王江玲，陳思思，唐杰，王思璐，萬(wàn)麗，黃引平△

(溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院1產(chǎn)科，2外科實(shí)驗(yàn)室，3病理科，浙江 溫州 325000)

子癇前期患者胎盤(pán)組織中visfatin蛋白與mRNA表達(dá)及意義*

王江玲1，陳思思1，唐杰1，王思璐2，萬(wàn)麗3，黃引平1△

(溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院1產(chǎn)科，2外科實(shí)驗(yàn)室，3病理科，浙江 溫州 325000)

目的:探討內(nèi)脂素(visfatin，VF)在子癇前期(PE)患者胎盤(pán)組織中的表達(dá)及意義。方法:選擇2011年8月至2013年12月在溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院分娩的孕婦共計(jì)100例，根據(jù)病情輕重分為重度PE組、輕度PE組和正常妊娠組。采用蘇木素－伊紅染色法觀察3組胎盤(pán)組織病理變化;免疫組化法及real－time PCR技術(shù)分別檢測(cè)3組胎盤(pán)VF蛋白及mRNA的表達(dá)并分析其與子癇前期發(fā)病的關(guān)系。結(jié)果:PE的病理改變主要表現(xiàn)為細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞及合體滋養(yǎng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂且形態(tài)不完整;細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞增生，合體滋養(yǎng)細(xì)胞結(jié)節(jié)增多;絨毛毛細(xì)血管減少、淤血。免疫組化及real－time PCR結(jié)果顯示胎盤(pán)組織中內(nèi)脂素定位于合體及細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞的胞漿，隨著病情的加重，VF蛋白及mRNA表達(dá)量逐漸升高，重度PE組明顯高于正常妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論:PE患者存在絨毛血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和功能紊亂。胎盤(pán)VF蛋白及mRNA在PE孕婦中高表達(dá)，表明VF與PE的發(fā)生具有一定關(guān)系。

子癇前期;胎盤(pán);內(nèi)脂素;血管內(nèi)皮損傷

子癇前期(preeclampsia，PE)是妊娠中晚期特有的并發(fā)癥，臨床上以高血壓、蛋白尿?yàn)橹饕卣?，是造成孕產(chǎn)婦、圍生兒死亡的主要原因之一［1］。子癇前期的病因及發(fā)病機(jī)制尚未明確，目前研究認(rèn)為代謝綜合征、低齡、初產(chǎn)婦、多胎妊娠、易栓癥等是子癇前期的重要危險(xiǎn)因素;同時(shí)，胎盤(pán)絨毛淺著床、血管內(nèi)皮損傷、氧化應(yīng)激、免疫學(xué)因素、遺傳因素等在子癇前期發(fā)生發(fā)展中起著重要作用［2］。內(nèi)脂素(visfatin，VF)是新近發(fā)現(xiàn)的一種脂肪細(xì)胞因子，具有增加胰島素敏感性、參與炎癥反應(yīng)及促進(jìn)血管生成等作用［3］，因此我們推測(cè)內(nèi)脂素可能與子癇前期發(fā)生存在一定的關(guān)聯(lián)。本研究旨在通過(guò)檢測(cè)子癇前期患者胎盤(pán)VF蛋白與mRNA的表達(dá)來(lái)探討內(nèi)脂素與子癇前期的發(fā)病關(guān)系。

資料和方法

1 資料

1.1 子癇前期診斷標(biāo)準(zhǔn)參照樂(lè)杰［1］主編的第7版《婦產(chǎn)科學(xué)》的定義，輕度子癇前期為妊娠20周以后出現(xiàn)BP≥140/90 mmHg，尿蛋白≥0.3 g/24 h或隨機(jī)尿蛋白(+);重度子癇前期為妊娠20周以后出現(xiàn)BP≥160/110 mmHg;尿蛋白≥2.0 g/24 h或隨機(jī)尿蛋白≥(++)。所有孕婦排除慢性高血壓病、妊娠期糖尿病、慢性腎炎、腫瘤等疾病。

