李娟,黃楠
血常規(guī)及Hb電泳在孕期篩查地中海貧血的臨床價值分析
李娟,黃楠1
(重慶市南岸區(qū)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;1重慶市第五人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,中國重慶400000)
目的:探討產(chǎn)前篩查地中海貧血的臨床意義。方法:通過回顧性分析,對就診的2284例中孕期孕婦進行血常規(guī)、血紅蛋白電泳檢查進行地中海貧血篩查分析,對表型陽性的樣本進一步行地中海貧血基因檢測。結(jié)果:2284例孕婦中,地中海貧血篩查陽性的有139例(6.09%),經(jīng)基因檢測確診為地中海貧血的125例(5.60%),地中海貧血篩查的診斷符合率較高89.93%(125/ 139)。結(jié)論:地中海貧血基因檢測要求高,方法繁瑣,地中海貧血篩查方法簡單,診斷符合率較高,可用于基層醫(yī)院篩查地中海貧血。
地中海貧血曰篩查曰妊娠曰基因診斷
地中海貧血(簡稱地貧)是一類由于珠蛋白合成障礙而引起的遺傳性、慢性溶血性疾病。根據(jù)合成障礙的珠蛋白類型,地中海貧血主要分為α地中海貧血和β地中海貧血。據(jù)估計,全球約有1.7%的人是α地中海貧血或β地中海貧血基因攜帶者,每10 000出生活嬰就有4.4個地中海貧血患者[1],在我國主要是南方地區(qū)多見[2-3]。產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷是避免重型地中海貧血患兒出生的公認(rèn)優(yōu)生手段[4-5]。目前地中海貧血采用地中海貧血基因檢測明確診斷,但因其技術(shù)要求條件高,方法繁瑣,價格昂貴,尚不能應(yīng)用于各個醫(yī)院,特別是基層醫(yī)院[6]。本文通過檢查血常規(guī),主要包含平均紅細胞體積(MCV)、平均血紅蛋白量(MCH)、紅細胞分布寬度(RDW),和血紅蛋白電泳(Hb電泳)篩查孕婦地中海貧血情況,為基層醫(yī)院篩查地中海貧血提供依據(jù)。
1.1 臨床資料
選擇重慶市第五人民醫(yī)院、重慶市南岸區(qū)人民醫(yī)院2012年1月至2013年12月期間產(chǎn)科門診孕期產(chǎn)檢的孕婦2284人,均符合孕中期血常規(guī)檢查,漢族,單胎妊娠,年齡25~40歲,平均年齡(27 ±3.0)歲,孕周16~23周,平均孕周(17±2.4)周。1.2檢測方法
1.2.1 血常規(guī)檢測方法
應(yīng)用日本Sysmex XE 2100型全自動血細胞分析儀測定血常規(guī),主要包含MCV(正常參考值80~100 fl),MCH(正常參考值27~34 pg),RDW(正常參考值<15),Hb(正常參考值110~150 g/L),嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程進行檢測。
1.2.2 Hb電泳
應(yīng)用美國Waters BreezeTM2高效液相色譜儀系統(tǒng)進行采用高效液相色譜法(HPLC)對異常血紅蛋白帶進行分析。本實驗室正常參考值為成人HbA2 2.5%~3.5%,沒有異常Hb出現(xiàn)。若HbA 2<2.5 %,或出現(xiàn)異常Hb(HbH、Hb-Bart’s等),判為α地中海貧血表型陽性;若HbA 2>3.5%或HbF>2%,判為β地中海貧血表型陽性。
1.2.3 地中海貧血基因檢測
對地中海貧血表型陽性的孕婦,抽取外周靜脈血2 mL,按試劑盒操作說明提取基因組DNA,進一步做基因檢測以明確基因型。檢測方法:α地中海貧血采用跨越斷裂點PCR(Gap-PCR)技術(shù),β地中海貧血采用反向點雜交(RDB)技術(shù)進行基因分析[7]。
2.1 篩查結(jié)果
在篩查的2284例中期妊娠孕婦中,經(jīng)過血常規(guī)提示的MCV小于80 fl和(或)MCH小于27 pg和(或)RDW大于15的孕婦有139例(6.09%)。所有患者行血紅蛋白電泳實驗,血常規(guī)提示異常的139例樣本中有48例HbA 2<2.5%,擬診為α地中海貧血,陽性率為2.10%(48/2284),84例HbA 2>3.5%或HbF>2%,擬診為β地中海貧血,陽性率3.68(84/2284),7例HbA 2 2.5%~3.5%擬診為α復(fù)合β地中海貧血(α/β),陽性率0.31%(7/2284,見表1)。其余血常規(guī)正常的樣本HbA 2 2.5%~3.5%。
表1 地中海貧血篩查表
2.2 基因檢測結(jié)果
139例地中海貧血表型陽性的孕婦行地中海貧血基因檢測,125例確診為地中海貧血,診斷符合率89.93%。其中確診α地中海貧血41例,β地中海貧血80例,α復(fù)合β地中海貧血4例,篩查表型α/β的7例中有3例確診為α地中海貧血,125例地中海貧血孕婦的基因型分布見表2。β地中海貧血的診斷符合率最高,95.23%(80/84)。
表2 125例地中海貧血孕婦基因型分布情況
