豆 穎 閆 哲 劉秀芹 劉 亞

·論著·

胃癌組織中Her-2的表達及臨床病理意義

豆 穎 閆 哲 劉秀芹 劉 亞

目的 研究分析人表皮生長因子受體-2 (Her-2)在胃癌及正常胃組織中的表達以及與臨床病理參數(shù)的關(guān)系, 分析胃癌中Her-2表達的臨床意義, 為胃癌的靶向治療奠定理論基礎(chǔ)。方法 應用免疫組化法檢測在78例原發(fā)胃癌及39例正常胃組織中Her-2基因的表達。結(jié)果 在胃癌組織中Her-2過表達率為23.08%, 正常胃組織中Her-2過表達率為0。胃癌中, Her-2的表達與胃癌的位置、Lauren分型相關(guān)(P＜0.05), 與組織學分化程度無相關(guān)性(P＞0.05)。結(jié)論 Her-2在胃癌中的表達可能與胃癌的預后有密切關(guān)系, 檢測Her-2蛋白, 可能使患者從輔助靶向治療中獲益。

人表皮生長因子受體-2 ；胃癌組織；免疫組化法

胃癌發(fā)病率在目前已知的惡性腫瘤中占第四位, 在世界范圍內(nèi)由癌癥引起的相關(guān)死亡中占第二位［1］。目前Her-2被廣泛認為是人體實體瘤生長發(fā)育的一種關(guān)鍵因子, 尤其對于乳腺癌, 在20%～25%的乳腺癌患者中, Her-2基因呈現(xiàn)過量表達, Her-2已被認為是腫瘤治療的預后和治療的指標［2］。在我國胃癌為高發(fā)腫瘤, 由于胃組織重要的生理功能, 單純手術(shù)治療效果并不理想, 患者的術(shù)后5年生存率仍然不高［3］,目前的治療仍依賴于以化學治療為主的綜合治療方法, 因而為胃癌的治療尋找有效的生物學標記物成為目前研究的熱點。本研究應用免疫組化法檢測78例胃癌和39例正常胃組織中Her-2的表達情況以及其與臨床病理指標的關(guān)系, 為胃癌的靶向治療提供理論依據(jù)。現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 39例正常胃組織(見圖1)和78例胃癌(見圖2)(取自慢性胃炎、胃潰瘍手術(shù)切除胃組織周邊正常胃黏膜)均來自商丘市第一人民醫(yī)院病理科2008年1月～2013年12月手術(shù)切除存檔的蠟塊。78例胃癌患者中, 男52例,女26例；年齡最大89歲, 最小45歲, 平均年齡62.5歲；根據(jù)Lauren分型：彌漫型38例, 腸型36例, 混合型4例；根據(jù)組織學分級：高、中分化腺癌33例, 低分化腺癌45例；臨床分期：Ⅰ～Ⅱ期36例, Ⅲ～Ⅳ期42例；有淋巴轉(zhuǎn)移者49例, 無淋巴轉(zhuǎn)移者29例；侵及漿膜層者63例, 未侵及漿膜層者15例。所有標本均使用10%中性福爾馬林緩沖液切開固定24～48 h, 常規(guī)石蠟包埋并切片染色, 在商丘市第一人民醫(yī)院病理科常規(guī)診斷。

1.2 試劑 鼠抗人Her-2單克隆抗體、SP試劑盒及DAB染色劑均購自北京中杉金橋生物制劑有限公司。

1.3 方法 所選蠟塊制成4 μm厚切片, 按SP免疫組化染色步驟進行操作, 用已知表達抗體的組織做陽性對照, 用PBS緩沖液代替一抗做陰性對照。Her-2蛋白主要表達在細胞膜,呈棕黃色, 免疫組化染色結(jié)果的判定標準采用hercep test［4］：腫瘤細胞無染色或＜10%的腫瘤細胞胞膜染色為“0”(見圖3), ≥10%的腫瘤細胞有不完整胞膜染色為“1+”, ≥10%的細胞有較弱的完整胞膜染色為“2+”, ≥10%的細胞有較強的完整胞膜染色為“3+”(見圖4)；0、1+視為無或低表達, 2+、3+視為過表達。

圖1 HE切片正常胃黏膜(10×10)

圖2 HE切片胃中分化腺癌(10×10)

圖3 免疫組化染色Her-2(0)(10×10)

圖4 免疫組化染色Her-2(3+)(10×10)

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。Her-2在胃癌、正常胃組織中的表達結(jié)果采用χ2檢驗；運用非參數(shù)Kruskal Wallis檢驗對Her-2在胃癌中的表達與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系進行分析。檢驗水準α=0.05, P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

Her-2蛋白在胃癌組織中及正常胃組織中的過表達率分別為23.08%(18/78)、0(0/39), 前者明顯高于后者, 差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。Her-2蛋白過表達與胃癌的位置、分型有一定的相關(guān)性(P＜0.05), 與胃癌的組織學分化無相關(guān)性(P＞0.05)。Her-2在胃癌中的過量表達與胃癌的臨床病理參數(shù)的關(guān)系具體見表1。