1.2 研究對(duì)象及分組選擇2011年8月至2013年12月在我院定期產(chǎn)檢和住院分娩的孕婦共計(jì)100例，根據(jù)病情輕重分為:輕度子癇前期孕婦30例(均為足月妊娠，其中初產(chǎn)婦16例、經(jīng)產(chǎn)婦14例);重度子癇前期孕婦30例(其中足月妊娠8例——重度子癇前期足月組、未足月妊娠22例——重度子癇前期未足月組;初產(chǎn)婦19例、經(jīng)產(chǎn)婦11例)，另選取同期正常妊娠孕婦40例(均為足月妊娠，其中初產(chǎn)婦22例、經(jīng)產(chǎn)婦18例)。

該實(shí)驗(yàn)獲得溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)及研究對(duì)象的知情同意。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 主要試劑及設(shè)備兔抗人內(nèi)脂素單克隆抗體(上海微蒙生物科技有限公司);免疫組化試劑盒(上海博谷生物科技有限公司);Trizol總RNA提取試劑盒(Life Technologies);反轉(zhuǎn)錄試劑盒(東洋紡生物科技有限公司);real－time PCR相關(guān)試劑盒(TaKaRa); Leica顯微鏡DM4000B(Leica);梯度PCR儀，定量PCR儀7500(Life Technologies);引物由上海捷瑞生物工程有限公司合成，序列見(jiàn)表1。

表1 引物序列Table 1.The sequences of primers for real－time PCR

2.2 標(biāo)本采集及處理所有孕婦胎盤(pán)娩出后5 min內(nèi)于臍帶周?chē)阁w面縱向切取胎盤(pán)2塊(約1.0 cm ×1.0 cm×1.0 cm，避開(kāi)明顯纖維化、鈣化區(qū))，無(wú)菌生理鹽水反復(fù)沖洗，濾紙吸干。1塊放入10%多聚甲醛中固定24 h，石蠟包埋、連續(xù)切片，厚度4 μm;另1塊胎盤(pán)放入無(wú)菌去酶凍存管中，放置于液氮中速凍24 h，取出并放于－80℃低溫冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.3 蘇木素－伊紅(HE)染色法觀察胎盤(pán)病理變化

嚴(yán)格按照步驟做常規(guī)HE染色，高倍鏡下(×100)下觀察胎盤(pán)絨毛結(jié)構(gòu)及絨毛間毛細(xì)血管形態(tài)。

2.4 免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)胎盤(pán)內(nèi)脂素蛋白表達(dá)采用鏈霉素抗生物素蛋白－過(guò)氧化酶(SP)法，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作。胎盤(pán)絨毛合體或細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒判定為陽(yáng)性細(xì)胞。每例隨機(jī)選用1張切片，高倍鏡下(×400)隨機(jī)選擇5個(gè)視野，Image－Pro Plus 6.0(IPP 6.0)專(zhuān)業(yè)圖像分析軟件測(cè)定每張圖片積分吸光度值(integral absorbance，IA)并取其平均值作為該標(biāo)本內(nèi)脂素蛋白相對(duì)表達(dá)量。用磷酸鹽緩沖液代替兔抗人內(nèi)脂素單克隆抗體作為陰性對(duì)照，以小鼠內(nèi)臟脂肪切片代替胎盤(pán)組織切片作為陽(yáng)性對(duì)照。