地中海貧血是一種在我國南方地區(qū)較為常見的遺傳性的單基因慢性溶血貧血疾病[8-9],若夫妻為同型地中海型貧血的帶因者,每次懷孕,其子女有1/4的機會為正常,1/2的機會為帶因者,另1/4的機會為重型地中海型貧血患者[10]。地中海貧血的最大危害來自于貧血,長期貧血會導(dǎo)致病人臟器功能減退,鐵吸收過量,還會導(dǎo)致心功能衰竭、肝脾腫大等[11-12],這些因素都會對孕婦、胎兒產(chǎn)生嚴(yán)重的影響[13];此病目前國內(nèi)外有效治療方法尚不明確,僅能依靠輸血維持生命,即使是進行造血干細胞移植[14],不單花費巨大,目前成功率也僅在70%左右。因此產(chǎn)前診斷防止重型地中海貧血患兒的出生是最佳干預(yù)手段[15-16]。
本研究結(jié)果顯示本地區(qū)地中海貧血的發(fā)生率為5.6%,β地中海貧血的發(fā)生率高于α地中海貧血,這與包碧惠[17]王莉[18]等報道的本地地中海貧血發(fā)病率一致。α地中海貧血中基因型以--SEA/αα最多,其次是-α3.7/αα,β地中海貧血的突變類型以IVS-Ⅱ-654/ N最多,其次是CD17/N,這可能跟地域差異有關(guān)。
本研究結(jié)果顯示血常規(guī)及血紅蛋白電泳實驗篩查地中海貧血139例,經(jīng)過地中海貧血基因檢測確診125例,診斷符合率89.93%;β地中海貧血的診斷符合率最高,95.23%;α地中海貧血診斷符合率85.42%。地中海貧血的實驗室診斷分為常規(guī)篩查和基因診斷兩大類。地中海貧血基因診斷是地中海貧血診斷的金標(biāo)準(zhǔn)[19-20],但要求條件高,方法繁瑣,價格昂貴,基層醫(yī)院很難開展。本文結(jié)合血常規(guī)及血紅蛋白電泳分析,達到綜合篩查。篩查出的陽性病人,可以初步區(qū)分地中海貧血型別,一方面可用于遺傳咨詢指導(dǎo)產(chǎn)前診斷;另一方面,可根據(jù)基因型預(yù)測家族成員的地中海貧血發(fā)病風(fēng)險,指導(dǎo)婚育。因此血常規(guī)結(jié)合血紅蛋白電泳可以提高地中海貧血篩查診斷符合率,降低假陰性,是一種經(jīng)濟有效的篩查方法,有利于基層醫(yī)院大規(guī)模篩查的推廣。
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(2014-11-20收稿)
Clinical significance of blood routine test and Hb electrophoresis in prenatal screening of thalassemia
Li Juan,Huang Nan1
Departmentof Gynaecology and Obstetrics,People’s Hospitalof Nanan District,1Departmentof Gynaecology and Obstetrics,the Fifth People’s Hospitalof Chongqing City
Objective:To investigate the clinical significance of prenatal screening of thalassemia.Methods:2284 cases of pregnant women in the second trimester,screened for thalassemia phenotype through blood routine test and hemoglobin electrophoresis were retrospectively analyzed,and the positive samples were further detected for thalassemia gene.Results:In 2284 cases ofpregnant women,139 cases ware positive(6.09%),and 125 cases were confirmed by thalassemia gene detection(5.60%).The diagnosis rate of screening of thalassemia was higher,89.93%(125/139).Conclusions:Thalassemia gene detection is expensive and complicated,while the screening method is more simple,and the rate of diagnosis is relatively high.Therefore,it can be used in basic hospital.
Thalassemia;Screening;Pregnancy;Gene diagnosis
R556
A
10.3969/j.issn.1000-2669.2015.03.012
李娟(1971—),女,副主任醫(yī)師。E-mail:cqwylj@sina.com