高靜 陳蓓蕾 安慶玲 田林濤 田亞寧 王越月 何春玲 董昌虎

CXCR4在急性白血病的表達(dá)及臨床研究

高靜 陳蓓蕾 安慶玲 田林濤 田亞寧 王越月 何春玲 董昌虎

目的 探討CXCR4在各類(lèi)型急性白血病骨髓組織中的表達(dá)及臨床意義。 方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)急性白血病45例及15例非惡性血液病患者正常骨髓組織中CXCR4的表達(dá), 并分析與疾病病理類(lèi)型、浸潤(rùn)及預(yù)后的關(guān)系。 結(jié)果 正常組織、急性髓細(xì)胞白血病(AML)組、急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)組中CXCR4的表達(dá)陽(yáng)性率依次增高, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；髓外浸潤(rùn)組中CXCR4的表達(dá)高于非髓外浸潤(rùn)組。 結(jié)論 CXCR4高表達(dá)于各類(lèi)型急性白血病中, 可作為檢測(cè)指標(biāo)之一；且CXCR4表達(dá)與急性白血病預(yù)后有密切關(guān)系；針對(duì)CXCR4的靶向治療有望成為治療急性白血病新的方向。

CXCR4；急性白血病

急性白血病(acute leukemia, AL)是造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病, 由于骨髓中異常細(xì)胞大量增殖且嚴(yán)重影響正常造血, 廣泛浸潤(rùn)肝臟、脾臟、淋巴結(jié)、神經(jīng)系統(tǒng)等, 預(yù)后極差。趨化因子12又稱(chēng)基質(zhì)細(xì)胞源性因子1(SDF21), 是新發(fā)現(xiàn)的一類(lèi)具有趨化活性的重要細(xì)胞因子 , 與其特異性受體 CXCR4所組成的SDF21/CXCR4 軸參與多種病理生理過(guò)程, 特別在造血干細(xì)胞的生成、分化、遷移及歸巢, 血液系統(tǒng)腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移等有重要作用。本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)急性白血病及正常骨髓組織中CXCR4的表達(dá)水平, 并分析與病理類(lèi)型、轉(zhuǎn)移、預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2009年1月～2014年12月陜西中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院血液科確診初發(fā)急性白血病45例, 其中男26例, 女19例, 年齡7～58歲, 中位年齡39歲, 急性髓細(xì)胞白血病30例, 其中M29例、M38例、M46例、M57例；急性淋巴細(xì)胞白血病15例, 其中L14例、L29例、L32例；另取同期本科確診非惡性血液病15例為對(duì)照組；以上診斷及療效評(píng)價(jià)均參照張之南《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》(第3版)。

1.2 試劑與方法 取本院病理科封存骨髓組織塊, 制成2～3 μm組織切片；兔抗人CXCR4單克隆抗體購(gòu)自Abcam公司, 免疫組織化學(xué)染色DAB試劑盒購(gòu)自北京中杉金橋試劑公司, 采用免疫組織化學(xué)SP法染色, 按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3 結(jié)果判定 顯微鏡下細(xì)胞中出現(xiàn)淺黃色、黃色顆粒著色者為陽(yáng)性細(xì)胞, 隨機(jī)選取5個(gè)視野, 統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞比例, ＜10%為陰性(-), 10%～50%為陽(yáng)性(+), ＞50%為強(qiáng)陽(yáng)性(++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 實(shí)施χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CXCR4在急性白血病和正常組織中的表達(dá) 正常組織、AML、ALL組中CXCR4的表達(dá)陽(yáng)性率(+和++)依次增高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 三組中CXCR4的表達(dá)［n(%)］

2.2 急性白血病髓外浸潤(rùn)組與非髓外浸潤(rùn)組中CRCX4的表達(dá) AL中具有以下體征之一即為髓外浸潤(rùn)：肝臟或脾臟腫大；淋巴結(jié)腫大；中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累；皮膚結(jié)節(jié)；牙齦增生腫脹；睪丸腫大；根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)將AL分為髓外浸潤(rùn)組32例和非髓外浸潤(rùn)組13例, 其中髓外浸潤(rùn)組CXCR4表達(dá)陽(yáng)性率為62.5%(20/32), 非髓外浸潤(rùn)組CXCR4表達(dá)陽(yáng)性率為23.1%(3/13), 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

3 討論

SDF21是由骨髓基質(zhì)細(xì)胞及相關(guān)上皮細(xì)胞、間皮細(xì)胞分泌的小分子趨化蛋白, 是趨化因子CXC亞家族的一員,CXCR4作為SDF21重要受體, 其N(xiāo)端與之特異性結(jié)合, 從而啟動(dòng)下游相關(guān)信號(hào)通路形成SDF21/CXCR4生物軸, 其對(duì)維持胚胎發(fā)育過(guò)程, 干細(xì)胞遷移, 造血細(xì)胞的生成、分化、遷移及歸巢, 調(diào)節(jié)免疫炎性反應(yīng), 正?；蚰[瘤新生血管形成,腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移等都起非常重要的作用［1］。