2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)胎盤(pán)內(nèi)脂素mRNA表達(dá)嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)用Trizol總RNA提取試劑盒提取胎盤(pán)RNA，加入30 mL DEPC水溶解，RNA放置于－80℃冰箱儲(chǔ)存。測(cè)定260、280 nm處的吸光度，取A260/A280比值在1.8～2.2之間的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。按下法反轉(zhuǎn)錄cDNA:RNA 1.0 μL，65℃變性5 min后迅速放于冰上降溫，加入5×RT buffer 2.0μL，Enzyme Mix 0.5 μL，Primer Mix 0.5 μL，Nucleasefree水6.0 μL混勻，42℃20 min，98℃5 min逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，加DEPC水稀釋3倍。熒光定量PCR:每孔加入SYBR Premix Ex TaqTMII(2×)5.0 μL，PCR Forward Primer(1 μmol/L)0.5 μL，PCR Reverse Primer(1 μmol/L)0.5 μL，cDNA模板2.0 μL，Nuclease－free水2.0 μL混勻，放置于定量PCR儀7500中。反應(yīng)條件為:95℃3 min;95℃15 s，62℃1 min，72℃30 s，40個(gè)循環(huán);72℃5 min。用2－ΔΔCt計(jì)算內(nèi)脂素mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，比較前先進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn)。兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，多組間均數(shù)兩兩比較采用LSD法。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1 3組臨床資料的比較

3組孕婦的孕次、產(chǎn)次、年齡和孕早期體重指數(shù)無(wú)明顯差異，重度PE組收縮壓和舒張壓高于其它2組(P＜0.05)，分娩孕周和新生兒體重低于其它2組(P＜0.05);輕度PE組收縮壓高于正常組(P＜0.05)，舒張壓、分娩孕周和新生兒體重與正常組無(wú)明顯差異，見(jiàn)表2。

表2 3組臨床資料比較Table 2.The comparison of the clinical data(Mean±SD)

2 產(chǎn)婦胎盤(pán)HE染色病理學(xué)的改變

正常妊娠組胎盤(pán)絨毛中滋養(yǎng)層細(xì)胞以合體滋養(yǎng)層細(xì)胞為主，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞及合體滋養(yǎng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰且形態(tài)完整。重度子癇前期組胎盤(pán)絨毛大部分不成熟、絨毛間質(zhì)損傷，細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞及合體滋養(yǎng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂且形態(tài)不完整，細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞增生明顯，合體滋養(yǎng)層細(xì)胞結(jié)節(jié)增多，絨毛毛細(xì)血管減少、淤血。輕度子癇前期組細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞及合體滋養(yǎng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)欠清晰，形態(tài)欠完整，少數(shù)絨毛存在毛細(xì)血管減少及淤血，見(jiàn)圖1。

Figure 1.The HE staining of placenta tissues in each group under light microscope(×100).A:severe PE group，intense capillary vascular gore(arrow head);B:mild PE group，weak villous capillary gore(arrow head);C:normal pregnancy group，no villous capillary gore.圖1 3組胎盤(pán)組織HE染色

3 VF蛋白免疫組織化學(xué)的結(jié)果分析

3組胎盤(pán)組織絨毛合體及細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)均可見(jiàn)內(nèi)脂素蛋白的陽(yáng)性表達(dá)，陰性對(duì)照未見(jiàn)內(nèi)脂素蛋白的陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性對(duì)照大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)內(nèi)脂素蛋白的陽(yáng)性表達(dá)，見(jiàn)圖2。隨著子癇前期程度的加重，VF蛋白相對(duì)表達(dá)量也隨之升高，正常妊娠組的IA為76 921±48 538，輕度PE組IA為99 342±30 335，重度PE組IA為140 641±69 365，單因素方差分析示尚不能認(rèn)為3組胎盤(pán)內(nèi)脂素蛋白含量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。兩兩比較顯示重度PE組胎盤(pán)的VF蛋白表達(dá)量明顯高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);輕度PE組胎盤(pán)的VF蛋白表達(dá)量與正常組無(wú)明顯差異;重度PE組胎盤(pán)的VF蛋白表達(dá)量與輕度PE組無(wú)明顯差異，見(jiàn)圖3。在重度PE組中，足月患者的IA為155 570±79 063，未足月患者的IA為135 212±50 174，二者比較無(wú)明顯差異。

