陳 芳，李潤(rùn)巖，吳春敏

（1.石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限責(zé)任公司，河北 石家莊 050000；2.河北省食品檢驗(yàn)研究院 河北省食品安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北 石家莊 050091）

硫酸頭孢噻利化學(xué)名稱為7β－［（z）－2－（2－氨基－4－噻唑基）－2－（2－甲氧亞氨基乙酰氨基）］－3－［3－氨基－2－（2－羥乙基）－1－吡唑鎓基］甲基－3－頭孢烯－4－羧酸硫酸鹽［1］，屬于第四代注射用頭孢菌素，是一種高效廣譜抗菌藥物。該產(chǎn)品于1998年在日本首次上市。在硫酸頭孢噻利的制備過程中，三氟乙酸作為一種有機(jī)催化劑來使用的［2］，由于三氟乙酸屬于四類溶劑，在臨床使用中存在毒性，因此必須嚴(yán)格控制其在成品中的殘留量。

目前，部分學(xué)者對(duì)環(huán)境中［3－6］及部分藥品中［7－10］的三氟乙酸殘留進(jìn)行了研究分析，但是對(duì)硫酸頭孢噻利中三氟乙酸的殘留檢測(cè)鮮有報(bào)道。本文采用離子色譜法建立了硫酸頭孢噻利中三氟乙酸殘留的檢測(cè)方法，靈敏度高，重現(xiàn)性好，適用于藥物中該物質(zhì)的質(zhì)控。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

DionexICS－3000型離子色譜儀（美國戴安公司），配DIONEX ASRS 4mm陰離子抑制器、DIONEX EG50自動(dòng)淋洗液發(fā)生器、電導(dǎo)檢測(cè)器和Chromeleon工作站。

三氟乙酸標(biāo)準(zhǔn)品購自于Sigma公司，純度＞98%；試驗(yàn)用水為18.25MΩ·cm超純水（自制）。

硫酸頭孢噻利供試品由石藥集團(tuán)某公司提供。

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：精確稱取適量三氟乙酸標(biāo)準(zhǔn)品，用超純水溶解并定容，配成濃度約為1mg／mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液，置于冰箱中4℃保存?zhèn)溆?。根?jù)需要配成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)使用液。

1.2 樣品前處理

精密稱定硫酸頭孢噻利樣品0.1g（精確至0.001g），于10mL帶刻度比色試管中，加入適量的超純水溶解并定容至2mL。漩渦2min，超聲10min，5000r／min離心3min，過0.45μm濾膜，待測(cè)。

1.3 色譜條件

采用Dionex IonPac AS19（4mm×25cm）陰離子交換色譜柱及相應(yīng)的IonPac AS19（4mm×5cm）陰離子保護(hù)柱；DIONEX ASRS 4mm陰離子抑制器，外加水抑制模式，抑制電流100mA；DIONEX EG50自動(dòng)淋洗液發(fā)生器，為1.0mmol／L氫氧化鉀溶液，流速為1.0mL／min；電導(dǎo)檢測(cè)器，檢測(cè)池溫度：30℃；進(jìn)樣體積為25μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 超聲時(shí)間的選擇

在其他條件相同的條件下，實(shí)驗(yàn)考察了不同的超聲時(shí)間（0、5、10、20、30min）對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)超聲時(shí)間未達(dá)到10min之前，三氟乙酸的檢測(cè)結(jié)果隨超聲時(shí)間的增長(zhǎng)而增大，當(dāng)超聲時(shí)間超過10min以后，檢測(cè)結(jié)果基本持平。因此，我們選擇超聲時(shí)間為10min。

2.2 色譜柱的選擇

我們考察了AS19和AS11兩種色譜柱，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，同等濃度時(shí)，三氟乙酸在AS19色譜柱上響應(yīng)值更好，而且峰型對(duì)稱，因此，本實(shí)驗(yàn)選擇AS19色譜柱為今后實(shí)驗(yàn)的分析柱。

2.3 色譜條件的選擇

實(shí)驗(yàn)研究了不同濃度淋洗液和檢測(cè)器溫度對(duì)三氟乙酸檢測(cè)結(jié)果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，淋洗液濃度為1.0mmol／L，檢測(cè)池溫度為30℃時(shí)，即可獲得較好的檢測(cè)結(jié)果。在該色譜條件下對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)試，三氟乙酸的保留時(shí)間約為6.440min。結(jié)果見圖1所示。

