王月英

(烏海市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心，內(nèi)蒙古 烏海 016000)

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蒙藥“掃腰13味散”中梔子苷含量測定

王月英

(烏海市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心，內(nèi)蒙古 烏海 016000)

目的：采用高效液相色譜法測定掃腰13味散中梔子苷的含量。方法：色譜柱為Luna C18柱，流動相為乙腈-水(12∶88)，流速為1.0mL/min，柱溫為40℃，檢測波長為238nm。結(jié)果：梔子苷在0.149 6～1.496 0μg/mL濃度范圍內(nèi)與其峰面積積分呈良好的線性關(guān)系，r=0.999 5，平均回收率為102.0%，RSD=2.22%。結(jié)論：該法重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，簡單易操作，可作為掃腰13味散的質(zhì)量控制方法。

掃腰13味散；梔子苷；高效液相色譜法；含量測定

掃腰13味散為傳統(tǒng)蒙藥，由檀香、毛訶子、梔子、苘麻子、天竺黃等13味藥組成，主要用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療。方中梔子為君藥，其主要有效成分為梔子苷，因此通常以其含量作為掃腰13味散的質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。 本研究采用高效液相色譜法測定掃腰13味散中梔子苷的含量，各組分分離狀況良好，專屬性強(qiáng)，回收率高，為該制劑的質(zhì)量控制提供了參考依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Alltech高效液相色譜儀， 包括426HPLC 泵、UVIS200型紫外檢測器、plus client工作站。

1.2 試藥

梔子苷對照品(批號：110749-201316，中國食品藥品檢定研究院)；乙腈、甲醇均為HPLC級，水為UP水，其他試劑均為優(yōu)級純。

樣品來源：掃腰13味散 (批號：20131107、20130623、20130505，同比例自制樣品：20130811)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱為Luna-C18(250mm×4.6mm，5μm)，流動相為乙腈∶水=12∶88，檢測波長為238nm，溫度為40℃，進(jìn)樣量為20μL，理論塔板數(shù)按梔子苷峰計(jì)應(yīng)不低于2 500。在上述條件下，梔子苷與其他雜質(zhì)具有較好的分離度。

2.2 樣品制備方法

2.2.1 對照溶液制備 精密稱取梔子苷對照品7.48mg，加甲醇溶解，并稀釋至50mL，混勻，精密量取2mL，加甲醇稀釋至10mL，充分混勻，制成每1mL含30μg梔子苷的對照品溶液。

2.2.2 試樣制備 精密稱取掃腰13味散0.6g，置于具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱重，超聲處理20min，放冷后稱重，用甲醇補(bǔ)足減失量，混勻，過濾，精密量取續(xù)濾液10mL，加甲醇稀釋至20mL，混勻即得。

2.3 線性范圍考察

精密稱取梔子苷7.48mg，加甲醇溶解并稀釋至50mL，搖勻。分別精密量取上述溶液0.5、1、2、3、4、5mL置于容量瓶中，加甲醇稀釋至10mL，搖勻。各取20μL進(jìn)樣，按上述色譜條件測定，以峰面積積分為縱坐標(biāo)，梔子苷濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行回歸分析，得線性回歸方程為Y=722 741X-6 843.9，r=0.999 5，梔子苷在0.149 6～1.496 0μg/mL濃度范圍內(nèi)與其峰面積積分呈良好的線性關(guān)系。

2.4 重現(xiàn)性考察

取同一批試樣6份，按上述色譜條件進(jìn)樣檢測，測得梔子苷平均含量為2.94mg/g，RSD=0.5%，表明該方法重現(xiàn)性良好。

2.5 回收率試驗(yàn)

取試樣(梔子苷含量2.943mg/g)9份，各約0.3g，精密稱定，分別置于具塞錐形瓶中，向其中3個(gè)具塞錐形瓶中分別精密加入濃度為0.146 0mg/mL梔子苷對照品溶液3mL及甲醇22mL，另外3個(gè)具塞錐形瓶中分別精密加入0.146 0mg/mL梔子苷對照品溶液6mL及甲醇19mL，最后3個(gè)具塞錐形瓶中分別精密加入0.146 0mg/mL梔子苷對照品溶液9mL 及甲醇16mL。按照上述色譜方法進(jìn)樣，測定每份試樣梔子苷含量，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。

表1 梔子苷回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.6 精密度實(shí)驗(yàn)

精密吸取同一試樣溶液20μL，按照上述色譜條件，重復(fù)進(jìn)樣測定5次，得出梔子苷平均峰面積積分為401 025，RSD為0.3%，表明該方法精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一份試樣溶液，分別于放置0、2、4、8、12h后進(jìn)樣測定梔子苷含量，得出梔子苷平均峰面積積分為416 223，RSD為0.2%，表明梔子苷對照品溶液在12h內(nèi)可保持較好的穩(wěn)定性。

2.8 干擾試驗(yàn)

分別取對照品、試樣及陰性對照溶液適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣檢測。在色譜圖中，陰性對照溶液在梔子苷峰相同位置處無色譜峰，表明陰性對照溶液無干擾，該方法專屬性較好。

2.9 試樣含量測定

取4批試樣適量，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備樣品溶液，按照上述色譜條件進(jìn)樣測定峰面積，代入線性方程后計(jì)算梔子苷含量，結(jié)果見表2。

3 討論

本研究采用高效液相色譜法測定掃腰13味散中梔子苷的含量，各組分分離狀況良好，專屬性強(qiáng)，回收率高，為該制劑的質(zhì)量控制提供了參考依據(jù)。

表2 掃腰13味散梔子苷含量測定結(jié)果

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2010.

(責(zé)任編輯：尹晨茹)

2014-12-26

王月英(1970-)，女，內(nèi)蒙古烏海市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心主管藥師，研究方向?yàn)槊褡遽t(yī)藥標(biāo)準(zhǔn)。

R291.2;R284.1

A

1673-2197(2015)04-0022-02

10.11954/ytctyy.201504011