Figure 2.The immunohistochemical staining of visfatin in placenta(×400).A:severe PE group，showed intense visfatin immunostaining in cytotrophoblast and syncytiotrophoblast cells(arrow head);B:mild PE group，showed moderate visfatin immunostaining in cytotrophoblast and syncytiotrophoblast cells(arrow head);C:normal pregnancy group，showed weak visfatin immunostaining in cytotrophoblast and syncytiotrophoblast cells(arrow head);D:negative control，no primary antibody，showed no visfatin immunostaining;E:positive control，showed intense visfatin immunostaining in visceral adipose cells (arrow head).圖2 胎盤(pán)內(nèi)脂素蛋白表達(dá)

Figure 3.The protein expression of visfatin in the placenta of patients with preeclampsia determined by immunohistochemistry.The data were expressed as IA(integral absorbance).Mean±SD.n=6.*P＜0.05 vs normal pregnancy group.圖3 3組內(nèi)脂素蛋白的相對(duì)表達(dá)量

4 3組產(chǎn)婦胎盤(pán)VF mRNA表達(dá)水平的比較

3組孕婦胎盤(pán)均表達(dá)內(nèi)脂素mRNA。經(jīng)2－ΔΔCt法計(jì)算得，正常妊娠組mRNA相對(duì)表達(dá)量為1.06± 0.37，輕度PE組為1.70±0.91，重度PE組為2.53 ±1.21，單因素方差分析提示尚不能認(rèn)為3組內(nèi)脂素mRNA表達(dá)量存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。兩兩比較顯示重度PE組內(nèi)脂素的mRNA表達(dá)水平明顯高于正常妊娠組(P＜0.05);輕度PE組內(nèi)脂素的mRNA表達(dá)水平與正常妊娠組無(wú)明顯差異;重度PE組與輕度PE組內(nèi)脂素的mRNA表達(dá)水平無(wú)明顯差異，見(jiàn)圖4。在重度PE組中，足月患者的VF mRNA表達(dá)量為3.09±1.93，未足月妊娠患者的VF mRNA表達(dá)量為2.15±0.75，二者比較無(wú)明顯差異。

Figure 4.The mRNA expression of visfatin in the placenta of patients with preeclampsia determined by real－time PCR.The data were expressed relative to GAPDH expression.Mean±SD.n=6.*P＜0.05 vs normal pregnancy group.圖4 3組內(nèi)脂素mRNA的相對(duì)表達(dá)量

討論

1 血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和功能紊亂在子癇前期中的作用

子癇前期是妊娠期特有的疾病，目前我國(guó)發(fā)病率為3%～5%。其主要臨床表現(xiàn)為高血壓、蛋白尿、水腫，基本病理變化是全身小血管痙攣［1］。多數(shù)病例終止妊娠、胎盤(pán)娩出后臨床癥狀逐漸緩解或消失，表明子癇前期的病因在胎盤(pán)。既往研究認(rèn)為子癇前期的發(fā)病機(jī)制為胎盤(pán)淺著床、氧化應(yīng)激、血管緊張素II受體－1自身抗體形成、血小板和凝血酶原活化、血管內(nèi)炎癥、內(nèi)皮細(xì)胞損傷及功能紊亂，其中血管生成失衡被認(rèn)為是最重要的原因［4］。本研究通過(guò)對(duì)胎盤(pán)進(jìn)行HE染色觀察證實(shí):正常妊娠孕婦絨毛結(jié)構(gòu)清晰完整，絨毛毛細(xì)血管未有損傷、淤血;隨著子癇前期的發(fā)展，絨毛結(jié)構(gòu)逐漸破壞，同時(shí)絨毛毛細(xì)血管損傷、淤血也逐漸加重。以上結(jié)果表明絨毛血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和功能紊亂是子癇前期的重要病因，同時(shí)也是判斷子癇前期嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)。

