斷率(表2，3)，有專家建議IGRA-ELISA陽(yáng)性可作為肺結(jié)核的輔助診斷依據(jù)[6]，雖然其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值尚較低(表3)，很可能與該技術(shù)不能區(qū)分活動(dòng)性、陳舊性和潛伏感染肺結(jié)核(LTBI)有關(guān)，但足以引起臨床的重視，并增強(qiáng)排查和診斷結(jié)核的手段。本研究表明，該技術(shù)的使用提高了本院TB的陽(yáng)性診斷率。通過(guò)病案系統(tǒng)分析發(fā)現(xiàn)肺外結(jié)核的陽(yáng)性診斷患者增加較多，包括象骨科的骨結(jié)核、耳鼻喉科的喉結(jié)核和泌尿科的腎結(jié)核等肺外結(jié)核的陽(yáng)性診斷患者，這些科室送檢量雖不多，但因送檢的科室較多，導(dǎo)致送檢總量較多，從而輔助診斷的肺外結(jié)核患者也多；這些科室同時(shí)增加了肺外組織標(biāo)本的結(jié)核病病理診斷頻次；其次是呼吸科的肺結(jié)核患者的陽(yáng)性診斷，這些患者增加了送痰做Z-N法和熒光PCR法的次數(shù)，以及肺部病灶標(biāo)本的病理診斷(手術(shù)、纖維支氣管鏡檢查、肺穿刺等獲取的標(biāo)本)頻率。本研究顯示IGRA-ELISA特異度雖然最低，但陰性檢出總數(shù)最多且陰性預(yù)測(cè)值最高(表3)；如風(fēng)濕科因自身免疫性患者多，需接受抗腫瘤壞死因子-α(TNF-α)拮抗劑治療，治療前應(yīng)進(jìn)行LTBI篩查，需陰性排除診斷Mtb感染，該科室IGRA-ELISA送檢量最多,陰性排除診斷Mtb感染的患者也最多。本研究表明，IGRA-ELISA較其他3種技術(shù)診斷的AUC最大, 有相對(duì)較好的輔助診斷價(jià)值(圖1，表4)。

二、IGRA-ELISA有相對(duì)較好的TB輔助診斷價(jià)值

首先IGRA-ELISA用于診斷Mtb感染，其適應(yīng)證主要包括LTBI的診斷和活動(dòng)性結(jié)核病的輔助診斷，與診斷Mtb感染常用的結(jié)核菌素純蛋白衍生物皮膚試驗(yàn)(PPD)相比，都是以T細(xì)胞免疫為基礎(chǔ)的技術(shù)，但I(xiàn)GRA-ELISA與PPD試驗(yàn)相比較不受非結(jié)核分枝桿菌和卡介苗影響，特異度更高，依從性更好[7]。其次，IGRA具有良好的檢出率和敏感度：表3顯示其敏感度高、不容易漏診。受試者為TB患病率低(見表2)又合并其他疾病的患者，因此菌陰肺結(jié)核所占比例較高[8]，其開放性活動(dòng)性肺結(jié)核患者少，在缺乏細(xì)菌學(xué)依據(jù)時(shí)，IGRA-ELISA可發(fā)揮其輔助診斷的作用[6]，而Z-N法和熒光PCR法都需受試者標(biāo)本中有Mtb，TB-Ab法技術(shù)只對(duì)活動(dòng)性肺結(jié)核的診斷有參考價(jià)值。檢測(cè)的患者和各技術(shù)的特點(diǎn)決定了IGRA-ELISA比其他3種技術(shù)敏感度更高。4種技術(shù)中只有IGRA-ELISA能檢出LTBI，LTBI占Mtb感染的極大比率[8]，因此IGRA-ELISA陽(yáng)性檢出率最高，具備更好的診斷準(zhǔn)確性。影響敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值這些評(píng)價(jià)指標(biāo)的因素很多。本研究采用的IGRA-ELISA試劑盒，其敏感度和特異度與文獻(xiàn)報(bào)道不同：3篇文獻(xiàn)分別報(bào)道為88.64%和96.67%[9]，90.9%(肺結(jié)核患者)、78.3%(肺外結(jié)核患者)和76.9%[10]，95.54%和96.12%[11]；本研究為97.7%和71.2%。在衛(wèi)衛(wèi)等[12]的報(bào)道中，其敏感度對(duì)于肺結(jié)核患者、肺外結(jié)核患者及肺結(jié)核合并肺外結(jié)核患者分別為86.7%、66.7%和78.6%。與上述診斷指標(biāo)不同的是ROC曲線不受群體發(fā)病率的影響，是一種評(píng)價(jià)診斷試驗(yàn)全面準(zhǔn)確的有效方法，可用來(lái)比較兩種和兩種以上診斷試驗(yàn)的診斷價(jià)值。本研究通過(guò)ROC曲線及其AUC的比較表明IGRA-ELISA相比其他3種技術(shù)診斷價(jià)值最大(圖1，表4)。