圖1 三氟乙酸標(biāo)準(zhǔn)離子色譜圖

2.4 線性關(guān)系、檢出限和定量限

配制濃度依次為0、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg／mL的三氟乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照“1.3”的色譜方法將標(biāo)準(zhǔn)溶液注入離子色譜儀，并記錄色譜圖。以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在0.1～10.0μg／mL范圍內(nèi)，色譜峰面積和濃度呈良好線性關(guān)系。線性方程為Y＝0.0799X，r＝0.9997。

取濃度為1.0μg／mL的三氟乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋，按照3倍信噪比（S／N＝3）和10倍信噪比（S／N＝10）分別計(jì)算方法的檢出限為0.03μg／mL和定量限為0.10μg／mL。

2.5 樣品加標(biāo)回收率試驗(yàn)

取未檢出三氟乙酸的樣品9份，3份為一組，按照5倍定量限，10倍定量限和50倍定量限的方式，依次加入濃度為10μg／mL的標(biāo)液0.1mL、0.2mL、1.0mL，加超純水定容至2mL。將該系列樣品依次注入離子色譜儀中，每個(gè)樣品重復(fù)進(jìn)樣6次，計(jì)算該方法的精密度和加標(biāo)回收率。測(cè)試結(jié)果見表1所示。低、中、高3個(gè)濃度水平的平均回收率（n＝6）依次為97.9%、98.5%、98.9%，精密度的 RSD值分別為1.51%、1.18%和1.04%。

2.6 樣品檢測(cè)

分別取3批樣品，按照“1.2、1.3”進(jìn)行樣品處理和測(cè)試，平行測(cè)定2份，結(jié)果三批樣品中均未檢出三氟乙酸殘留。

表1 陰性樣品中三氟乙酸加標(biāo)回收率（n＝6）和精密度實(shí)驗(yàn)

3 結(jié)論

本文建立的離子色譜法檢測(cè)硫酸頭孢噻利中三氟乙酸殘留的分析方法，優(yōu)化了前處理?xiàng)l件和儀器條件，該方法的檢出限為0.03μg／mL，可以滿足三氟乙酸殘留檢測(cè)的要求。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法靈敏度高，準(zhǔn)確性好，結(jié)果令人滿意。可以為監(jiān)管部門對(duì)三氟乙酸殘留的監(jiān)測(cè)提供科學(xué)依據(jù)。

［1］ 崔德修，李重陽，李明研.硫酸頭孢噻利的合成［J］.國外醫(yī)藥抗生素分冊(cè)，2013，34（6）：250－251.

［2］ Simōn E.Lopez，Jose Salazar.Trifluoroacetic acid：Uses and recent applications in organic synthesis［J］.Journal of Fluorine Chemistry，2013，156：73－100.

［3］ 張劍波，胡建信，曾錚，等.地表水中微量三氟乙酸的分析方法［J］.分析化學(xué)，2005，33（4）：549～552.

［4］ 王巧云，丁翔，李德軍，等.環(huán)境水樣中三氟乙酸的分析［J］.分析試驗(yàn)室，2009，28（5）：68－71.

［5］ 項(xiàng)徐偉，沈志群，鄭剛，等.氣相色譜－質(zhì)譜法測(cè)定水體中三氟乙酸［J］.理化檢驗(yàn)－化學(xué)分冊(cè)，2010，46（3）：241－243.

［6］ 胡瑕，吳婧，翟紫含，等.大氣中氣相和顆粒相三氟乙酸濃度測(cè)定［J］.分析化學(xué)，2013，41（8）：1140～1146.

［7］ 于偉，雋海龍，王偉，等.高效液相色譜法測(cè)定塞來昔布中三氟乙酸殘留［J］.中國實(shí)用醫(yī)藥，2013，8（36）：13－14.

［8］ 周傳靜，宋玉平，李玉雙，等.離子色譜法測(cè)定鹽酸托烷司瓊中的三氟乙酸［J］.藥學(xué)研究，2014，33（11）：635－636.

［9］ 郭興輝，黃永麗，王倩雯，等.淋洗液在線發(fā)生－離子色譜法測(cè)定塞來昔布中三氟乙酸殘留［J］.藥物分析雜志，2014，34（6）：1077－1079.

［10］ 馮順卿，李詠華，李曉燕，等.離子色譜法測(cè)定酒石酸長(zhǎng)春瑞濱中三氟乙酸殘留［J］.藥物分析雜志，2013，33（2）：289－291.