劉加寶

(牡丹江大學(xué) 生物制藥與食品工程學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157000)

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HPLC法測定舒肝平胃丸中蒼術(shù)素含量

劉加寶

(牡丹江大學(xué) 生物制藥與食品工程學(xué)院，黑龍江 牡丹江 157000)

目的：建立高效液相色譜法測定舒肝平胃丸中蒼術(shù)素含量的方法。方法：采用C18色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-水(79∶21)，流速1.0mL·min-1，檢測波長340nm。結(jié)果：線性回歸方程為Y=0.094 2X+0.046 9，r=0.999 8，線性關(guān)系良好；平均回收率(n=5)為100.2%，RSD為0.41%。結(jié)論：該方法準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性良好，簡單易行，適用于舒肝平胃丸中蒼術(shù)素含量的測定。

HPLC法；舒肝平胃丸；蒼術(shù)素；含量

“舒肝平胃丸”為《中國藥典》2010版新增品種，由姜厚樸、陳皮、麩炒枳殼、法半夏、蒼術(shù)、炙甘草和焦檳榔等七味中藥組成，具有舒肝和胃、化濕導(dǎo)滯的作用。其中蒼術(shù)為菊科植物茅蒼術(shù)(Atractylodeslancea(Thunb.)DC.)或北蒼術(shù)(Atractylodeschinensis(DC.) Koidz.)的干燥根莖，具有促進(jìn)胃腸道運(yùn)動(dòng)、抗?jié)儭⒖剐募」Ｈ?、抑制子宮平滑肌、止痛、保肝、抑菌等作用[1]。蒼術(shù)主要成分為揮發(fā)油，其中主要活性成分為倍半萜類和聚乙烯炔類成分，蒼術(shù)素屬聚乙烯炔類成分[2]。舒肝平胃丸收載于《中國藥典》2010版，其中記載厚樸中厚樸酚與和厚樸酚的含量測定，難以控制藥品的質(zhì)量，因此建立其他中藥含量的測定方法，具有十分重要的意義。蒼術(shù)中蒼術(shù)素的含量測定方法報(bào)道較多[3-11]，本文在文獻(xiàn)報(bào)道及法定標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，建立HPLC法測定舒肝平胃丸中蒼術(shù)素含量的方法。結(jié)果表明，該方法簡便、準(zhǔn)確、靈敏、穩(wěn)定，可用于制劑的質(zhì)量控制，現(xiàn)具體報(bào)道如下。

1 材料

1.1 儀器

浙江福立FL2200I高效液相色譜儀(二元高壓泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、紫外檢測器)，N2200工作站；電子天平；超聲波儀。

1.2 試藥

蒼術(shù)素(批號111924-201303)，購自中國食品藥品檢定研究院；甲醇為色譜純，水為重蒸水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動(dòng)相：甲醇-水(79∶21)；檢測波長340nm，柱溫30℃。進(jìn)樣量：10μL；流速：1.0mL·min-1；理論塔板數(shù)按蒼術(shù)素峰計(jì)算不低于3 000。

2.2 供試品溶液制備

取舒肝平胃丸適量，研細(xì)，取約1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理(功率350W，頻率35kHz)1h，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)充減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，即得。

2.3 對照品溶液制備

取蒼術(shù)素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成25μg·mL-1溶液，即得。

2.4 陰性對照溶液制備

取不含蒼術(shù)的陰性對照樣品(以舒肝平胃丸制法制備)，按供試品溶液制備方法制得陰性對照溶液。

2.5 線性關(guān)系考察

分別精密吸取對照品溶液，進(jìn)樣，進(jìn)樣量分別為2、5、10、15、20μL，記錄色譜圖，以峰面積(A)對進(jìn)樣量進(jìn)行回歸，線性方程為：Y=0.094 2X+0.046 9，r=0.999 8，線性關(guān)系良好，線性范圍為0.050 6～0.506 0μg。

2.6 干擾性試驗(yàn)

取不含蒼術(shù)的陰性樣品，按供試品溶液制備方法處理，進(jìn)樣，陰性樣品對蒼術(shù)素?zé)o干擾。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

取舒肝平胃丸，按“2.2”項(xiàng)方法制備6份，按“2.1”項(xiàng)色譜條件測定，以含量為指標(biāo)計(jì)算RSD，考察方法重復(fù)性。結(jié)果顯示：蒼術(shù)素含量平均值為0.530mg/g，RSD為0.90%，表明該方法重復(fù)性良好。見表1。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“2.2”項(xiàng)制備的供試品溶液，分別于0、2、4、8、12、16h按“2.1”項(xiàng)色譜條件測定。以峰面積為指標(biāo)計(jì)算RSD，考察供試品溶液的穩(wěn)定性。結(jié)果顯示：蒼術(shù)素在6個(gè)時(shí)間點(diǎn)所測各色譜峰峰面積的RSD為1.19%，表明供試品溶液在16h內(nèi)穩(wěn)定。見表2。

表1 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (mg/g)

表2 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果 (mg/g)

圖1 舒肝平胃丸及對照品HPLC色譜

2.9 加樣回收率試驗(yàn)

取已知蒼術(shù)素含量的供試品5份，分別加入定量蒼術(shù)素對照品，按擬定含量測定方法提取測定蒼術(shù)素含量。結(jié)果顯示：平均回收率為100.2%，RSD為0.41%。見表3。

2.10 三批樣品測定

按擬定含量測定方法測定3批樣品中蒼術(shù)素含量，不同批號的蒼術(shù)素含量穩(wěn)定，可作為本品質(zhì)量控制指標(biāo)。結(jié)果見表4。

表3 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果 (%)

表4 樣品測定結(jié)果 (mg/g)

3 討論

本文色譜條件的線性關(guān)系、重復(fù)性、穩(wěn)定性、加樣回收率均良好，方法可行。舒肝平胃丸中蒼術(shù)素分離度好，完全分離，為控制該品質(zhì)量提供較好的方法。該方法樣品處理簡單易行，能提高藥品檢驗(yàn)效率。

3.1 色譜條件的選擇

流動(dòng)相分別選擇甲醇-水(79∶21)、甲醇-水(77∶23)和甲醇-水(80∶20)進(jìn)行試驗(yàn)，其中甲醇-水(77∶23)組出峰時(shí)間過長，達(dá)到23min；甲醇-水(80∶20)組出峰時(shí)間較短，7min左右，但分離度不好，與其他成分未能完全分離。甲醇-水(79∶21)組較為合適，出峰時(shí)間為11～12min，分離度好，與其他成分完全分離。

3.2 樣品處理

對樣品分別進(jìn)行加熱回流處理和超聲波處理，經(jīng)比較加熱回流方法提取較完全，但操作不方便，時(shí)間比較長；超聲波法提取較加熱回流法不完全，但操作簡便，故選擇超聲波法。分別對超聲時(shí)間0.5、1.0、1.5h進(jìn)行試驗(yàn)，其中1h組提取較完全，且省時(shí)，故超聲波處理時(shí)間選擇1h。

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(責(zé)任編輯：李嵐春)

2014-11-20

劉加寶(1977-)，男，碩士，牡丹江大學(xué)副教授，研究方向?yàn)樯镏扑?。E-mail：baobao6927903@163.com

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