三、本研究4種檢測(cè)技術(shù)的診斷潛力分析

縱觀本研究4種檢測(cè)技術(shù)，Z-N法陽(yáng)性預(yù)測(cè)值最高(表3)，是臨床發(fā)現(xiàn)傳染性肺結(jié)核患者主要的方法，該技術(shù)雖然操作步驟簡(jiǎn)單，但檢出率和敏感度低(表2，3)，不能區(qū)分是否為非結(jié)核分枝桿菌感染，較難診斷肺外結(jié)核；因抗酸染色陽(yáng)性標(biāo)本中約有12%為非結(jié)核分枝桿菌所致[13]，其陽(yáng)性結(jié)果如能結(jié)合熒光PCR法或IGRA-ELISA會(huì)更好；TB-Ab法陽(yáng)性檢出率和敏感度太低(表2，3)，因其敏感度、特異度受許多因素影響而波動(dòng)太大，世界衛(wèi)生組織強(qiáng)烈建議抗體檢測(cè)方法不要用于臨床診斷TB[14]；熒光PCR法技術(shù)雖然陽(yáng)性檢出率和敏感度低(表2，3)，但特異度和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值都很高(表3)，有助于活動(dòng)性肺結(jié)核的確診；IGRA-ELISA陽(yáng)性檢出率、陽(yáng)性診斷率和敏感度高(表1～3)，并且陰性預(yù)測(cè)值好(表3)，具有良好的臨床診斷價(jià)值，其陽(yáng)性預(yù)測(cè)作用還有待提高(表3)，是4種技術(shù)中相對(duì)有臨床診斷價(jià)值的技術(shù)，WHO已推薦其作為L(zhǎng)TBI檢測(cè)方法[15], 將在LTBI的診斷和活動(dòng)性結(jié)核病的輔助診斷中起重要作用。

本研究的不足之處，其臨床診斷結(jié)果的陰性患者是臨床綜合判斷所得未進(jìn)行隨訪確定，可能其中有陽(yáng)性患者。而陽(yáng)性診斷患者，其肺外結(jié)核多是通過(guò)病理學(xué)診斷和診斷性抗結(jié)核治療確診，無(wú)細(xì)菌學(xué)陽(yáng)性診斷患者；肺結(jié)核患者病案中痰培養(yǎng)陽(yáng)性或痰涂片陽(yáng)性患者不多，有細(xì)菌學(xué)證據(jù)確診患者較少，病理學(xué)診斷確診者居多。還有少數(shù)菌陰肺結(jié)核患者因無(wú)病理學(xué)證據(jù)，靠PCR陽(yáng)性、PPD強(qiáng)陽(yáng)性和診斷性抗結(jié)核藥物治療有效等手段綜合診斷，如按《肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS288-2008)》和《肺結(jié)核門診診療規(guī)范(2012年版)》的標(biāo)準(zhǔn)為臨床診斷患者，而按《肺結(jié)核診斷和治療指南》[16]則為確診患者，未進(jìn)行隨訪不排除誤診的可能。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)IGRA-ELISA技術(shù)較其他3種技術(shù)在本院的TB輔助診斷中有較高的敏感度，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值不高卻有較高的陽(yáng)性檢出率和陽(yáng)性診斷率；特異度較低而陰性預(yù)測(cè)值較高，故有較好的陰性排查能力；AUC較高，有相對(duì)較好的輔助診斷價(jià)值。

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(本文編輯：范永德)

Comparative study of the clinical diagnostic ability of interferon gamma release assays and three other detection techniques

ZHANG Gui，YUAN Liang，CAO Jing-jing，SUI Wen-jun，LU Xin-xin.