表1 Her-2蛋白過表達與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系(n, %)

3 討論

Her-2基因又稱為HER2/neu和c-erbB-2, 是基因定位于染色體17q21, 編碼相對分子質(zhì)量為185000的具有酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白, 是原癌基因的一種, 屬于表皮生長因子受體家族, 調(diào)節(jié)細胞生長、分化和增殖, 參與細胞間的信號傳導。該蛋白Sakai等［5］于1986年首次報道了Her-2基因在胃癌中的過表達。宋巖等［6］回顧性的分析了中國醫(yī)學院腫瘤醫(yī)院于2006～2008年間收治的83例晚期胃癌患者的Her-2蛋白的表達情況, 研究結(jié)果顯示存在Her-2基因過表達以及基因擴增的患者分別為25例和29例。此研究還表明,無Her-2基因擴增的晚期胃癌患者的生存期大約為12.6個月,而有Her-2基因擴增的患者生存期僅為短短的5.5個月。王仰坤等［7］的研究發(fā)現(xiàn), 胃癌組織中Her-2蛋白的過表達與腫瘤的浸潤深度以及淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移有關(guān), 與發(fā)病年齡、性別以及組織學分型無關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn), Her-2的過表達與胃癌發(fā)生的位置、Lauren分型有關(guān), 與他們不同, 可能與腫瘤異質(zhì)性有關(guān)。Jφrgensen等［8］的研究發(fā)現(xiàn), 采用免疫組織化學染色法檢測Her-2蛋白在胃癌中的過表達百分比為23%, 本研究發(fā)現(xiàn), 胃癌中Her-2蛋白的過表達率為23.08%, 而在正常胃組織中的表達為0, 與他們的研究基本一致。

2009年在ASCO會議上公布了ToGA臨床試驗結(jié)果, 在ToGA試驗中, 將Her-2蛋白過表達的胃癌患者隨機分為化療組(5-氟尿嘧啶或卡陪他濱聯(lián)合順鉑化療)以及化療聯(lián)合曲妥珠單抗治療組進行治療, 結(jié)果顯示, 后者的治療效果較好, 確立了曲妥珠單抗在胃癌治療中的地位［9］, 曲妥珠單抗抑制Her-2介導的信號傳導途徑, 阻斷Her-2受體細胞外區(qū)域分裂, 激活抗體依賴性細胞介導的細胞毒性作用, 抑制腫瘤的生長。檢測Her-2蛋白的表達, 可以為臨床治療提供一定的參考, 為胃癌的個體化治療提供依據(jù)。

目前, 唯一被歐盟批準的用于治療進展期胃癌的分子靶向藥物是曲多珠單抗赫賽汀, 價格昂貴, 因此需要準確的檢測, 目前臨床上常用的方法是免疫組化(IHC)和熒光原位雜交(FISH), 宋國新等［10］研究證實, IHC與FISH檢測結(jié)果符合率為95%, 具有高度一致性, 當IHC檢測表達為0、1+或3+時IHC和FISH檢測結(jié)果有較高符合率, 可作為臨床是否應用赫賽汀治療的依據(jù), 而表達為2+的病例必須進一步行Her-2基因擴增檢測。

總之, 胃癌組織中Her-2蛋白的檢測有利于胃癌預后的判斷, 對于胃癌患者的治療有一定的指導意義, 檢測Her-2蛋白, 可能使患者從輔助靶向治療中獲益。

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Expression of Her-2 and its clinical pathological significance in gastric carcinoma tissue

DOU Ying, YAN Zhe, LIU Xiu-qin, et al.
Department of Pathology, Shangqiu City the First People’s Hospital, Shangqiu 476100, China

Objective To study the relation between expression and clinical pathological parameters of human epidermal growth factor receptor-2 (Her-2) in gastric carcinoma tissue and normal gastric tissue, and to analyze the clinical significance of expression of Her-2 in gastric carcinoma, in order to lay the theoretical foundation of targeted therapy for gastric carcinoma.Methods The expression of Her-2 gene was detected in 78 cases of primary gastric carcinoma and 39 cases of normal gastric tissue by immunohistochemical method.Results The over-expression rate of Her-2 in gastric carcinoma tissue was 23.08%, and that in normal gastric tissue was 0.In gastric carcinoma, the expression of Her-2 was related with the location of gastric carcinoma and Lauren classification (P＜0.05), and it had no correlation with histological differentiation degree (P＞0.05).Conclusion The expression of Her-2 may have close relation with prognosis of gastric carcinoma.The detection of Her-2 protein can benefit patients in assistant targeted therapy.

Human epidermal growth factor receptor-2; Gastric carcinoma tissue; Immunohistochemical method

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.05.001

2014-11-06］

476100 商丘市第一人民醫(yī)院病理科(豆穎 劉秀芹劉亞), 心血管內(nèi)科(閆哲)