林健球 謝仁岐

纖維支氣管鏡檢查及支氣管肺泡灌洗液噬菌體裂解法對痰菌陰性肺結(jié)核的診斷價值研究

林健球 謝仁岐

目的 探討纖維支氣管鏡(簡稱纖支鏡)聯(lián)合刷檢、活檢及支氣管肺泡灌洗液(BALF)噬菌體裂解法對痰菌陰性肺結(jié)核(SNPTB)的診斷價值。方法 納入SNPTB患者100例, 隨機(jī)分為實驗組與對照組, 每組50例。實驗組予纖支鏡刷檢聯(lián)合刷檢、活檢及BALF噬菌體裂解法檢查, 以任意一項陽性為檢測陽性；對照組予傳統(tǒng)痰抗酸染色、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、結(jié)核菌素試驗(PPD)、血結(jié)核抗體檢測, 以任意一項陽性為檢測陽性。對比兩組診斷效果, 并對比實驗組三種檢測方案獨(dú)立陽性率。結(jié)果 實驗組陽性檢出率94.0%, 明顯高于對照組68.0%, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；實驗組中刷檢陽性率66.0%、活檢陽性率61.9%, 均明顯低于BALF噬菌體裂解法陽性檢出率92.0%, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.0125)。結(jié)論 多種纖支鏡檢測方案聯(lián)合, 對SNPTB的診斷效果極佳；這些檢測方案中, 又以BALF噬菌體裂解法診斷價值最高。

肺結(jié)核；診斷；纖維支氣管鏡；肺泡灌洗；噬菌體裂解法

我國是結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一, 肺結(jié)核患病率高而病理發(fā)現(xiàn)率低［1］。臨床認(rèn)為早期診斷、及時治療可有效提升療效、預(yù)防復(fù)發(fā), 且可節(jié)省經(jīng)濟(jì)開支, 然而現(xiàn)階段SNPTB已逐漸成為活動性肺結(jié)核的主要類型, 其痰檢抗酸桿菌陽性率多＜40%, 且即便結(jié)果提示陽性, 依舊難以區(qū)分結(jié)核或非結(jié)核分枝桿菌［2］, 此類患者其他臨床表現(xiàn)亦缺乏特異性, 漏診率高。近期研究指出纖支鏡刷檢、活檢、BALF對SNPTB可能具有較高的診斷價值, 然而刷檢多為盲檢、活檢結(jié)果又受取材效果的影響, 均有一定局限性, 相較而言, BALF適用性更強(qiáng)［3］。以此為基礎(chǔ), 本研究重點探討了BALF結(jié)合噬菌體裂解法對SNPTB的診斷價值, 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年5月～2014年5月入院的100例患者, 均符合以下標(biāo)準(zhǔn)：參考臨床癥狀、體征、實驗室檢查、影像學(xué)檢查等, 擬診斷為肺結(jié)核, 且至少3次痰涂片、至少1次PCR診斷為陰性；入院前未行任何抗結(jié)核治療；能夠配合檢查；知情同意；未合并凝血功能障礙。其中男57例,女43例, 年齡22～80歲, 平均年齡(45±9)歲, 隨機(jī)將納入對象分為實驗組和對照組, 各50例, 兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 對照組均行傳統(tǒng)痰抗酸染色、PCR、PPD試驗、血結(jié)核抗體檢測, 以任意一項陽性為陽性診斷, 統(tǒng)計陽性診斷率。實驗組行纖支鏡刷檢、活檢、BALF噬菌體裂解法檢測,以任意一項陽性為陽性診斷, 統(tǒng)計陽性診斷率及各子項陽性診斷率。

1.2.2 實驗組采用纖支鏡檢測, 方法如下：型號BF-P150纖支鏡(奧林巴斯公司), 已按標(biāo)準(zhǔn)方案消毒, 通過鏡檢后是否對下次檢測結(jié)果造成影響, 證實為消毒可靠。參考X線胸片探查并確定病變部位；發(fā)現(xiàn)病灶后, 如其表面存在壞死組織, 優(yōu)先清除；隨后行刷檢及活檢取材；然后行支氣管肺泡灌洗, 灌洗液為無菌生理鹽水, 預(yù)先控溫至37℃, 共20 ml,分2～3次灌入相應(yīng)位置, 負(fù)壓回收, 送行噬菌體裂解法檢測。如未能發(fā)現(xiàn)明顯病灶, 則參考X線胸片所示病灶, 在相應(yīng)區(qū)域行刷檢, 隨后參考前述方案, 灌洗后取灌洗液送檢, 此時不予活檢。如影像學(xué)檢測亦未見明顯病灶, 則鏡下取疑似病灶區(qū)域, 取標(biāo)本。行活檢的組織均要求60 min內(nèi)送行細(xì)菌學(xué)及組織學(xué)檢查；刷檢物制涂片, 行抗酸染色找結(jié)核分枝桿菌；灌洗液回收量一般為5～15 ml, 嚴(yán)格參考結(jié)核分枝桿菌噬菌體裂解試劑盒(Phage Tek MBTM, 荷蘭)說明書檢測, 每次檢測均設(shè)空白對照、噬菌體對照、殺毒劑對照、指示細(xì)胞對照、陽性及陰性對照, 在對照樣本結(jié)果正確的前提下, 觀察實驗樣本的檢測結(jié)果。噬菌體裂解法陽性指標(biāo)為出現(xiàn)大小不等的噬菌斑, 相互融合后可呈現(xiàn)透明狀；陰性指標(biāo)為細(xì)胞均勻生長,未見噬菌斑。同時統(tǒng)計纖支鏡所致不良反應(yīng)及并發(fā)癥發(fā)生率,以評價其安全性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。 P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 纖支鏡檢測與常規(guī)檢測方案對比 對照組性常規(guī)檢測方案, 得出陽性診斷34例, 占68.0%, 其中痰抗酸染色陽性11例、PCR陽性21例、PPD實驗陽性14例、血抗結(jié)核抗體檢測陽性18例, 部分患者多項檢測均陽性。實驗組陽性診斷47例, 占94.0%, 組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