目前多項(xiàng)研究表明, CXCR4能夠在多種腫瘤細(xì)胞中表達(dá), 是表達(dá)于腫瘤細(xì)胞上最為普遍的趨化因子受體, 王明正等［2］研究表明CXCR4高表達(dá)于非小細(xì)胞癌中, 且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移TNM分期呈正相關(guān)；姚斌等［3］通過(guò)檢測(cè)CXCR4在各類(lèi)型骨肉瘤中表達(dá)發(fā)現(xiàn), CXCR4不僅在各組織中表達(dá)陽(yáng)性,且表達(dá)隨著腫瘤組織惡性程度的增高而增高；尹東等［4］發(fā)現(xiàn)CXCR4高表達(dá)于口腔鱗狀細(xì)胞癌中, 且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有重要關(guān)系。

本研究應(yīng)用免疫組化染色法對(duì)45例AL及15例正常的骨髓組織中CXCR4的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè), 在A(yíng)L中CXCR4陽(yáng)性23例, 占51.1%, 其中男14例、女9例, 不同性別間, 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 在不同AL類(lèi)型中可見(jiàn)CXCR4的分布差異, 其中ALL陽(yáng)性11例(L12例、L28例、L31例), 占73.3%；AML陽(yáng)性12例(M22例、M33例、M43例、M54例),占40%；正常骨髓組織中CXCR4陽(yáng)性2例, 占13.3%；由此可見(jiàn), CXCR4高表達(dá)于A(yíng)L組織中, 且表達(dá)與AL的類(lèi)型關(guān)系密切, ALL中CXCR4的表達(dá)明顯高于A(yíng)ML, 且AML中M4+M5表達(dá)高于M2+M3。

盡管目前治療白血病方案層出不窮, 但白血病細(xì)胞的遷移侵襲仍是導(dǎo)致預(yù)后差的重要原因, 本研究還發(fā)現(xiàn)在急性白血病髓外浸潤(rùn)組中CXCR4的表達(dá)明顯高于非髓外浸潤(rùn)組,與張寶璽等［5］對(duì)AL患兒研究結(jié)果相符, 這表明CXCR4在白血病細(xì)胞遷移進(jìn)入外周血、浸潤(rùn)過(guò)程中起重要作用。近年來(lái), 越來(lái)越多的國(guó)外研究者證明高表達(dá)CXCR4的AL患者生存期短, 預(yù)后差。由此, 當(dāng)AL高表達(dá)CXCR4時(shí), 預(yù)示白血病細(xì)胞遷移侵襲能力較強(qiáng), 可通過(guò)檢測(cè)CXCR4的表達(dá)來(lái)提示髓外浸潤(rùn)可能, 以期早期治療, 改善患者預(yù)后。

綜上所述, SDF21/CXCR4 軸對(duì)于惡性腫瘤的影響越來(lái)越多的受到重視, 其在急性白血病的表達(dá)并發(fā)展、轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)都有重要的作用, 由此, 對(duì)于特異性的抑制CXCR4的表達(dá),降低腫瘤細(xì)胞的增殖活性, 從而抑制白血病細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、侵襲能力, 這必將成為急性白血病的新的治療方向。

［1］ 王峰, 張聲.CXCR4與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展.臨床與病理雜志, 2014, 34(1):76-80.

［2］ 王明正, 白峰, 劉佳坤, 等.CXCR4、VEGF在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及意義.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué), 2013, 21(9):1989-1991.

［3］ 姚斌, 夏冰, 卞峰, 等.CXCR4在骨肉瘤中的表達(dá)和臨床意義.中華全科醫(yī)學(xué), 2014, 12(1):12-14.

［4］ 尹東, 張佐, 高素, 等.趨化因子受體CXCR4及其配體CXCL12在口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞增殖和遷移中的作用.華西口腔醫(yī)學(xué)雜志, 2013, 31(1):8-12.

［5］ 張寶璽, 馬夫天, 趙曉慶, 等.急性白血病患兒血漿基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1及其受體CXCR4表達(dá)的臨床意義.中華實(shí)用兒科臨床雜志, 2010, 25(6):427-429.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.14.026

2015-03-10］

712000 陜西中醫(yī)學(xué)院(高 靜 陳蓓蕾 安慶玲田林濤 董昌虎)；陜西中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院(田亞寧 王越月何春玲 董昌虎)

董昌虎