臨床上常規(guī)的巨細(xì)胞病毒（cytomegalovirus，CMV）檢測(cè)目前多數(shù)都是孕早期的TORCH四項(xiàng)或五項(xiàng)篩查，通過酶聯(lián)免疫法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）或免疫熒光法（immunofluorescence assay，IFA）檢測(cè)血清中的IgG、IgM抗體。人巨細(xì)胞病毒（Human cytomegalovirus，HCMV）感染可造成孕婦的宮內(nèi)感染并引起母嬰間的傳播感染，表現(xiàn)為胎兒的流產(chǎn)、畸形、死胎、早產(chǎn)或新生兒的身心缺陷和器官功能的發(fā)育異常等，因此，開展巨細(xì)胞病毒檢測(cè)對(duì)于優(yōu)生尤為重要，但實(shí)際檢測(cè)效果及臨床意義卻不盡如人意，國內(nèi)外學(xué)者對(duì)是否應(yīng)進(jìn)行這種篩查或是否應(yīng)將TORCH項(xiàng)目全部檢測(cè)出現(xiàn)了許多不同的觀點(diǎn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 巨細(xì)胞病毒現(xiàn)狀

人巨細(xì)胞病毒（Human cytomegalovirus，HCMV）是皰疹病毒科B亞科的一種，巨細(xì)胞病毒含有約235kb，與其他皰疹病毒比較而言是其中最大的一種[1]。人群中HCMV的感染率很高，在歐美等發(fā)達(dá)國家HCMV的感染率約為60%；而在發(fā)展中國家或在社會(huì)經(jīng)濟(jì)較低的團(tuán)體及某些特殊的人群中，HCMV的抗體檢出率約50%～80%[2，3]。HCMV在自然界中廣泛存在，人是它的唯一宿主，正常人群中的自然感染也非常普遍。HCMV一旦感染可在體內(nèi)長期潛伏。孕期婦女的HMCV感染是引發(fā)宮內(nèi)感染，造成胎兒損害的最常見病原體，HCMV感染可以影響胎兒神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，是引發(fā)智力遲鈍的重要原因之一，僅次于唐氏綜合征，研究發(fā)現(xiàn)先天性耳聾患者中是有一半是巨細(xì)胞病毒感染引起的，且原發(fā)性感染較繼發(fā)性感染，其對(duì)胎兒的損害及引發(fā)的臨床癥狀更為嚴(yán)重。在正常健康人中可引起單核細(xì)胞增多癥；也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，巨細(xì)胞病毒感染與人群發(fā)生高血壓存在相關(guān)性[4]。HCMV也是器官移植失敗和艾滋病患者并發(fā)感染死亡的主要原因之一。對(duì)非免疫缺陷者常導(dǎo)致長期隱性感染，甚至引起感染細(xì)胞的轉(zhuǎn)化、畸變或癌變等。目前對(duì)于HCMV感染的實(shí)驗(yàn)室診斷研究主要集中于孕婦的篩查、產(chǎn)前診斷、新生兒的早期診斷、患者免疫狀態(tài)評(píng)價(jià)及器官移植受者感染的檢測(cè)等。

2 巨細(xì)胞病毒的免疫原性物質(zhì)

HcMV呈球形，直徑約200nm，由核心DNA、衣殼、被膜和包膜等幾部分組成.基因全長約為240kb，由一個(gè)短的單一序列US和一個(gè)長的單一序列UL，以及二者之間和兩端的重復(fù)序列組成，可編碼200多種蛋白質(zhì)，包括超過65種糖蛋白，其中至少有10種包膜糖蛋白。

pp65是HCMV被膜蛋白中最主要的一種，主要參與病毒基因調(diào)節(jié)以及改變宿主細(xì)胞的代謝，pp65具有高度的保守性[5]，含有IgM結(jié)合表位，對(duì)判斷急性感染具有重要的意義。Rolf等的實(shí)驗(yàn)表明pp150的495～691aa片段是確診HCMV既往感染的最適抗原（IgG結(jié)合表位），在檢測(cè)HCMV原發(fā)及急性期感染中起著極其重要的作用。

gB（glycoproteill B，gB）糖蛋白是其中一種，免疫原性最強(qiáng)，與病毒穿入宿主細(xì)胞、在細(xì)胞間傳播和誘導(dǎo)宿主的免疫應(yīng)答等密切相關(guān).gB糖蛋白免疫原性強(qiáng)，有多種免疫原性表位，其中包括一些中和抗體結(jié)合表位.gB是抗HcMV中和抗體最主要的靶蛋白，40%～70%的自然感染人群血清中和抗體針對(duì)gB。AD-1是gB免疫優(yōu)勢(shì)的中和抗體表位，50%的gB中和抗體針對(duì)AD-1 gB。AD-2也是gB的中和抗體表位，但免疫原性弱。