2 內(nèi)脂素的高表達(dá)與子癇前期的相關(guān)性

脂肪組織不只是能量?jī)?chǔ)存器官，還是一個(gè)真正的內(nèi)分泌器官，它可以分泌一系列生物活性因子，包括細(xì)胞因子及趨化因子類(lèi)(腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素、單核趨化蛋白1等)，血管活性因子及凝血因子類(lèi)(血管緊張肽、纖維酶原激活物抑制劑等)，特異性脂肪因子類(lèi)(瘦素、脂聯(lián)素、內(nèi)脂素、抵抗素等)［5－7］。內(nèi)脂素是日本學(xué)者Fukuhara等［3］于2005年發(fā)現(xiàn)的一種新型脂肪因子，蛋白質(zhì)由473個(gè)氨基酸殘基組成，相對(duì)分子質(zhì)量約為5.2 kD，基因位于7號(hào)染色體q22.1和q31.33之間，長(zhǎng)37.4堿基對(duì)，包含10個(gè)內(nèi)含子和11個(gè)外顯子。既往研究認(rèn)為內(nèi)脂素在多種疾病中發(fā)揮重要作用:2型糖尿病和肥胖癥患者中血清內(nèi)脂素與胰島素抵抗、慢性系統(tǒng)性炎癥、心血管疾病、內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂密切相關(guān)［8］;抑制內(nèi)脂素生成可減少主動(dòng)脈粥樣硬化病灶形成并且減輕內(nèi)皮細(xì)胞損傷［9］;腎透析患者血清內(nèi)脂素與高敏感性C反應(yīng)蛋白(血管死亡和動(dòng)脈硬化的敏感指標(biāo))相關(guān)［10］;多囊卵巢綜合癥患者血清內(nèi)脂素與血管功能紊亂有關(guān)［11］。以上研究表明內(nèi)脂素可能作為生物性標(biāo)志參與慢性炎癥反應(yīng)及血管功能紊亂。妊娠所引發(fā)的機(jī)體適應(yīng)性反應(yīng)稱(chēng)為亞炎癥狀態(tài)［12］，此時(shí)婦女血清內(nèi)脂素水平高于未孕同齡婦女［13］，血清VF在中期妊娠期間達(dá)到巔峰，隨后稍有下降并在晚期妊娠期間保持相對(duì)穩(wěn)定［14］。內(nèi)脂素等炎癥因子的微小變化可能打破妊娠亞炎癥平衡從而誘導(dǎo)子癇前期等妊娠期并發(fā)癥。子癇前期患者存在血清內(nèi)脂素的改變目前已經(jīng)得到廣泛認(rèn)可［15－17］，然而胎盤(pán)作為子癇前期的病因是否也存在內(nèi)脂素水平的改變目前還存在爭(zhēng)議?，F(xiàn)研究認(rèn)為，胎盤(pán)VF水平與血清VF濃度無(wú)明顯相關(guān)性，這可能是因?yàn)閂F并非是一種分泌性蛋白，其主要在局部通過(guò)旁分泌、自分泌的方式發(fā)揮作用［13］。本研究通過(guò)免疫組化法及real－time PCR技術(shù)檢測(cè)胎盤(pán)VF蛋白及mRNA表達(dá)證實(shí):正常妊娠孕婦及子癇前期孕婦胎盤(pán)均有內(nèi)脂素蛋白及mRNA的表達(dá)，隨著子癇前期程度的加重，胎盤(pán)VF蛋白及mRNA相對(duì)表達(dá)量逐漸升高。重度子癇前期組VF蛋白及mRNA均明顯高于正常妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但是，重度子癇前期組中足月患者與未足月患者的胎盤(pán)VF蛋白及mRNA表達(dá)無(wú)明顯差異。以上結(jié)果顯示:晚期妊娠期間胎盤(pán)VF蛋白及mRNA含量保持相對(duì)穩(wěn)定，可以認(rèn)為此期間孕周對(duì)VF蛋白及mRNA含量影響不大;內(nèi)脂素在子癇前期的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用，并且可以作為判斷子癇前期發(fā)展程度的重要炎癥性指標(biāo)。既往研究認(rèn)為，內(nèi)脂素與前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子同源，B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子可以調(diào)控B細(xì)胞分化成熟、調(diào)控細(xì)胞周期、延緩中性粒細(xì)胞凋亡從而參與炎癥、免疫應(yīng)答及血管生成［18］;通過(guò)上調(diào)血栓素合成酶合成促進(jìn)白細(xì)胞介素－8合成［19］;通過(guò)mTOR信號(hào)通路增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞低氧誘導(dǎo)因子－1、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)［20］;通過(guò)NF－κB信號(hào)通路促進(jìn)MMP－2、MMP－9和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)［21］。內(nèi)脂素通過(guò)以上方式參與血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和血管的形成，導(dǎo)致血管生成紊亂。本研究發(fā)現(xiàn)隨著子癇前期程度的加重，胎盤(pán)VF蛋白及mRNA含量逐漸升高，這和絨毛毛細(xì)血管損傷、淤血保持一致趨勢(shì)，在一定程度上說(shuō)明內(nèi)脂素促使內(nèi)皮細(xì)胞損傷和功能紊亂而誘發(fā)子癇前期的可能。與此同時(shí)，本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)輕度PE組與其它2組產(chǎn)婦胎盤(pán)VF蛋白及mRNA表達(dá)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但表達(dá)量按正常組、輕度PE組和重度PE組呈階梯上升趨勢(shì)，推測(cè)有可能是VF升高需達(dá)一定閾值后才會(huì)出現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞損傷和功能紊亂，導(dǎo)致子癇前期的發(fā)生?？傊ケP(pán)VF蛋白及mRNA表達(dá)在子癇前期孕婦中是明顯升高的，其與子癇前期的發(fā)生具有相關(guān)性，但其具體作用機(jī)制尚有待大樣本進(jìn)一步研究。