Department of Laboratory Medicine，Beijing Tongren Hospital，Capital Medical University，Beijing 100730，China

Corresponding autuor：LU Xin-xin, Email：tongrenjyk@126.com

Objective To compare the auxiliary diagnostic value of interferon gamma release assays (IGRA, IGRA-ELISA) for TB with TB antibody Colloidal gold rapid detection method (TB-Ab), Ziehl-Neelsen Staining (Z-N) and fluorescent probe PCR (fluorescent PCR) in Beijing Tongren hospital so as to make an objective evaluation of IGRA-ELISA detection technology. Methods A study was performed on 1228 TB cases (IGRA-ELISA: 827; TB-Ab: 306; Z-N: 324; fluorescent PCR: 83) from Beijing Tongren hospital from August 2012 to July 2013. Chi square tests were performed on the enumeration data using SPSS 16.0.P<0.05 was considered statistically significant. ROC (receiver operating characteristic) curves were drawn with SPSS 16.0 to calculate the area under the curve (AUC) by which auxiliary diagnostic values were compared. Results The positive rate of IGRA-ELISA (36.0%, 298/827), was significantly higher than that for TB-Ab (6.2%, 19/306), Z-N (3.1%, 10/324) and fluorescent PCR (3.6%, 3/83) (χ2=98.6, 128.9 and 35.8, respectively,P<0.001). The positive diagnostic rate of IGRA-ELISA (10.3%, 85/827) was higher than that for TB-Ab (1.3%, 4/306), Z-N (2.5%, 8/324) and fluorescent PCR (3.6%, 3/83). IGRA-ELISA was significantly different in the positive diagnostic rate from TB-Ab and Z-N (χ2=24.8 and 19.1, respectively,P<0.001) but not from fluorescent PCR (χ2=3.8,P>0.05). The sensitivity of IGRA-ELISA (97.7%, 85/87) was significantly higher than TB-Ab (17.4%, 4/23), Z-N (28.6%, 8/28) and fluorescent PCR (25.0%, 3/12) (χ2=76.0, 65.4 and 56.4, respectively,P<0.001). The specificity of IGRA-ELISA (71.2%, 527/740) was significantly lower than TB-Ab (94.7%, 268/283), Z-N (99.3%, 294/296) and fluorescent PCR (100.0%, 71/71) (χ2=65.1, 101.6 and 27.7, respectively,P<0.001). The positive predictive value of IGRA-ELISA (28.5%, 85/298) was significantly lower than that for Z-N (80.0%, 8/10) and fluorescent PCR (100.0%, 3/3) (χ2=12.1,P<0.001;χ2=7.3,P<0.01), but higher than that for TB-Ab (21.1%, 4/19), although this difference was not significant (χ2=0.5,P>0.05). The negative predictive value of IGRA-ELISA (99.6%, 527/529) was significantly higher than that for TB-Ab (93.4%, 268/287), Z-N (93.6%, 294/314) and fluorescent PCR (88.8%, 71/80) (χ2=28.9, 27.8 and 46.3, respectively,P<0.001). The AUC of IGRA-ELISA was 0.846 (P<0.001) and its 95% confidence interval was 0.815-0.877, which was larger than that of TB-Ab (0.521), Z-N (0.622) and fluorescent PCR (0.625). Conclusion IGRA-ELISA has greater auxiliary diagnostic value for TB in our hospital than the other three detection techniques evaluated because it has higher sensitivity and a higher positive rate and positive diagnostic rate in spite of its low positive predictive value, and it has a good negative exclusion for TB and a higher negative predictive value in spite of its low specificity and the largest AUC.

Interferon-gamma release assay； Enzyme-linked immunosorbent assay； Polymerase chain reaction； Tuberculosis/diagnosis； Comparative study

10.3969/j.issn.1000-6621.2015.12.008

100730 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京同仁醫(yī)院檢驗(yàn)科

魯辛辛，Email: tongrenjyk@126.com

2015-07-16)