gH在病毒膜蛋白中的作用主要是通過與細(xì)胞膜上的αγβ3受體結(jié)合，該復(fù)合物與gB-EGFR共同作用進(jìn)一步促進(jìn)病毒囊膜與細(xì)胞的融合。gH同樣具有三個(gè)中和性抗原表位區(qū)段，但這些抗原表位區(qū)具有明顯的病毒株特異性。抗原區(qū)段A含有三個(gè)表位，區(qū)段B含有2個(gè)表位，區(qū)段AB只有一個(gè)表位。抗原區(qū)段A中的2個(gè)表位和區(qū)段B中的一個(gè)表位具有多變性，而抗原區(qū)段A中的另一個(gè)表位和區(qū)段B中的另一表位及區(qū)段AB的表位具有保守性。

gM或gM/gN復(fù)合物的中和性作用是最近才研究證實(shí)。gN的作用一方面與gM構(gòu)成復(fù)合物在病毒感染過程中產(chǎn)生中和性抗體，另一方面與病毒的復(fù)制有關(guān)。gM是病毒的第三類膜蛋白，分子量約為42～45kDa，經(jīng)計(jì)算機(jī)預(yù)測(cè)gM蛋白含有7個(gè)跨膜區(qū)段。在病毒外膜上gM與gN形成異源二聚體而存在。盡管其中和性抗原的性質(zhì)已經(jīng)得到確認(rèn)，但到目前為止有關(guān)gM的表位研究還未見報(bào)道。

3 HCMV抗體檢測(cè)

病毒感染后機(jī)體產(chǎn)生體液免疫，特異性IgG、IgM抗體迅速升高，IgG抗體可維持終生，一般在感染后4d產(chǎn)生，IgM抗體，持續(xù)6～12w，偶有持續(xù)一年之多的報(bào)道。目前抗體檢測(cè)的方法按所用抗原的不同大致分為3類，即基于病毒裂解物抗原、基因工程重組蛋白抗原及化學(xué)合成多肽抗原的檢測(cè)方法。

傳統(tǒng)的抗體檢測(cè)以病毒裂解物作為抗原，存在的缺點(diǎn)有：①包含許多病毒抗原，抗原表位不確定，難以標(biāo)準(zhǔn)化；②需要在成纖維細(xì)胞中進(jìn)行病毒培養(yǎng)，可導(dǎo)致潛在細(xì)胞蛋白的污染，出現(xiàn)假陽性；③與皰疹病毒科其他病毒感染所產(chǎn)生的抗體存在交叉反應(yīng)，出現(xiàn)假陽性。

重組蛋白及合成肽其敏感性和特異性高，但也存在其局限性。重組蛋白經(jīng)蛋白純化后，可能會(huì)造成部分甚至全部抗原反應(yīng)性的喪失。合成肽因?yàn)槠屋^短，雖可以同時(shí)包含多個(gè)抗原表位，但由于肽段的空間結(jié)構(gòu)與天然蛋白的空間結(jié)構(gòu)存在差異性，多表現(xiàn)為線性表位，故可影響檢測(cè)效果。合成肽與重組蛋白混合使用，可提高檢出率。

4 HCMV抗體檢測(cè)的意義

IgM抗體陽性提示活動(dòng)性感染。機(jī)體感染病毒3個(gè)月以后IgM抗體已基本消失，所以只有活動(dòng)性感染時(shí)才可能檢出IgM抗體。

IgM抗體陰性，IgG抗體陽性多提示既往感染。機(jī)體一旦感染病毒即會(huì)有IgG產(chǎn)生而且會(huì)終生保持，所以檢出IgG抗體即表明曾經(jīng)感染過。

IgG抗體親和指數(shù)（AI）判斷區(qū)分原發(fā)與非原發(fā)感染。在原發(fā)感染和非原發(fā)感染中及其感染的不同階段IgG-AI是變化的，在原發(fā)感染中IgG的親和力相比較低，因此母體也更容易將病毒傳染給胎兒，而且孕婦的原發(fā)感染對(duì)胎兒的影響更為嚴(yán)重。

檢測(cè)IgG抗體滴度變化指示急性感染。由于急性感染后IgG效價(jià)由低升高，所以檢測(cè)兩次血清IgG抗體效價(jià)，若第二次較第一次的血IgG抗體效價(jià)有明顯升高（如4倍）也可作急性感染的診斷指標(biāo)（兩次采血應(yīng)有2w左右的間隔時(shí)間）。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉剛，李書琴，胡恩赑，等.人巨細(xì)胞病毒的定量檢驗(yàn)和臨床意義[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2012，12（33）：6597-6600.

[2]張健，李雪麗.無償獻(xiàn)血者巨細(xì)胞病毒感染標(biāo)志物的檢測(cè)[J].中國輸血雜志，2002，15（3）：187.

[3]呂靜娟，胡文勝，余堅(jiān).溫州市區(qū)育齡婦女孕前巨細(xì)胞病毒感染現(xiàn)狀調(diào)查[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志，2011，19（2）：100-101.

[4]馬晨蕓，王克翔.巨細(xì)胞病毒對(duì)人群發(fā)生高血壓的影響[J].海南醫(yī)學(xué)，2015，26（12）：1786-1788.

[5]邱玉紅.人巨細(xì)胞病毒PP65的基礎(chǔ)及應(yīng)用研究[J].國外醫(yī)學(xué)婦保健分冊(cè)，2003，14（2）：92.

編輯/趙恒德