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Protein and mRNA expression of visfatin in placenta of patients with preeclampsia

WANG Jiang－ling1，CHEN Si－si1，TANG Jie1，WANG Si－lu2，WAN Li3，HUANG Yinping1

(1Department of Obstetrics，2Surgical Laboratory，3Department of Pathology，The First Affiliated Hospital，Wenzhou Medical University，Wenzhou 325000，China.E-mail:yphuangy@126.com)

AIM:To investigate the expression of visfatin in the placenta of patients with preeclampsia and its significance.METHODS:The pregnant women(n=100)were divided into normal pregnancy group，mild preeclampsia group and severe preeclampsia group according to the severity of the disease.The pathological changes of the placenta were observed by hematoxylin－eosin staining.The expression of visfatin at mRNA and protein levels in the placenta was detected by real－time PCR and immunohistochemistry respectively.RESULTS:Compared with normal pregnancy group，the pathological changes of the placenta in preeclampsia groups was significant，showing that the structure and the form were disordered and incompleted in both cytotrophoblasts and syncytiotrophoblasts.The proliferation of cytotrophoblasts and the numbers of the placental villi with syncytial knots were observed.The vascular numbers of villi were decreased and congested.The results of immunohistochemistry and real－time PCR showed that the visfatin protein was observed in the cytoplasm of cytotrophoblasts and syncytiotrophoblasts among 3 groups.The expression of visfatin at mRNA and protein levels was increased with the severity of the preeclampsia.CONCLUSION:The injury and dysfunction of vascular endothelial cells in the villi exist in the patients with preeclampsia.High expression of visfatin at mRNA and protein levels in placenta of the patients with preeclampsia indicates that visfatin is closely related to preeclampsia.

Preeclampsia;Placenta;Visfatin;Endothelial cell injury

R714.24+4

A

10.3969/j.issn.1000－4718.2015.02.026

1000－4718(2015)02－337－06

2014－09－29

2014－12－05

溫州市科技局資助項(xiàng)目(No.Y20110256)

△通訊作者Tel:0577－88069304;E－mail:yphuangy@126.com