車輝娟，康欽炯，胡宏章

(1 四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科，四川 成都 610041； 2 都江堰市醫(yī)療中心檢驗(yàn)科)

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·論著·

新型血液分析儀檢測(cè)腦脊液及胸腹腔積液常規(guī)的評(píng)價(jià)

車輝娟1，康欽炯2，胡宏章1

(1 四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科，四川 成都 610041； 2 都江堰市醫(yī)療中心檢驗(yàn)科)

目的 對(duì)Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀在腦脊液及胸腹腔積液常規(guī)檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)。方法 取99份腦脊液及胸腹腔積液標(biāo)本，在Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀上應(yīng)用體液模式進(jìn)行檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果與手工法計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果 儀器檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的CV值分別為3.04%、0.77%，攜帶污染率分別為0.04%、0.01%，線性相關(guān)系數(shù)分別為0.999、1.000，均符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。儀器檢測(cè)腦脊液和胸腹腔積液的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、單個(gè)核細(xì)胞、多個(gè)核細(xì)胞與傳統(tǒng)手工方法檢測(cè)結(jié)果有高度的相關(guān)性(r=0.84～0.91，P<0.05、0.01)。結(jié)論 Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀的體液模式能夠滿足臨床檢驗(yàn)的需求，與手工方法結(jié)果相關(guān)性良好，在臨床體液細(xì)胞檢測(cè)中具有很高的應(yīng)用價(jià)值。

血液分析儀；體液；血細(xì)胞計(jì)數(shù)；評(píng)價(jià)研究

體液的顯微鏡檢查一直是白細(xì)胞計(jì)數(shù)分類的金標(biāo)準(zhǔn)。但是使用顯微鏡評(píng)價(jià)體液存在如下一些問題：較低的精密度；檢測(cè)方法及過程費(fèi)時(shí)費(fèi)力；實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告時(shí)間較長；由于受到檢測(cè)者經(jīng)驗(yàn)和技術(shù)差異的影響，檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性較差，需要有豐富個(gè)人經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)，以免影響結(jié)果[1]。而以上這些問題可以通過使用日本Sysmex 公司生產(chǎn)的新一代Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀來解決。隨著熒光染色技術(shù)及高性能全自動(dòng)分析儀的發(fā)展，用Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀提供的體液檢測(cè)模式不僅可以檢測(cè)體液白細(xì)胞數(shù)及分類，還可以檢測(cè)一些其他的研究參數(shù)。本文對(duì)Sysmex XE-5000 全自動(dòng)血液分析儀的體液檢測(cè)功能進(jìn)行了全面的評(píng)價(jià)，以探討其在臨床體液細(xì)胞常規(guī)檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值，為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來源 本文99份胸腹腔積液及腦脊液標(biāo)本來自四川大學(xué)華西醫(yī)院上錦院區(qū)門診和住院病人送檢標(biāo)本。其中腦脊液標(biāo)本64份，胸腹腔積液標(biāo)本35份。所有標(biāo)本由臨床醫(yī)師按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范采集，用EDTA-K2抗凝管收集后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)及時(shí)送檢[2]。

1.1.2 儀器及試劑 日本Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀及其配套試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品、奧林巴斯光學(xué)校準(zhǔn)品、改良牛鮑計(jì)數(shù)板、冰醋酸溶液。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 儀器法 嚴(yán)格按照Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀說明書進(jìn)行檢測(cè)，儀器定期校準(zhǔn)保養(yǎng)，室內(nèi)質(zhì)控各項(xiàng)參數(shù)在允許范圍內(nèi)。

1.2.2 手工法 嚴(yán)格按照第3版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[3]要求，采用改良牛鮑計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)腦脊液及胸腹腔積液中總細(xì)胞數(shù)及有核細(xì)胞數(shù)，計(jì)算標(biāo)本中紅細(xì)胞及白細(xì)胞數(shù)，并用冰醋酸溶液處理標(biāo)本，進(jìn)行有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。

1.3 方法學(xué)評(píng)價(jià)

1.3.1 重復(fù)性 根據(jù)NCCLS/CLSI EP5-A2文件，取低、高兩個(gè)水平的體液樣本，連續(xù)重復(fù)測(cè)定10次，計(jì)算變異系數(shù)(CV)。