2.2 纖支鏡刷檢、活檢、BALF噬菌體裂解法檢測結(jié)果對比 三組間三種檢測方案的陽性檢測率比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05), 續(xù)行χ2分割檢驗, 指出纖支鏡刷檢、活檢陽性檢出率均明顯低于BALF噬菌體裂解法, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.0125)。見表2。

表1 纖支鏡檢測與常規(guī)檢測方案對比［n(%)］

表2 纖支鏡刷檢、活檢、BALF噬菌體裂解法檢測結(jié)果對比［n(%)］

2.3 纖支鏡所致不良反應(yīng)與并發(fā)癥分析 實驗組50例患者術(shù)后均出現(xiàn)咳嗽反應(yīng), 未予醫(yī)療干預(yù), 自然消失；21例術(shù)后2 d內(nèi)出現(xiàn)痰中帶血, 予止血及對癥干預(yù)后, 迅速緩解并消失；1例術(shù)后150 min時出現(xiàn)發(fā)熱, 物理降溫、應(yīng)用抗生素120 min后體溫恢復(fù)正常。未見其他不良反應(yīng), 未見肝腎功能損傷及其他嚴(yán)重并發(fā)癥。

3 討論

本研究證實, 對灌洗液行噬菌體裂解法檢測, 能夠取得較佳的診斷效果。該檢測方案的原理為噬菌體對結(jié)合分子桿菌有選擇性裂解作用, 當(dāng)樣本中含有活性結(jié)核分支桿菌時,噬菌體將侵入其中、大量繁殖, 從裂解細(xì)菌中釋放出后, 又會感染指示細(xì)胞, 最終形成噬菌斑。反之, 當(dāng)樣本中不存在結(jié)核分枝桿菌時, 將不會形成噬菌斑［4］。其優(yōu)勢在于相較培養(yǎng)法, 檢測周期明顯更短, 可于當(dāng)日得出診斷結(jié)果, 能夠充分滿足肺結(jié)核早期診斷、治療的要求。

本研究同時分析了纖支鏡檢測的安全性, 結(jié)果指出患者術(shù)后僅表現(xiàn)出可控的輕度不良反應(yīng), 說明纖支鏡檢測不會對患者身體產(chǎn)生額外損傷, 安全性較高。

綜上所述, 本研究證實纖維支氣管鏡檢查及支氣管肺泡灌洗液噬菌體裂解法檢測, 對痰菌陰性肺結(jié)核均有較好的診斷價值, 合理結(jié)合兩者, 能夠進(jìn)一步提升檢出效果。

［1］ 李振生, 李德新, 陳素麗, 等.結(jié)核菌噬菌體生物擴(kuò)增法與結(jié)核菌DNA聯(lián)合檢測對痰菌陰性肺結(jié)核診斷的價值.河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2012, 33(8):881-883.

［2］ 李站領(lǐng), 李艷靜, 彭勛, 等.多種手段聯(lián)合應(yīng)用對菌陰不典型肺結(jié)核的診斷價值.河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2013, 34(6):639-642.

［3］ 郭新枝, 陳裕, 于永敏, 等.支氣管肺泡灌洗液BACTEC-MGIT 960結(jié)核菌快速培養(yǎng)的臨床研究.北京醫(yī)學(xué), 2013, 35(3):221-222.

［4］ 林惠玲, 崔健偉, 王怡心, 等.噬菌體裂解法在肺結(jié)核分枝桿菌耐藥性檢測中的應(yīng)用.中國熱帶醫(yī)學(xué), 2012, 12(2):215-216.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.22.046

2015-03-31］

佛山市科技攻關(guān)項目(項目編號：201308339)

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