1.3.2 攜帶污染率 根據(jù)NCCLS/CLSI-H26-A2文件，取高濃度體液樣本，混合均勻后連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度體液樣本，連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為L1、L2、L3。計(jì)算攜帶污染率，攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%。

1.3.3 線性 根據(jù)NCCLS EP6-A文件選取一份接近預(yù)期上限的高值體液樣本，分別按照50.000%、25.000%、12.500%、6.250%、3.125%、1.560%的比例進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算均值。將實(shí)測(cè)值與理論值作比較(偏離應(yīng)小于10%)，驗(yàn)證線性范圍。

1.3.4 低值線性 將臨床認(rèn)為結(jié)果較低的標(biāo)本進(jìn)行比例稀釋，使其最高稀釋倍數(shù)理論結(jié)果接近儀器檢測(cè)下限，并按照1.3.3的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證儀器在低值水平的線性范圍。

2 結(jié) 果

2.1 性能參數(shù)

全自動(dòng)血液分析儀體液模式檢測(cè)的白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC-BF)和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC-BF)的CV值分別為3.04%和0.77%，攜帶污染率分別為0.04%和0.01%，均低于儀器說明書標(biāo)識(shí)的臨界值。儀器檢測(cè)線性及低值線性均表現(xiàn)良好，見表1、2。

表1 血液分析儀體液模式線性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 血液分析儀體液模式低值線性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2 儀器與手工法檢測(cè)相關(guān)性分析

全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)腦脊液和胸腹腔積液中的WBC-BF、RBC-BF、單個(gè)核細(xì)胞(MN)、多個(gè)核細(xì)胞(PMN)與傳統(tǒng)手工方法的檢測(cè)結(jié)果均呈正相關(guān)(r=0.84～0.91，P<0.05、0.01)。見表3、4。

表3 血液分析儀檢測(cè)腦脊液各參數(shù)與手工法檢測(cè)相關(guān)性

表4 血液分析儀檢測(cè)胸腹腔積液各參數(shù)與手工法檢測(cè)相關(guān)性

3 討 論

體液標(biāo)本的常規(guī)檢查對(duì)各種體液標(biāo)本性質(zhì)的初步判斷起到至關(guān)重要的作用。長期以來，體液標(biāo)本中的紅細(xì)胞和白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類一直依賴于人工鏡檢，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，計(jì)數(shù)誤差大且重復(fù)性差，無法進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，不利于臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制工作的統(tǒng)一管理。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步及對(duì)臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量要求的不斷提高，實(shí)現(xiàn)體液標(biāo)本的自動(dòng)化檢測(cè)必然是今后的發(fā)展方向。近年來，有人將血液分析儀及尿沉渣自動(dòng)分析儀應(yīng)用于體液標(biāo)本的檢測(cè)，但由于儀器設(shè)計(jì)原因，血液分析儀數(shù)量級(jí)達(dá)不到體液分析要求，尿沉渣分析儀不能對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)數(shù)，限制了其在體液標(biāo)本檢測(cè)中的應(yīng)用[4]。

Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀體液通道(核酸熒光染色流式細(xì)胞法)功能的問世解決了單純通過顯微鏡人工計(jì)數(shù)及從形態(tài)上鑒定細(xì)胞性質(zhì)這一難題，通過體液通道可直接對(duì)各種體液標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了體液標(biāo)本檢測(cè)的自動(dòng)化。本研究對(duì)該儀器體液模式進(jìn)行了全面的評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示，體液白細(xì)胞、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的重復(fù)性、攜帶污染率及線性均表現(xiàn)良好，與人工鏡檢結(jié)果呈顯著正相關(guān)。值得一提的是，本研究特意增加了對(duì)儀器檢測(cè)下限范圍內(nèi)的線性的評(píng)價(jià)，結(jié)果表明，雖然隨著稀釋程度的增加，理論值與實(shí)測(cè)均值偏差逐漸增大，但在低值計(jì)數(shù)的總體范圍內(nèi)儀器還是表現(xiàn)出比較良好的檢測(cè)能力。

Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀用于穿刺液常規(guī)檢測(cè)與顯微鏡手工計(jì)數(shù)比較具有更好的準(zhǔn)確性與精密度,線性范圍廣,可大大縮減檢測(cè)報(bào)告時(shí)間。這既體現(xiàn)了SysmexXE-5000全自動(dòng)血液分析儀在穿刺液常規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)方面的優(yōu)越性,又避免了漏診和誤診。但當(dāng)儀器出現(xiàn)異常的高熒光細(xì)胞散點(diǎn)圖及檢測(cè)惡性胸腹腔積液標(biāo)本時(shí)建議用手工計(jì)數(shù)復(fù)核儀器檢測(cè)結(jié)果,主要原因是儀器測(cè)定高熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域中不僅包括腫瘤細(xì)胞，還包括部分組織細(xì)胞及間皮細(xì)胞，這些細(xì)胞的核酸含量與腫瘤細(xì)胞相似，干擾了對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別[5-7]。在臨床檢測(cè)工作中，SysmexXE-5000全自動(dòng)血液分析儀與手工檢測(cè)相互印證,可為臨床提供可靠的診斷依據(jù)。

[1] DE JONGE R, BROUWER R, DE GRAAF M T, et al. Eva-luation of the new body fluid mode on the Sysmex XE-5000 for counting leukocytes and erythrocytes in cerebrospinal fluid and other body fluids[J]. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, 2010,48(5):665-675.

[2] 董爭(zhēng)鳴,王清,趙金霞,等. 提高血液細(xì)胞分析質(zhì)量應(yīng)注意的幾個(gè)因素[J]. 齊魯醫(yī)學(xué)雜志, 2005,20(5):470.

[3] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜. 全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M]. 3版. 南京:東南大學(xué)出版社, 2006:312-319.

[4] 張慶芳. UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀在胸腹水檢查中的應(yīng)用[J]. 中國實(shí)用醫(yī)藥, 2009,4(33):34-35.

[5] TANAKA C, NAGAI T, NAKARNURA M, et al. Automated hematology analyzer XE-5000: overview and basic performance[J]. Sysmex Joumal Lnternational, 2008,17(18):125-130.

[6] BOER K, DEUFEL T, REINHOEFER M. Evaluation of the XE-5000 for the automated analysis of blood cells in cerebrospinal fluid[J]. Clinical Biochemistry, 2009,42(7):684-691.

[7] 王孌,耿超,初開秋,等. DNA倍體分析聯(lián)合腹水/血清CEA比值測(cè)定對(duì)腹水性質(zhì)鑒別診斷價(jià)值[J]. 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2008,44(4):301-303.

(本文編輯 馬偉平)

EVALUATION OF NEOTYPE BLOOD ANALYSER IN DETECTION OF CEREBROSPINAL, PLEURAL FLUID AND ABDOMINAL DROPSY ASCITES

CHEHuijuan,KANGQinjiong,HUHongzhang

(Department of Laboratory Medicine, West China Hospital, Sichuan University, Chengdu 610041, China)

ObjectiveTo evaluate Sysmex XE-5000 hematology analyzer in detecting cerebrospinal fluid (CSF), pleural fluid (PF) and abdominal dropsy (AD).MethodsSysmex XE-5000 hematology analyzer was used to measure 99 specimens of CSF, PF and AD. The results were compared with that obtained by manual counting and analyzed.ResultsTheCVs of WBC and RBC were 3.04% and 0.77%, carryover 0.04% and 0.01%, and linearity correlation coefficient 0.999 and 1.000, respectively, all were consistent with the requirements of relevant criteria. The WBC count, RBC count,MN count in CSF, PF and AD with the device were highly correlated with traditional manual counting (r=0.84-0.91;P<0.05,0.01).ConclusionThe body fluid mode of Sysmex XE-5000 hematology analyzer can meet the requirements of clinical test, it has a good correlation with manual approach, and has a high application value in clinical detection of body fluid cells.

hematology analyzer; body fluids; blood cell count; evaluation studies

2014-10-03;

2015-04-15

車輝娟(1984-)，女。

胡宏章(1972-)，男，碩士，主管檢驗(yàn)技師。

R446.113

A

1008-0341(2015)04-0468-03