張杰等

摘要

[目的]研究射干中化學(xué)成分。[方法]采用硅膠柱層析和Sephadex LH-20等多種方法進(jìn)行分離純化，并根據(jù)波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。[結(jié)果]從射干中分離得到了11個化合物，除化合物7屬于雙苯吡酮外，其他化合物均屬于異黃酮類。在乙酸乙酯萃取物中分離鑒定了6個化合物，經(jīng)波譜解析分別鑒定為鳶尾苷元（tectorigenin）、鳶尾甲黃素A（tectorigenin A）、野鳶尾黃素（irigenin）、鳶尾甲黃素B（iristectorigenin B）、次野鳶尾黃素（irisflorentin）、白射干素（dichotomitin）；正丁醇萃取物中分離鑒定了5個化合物，分別為芒果苷（mangiferin）、鳶尾甲苷A（iristectoridin A）、鳶尾苷（tectoridin）、鳶尾甲苷B（iristectoridin B）、野鳶尾苷（iridin）。[結(jié)論]該研究結(jié)果涵蓋了異黃酮和雙苯吡酮類成分，為射干藥材進(jìn)一步開發(fā)和利用提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞射干；異黃酮；化學(xué)成分

中圖分類號S567文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2015）24-057-03

射干為鳶尾科植物射干Belamcanda chinensis（L.）DC.的干燥根莖，具有清熱解毒、消痰、利咽的功效，用于咽喉腫痛、痰涎壅盛、咳嗽氣喘，為常用中藥材。射干藥材中主要有效成分為異黃酮類成分，現(xiàn)代研究表明，此類成分具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗病毒、清除自由基及抗癌等重要的藥理與藥效作用?；谄滹@著的藥理活性，因此對射干異黃酮類活性成分探究具有重要的研究價(jià)值。該試驗(yàn)采用硅膠柱層析和Sephadex LH-20柱層析等多種方法對射干中化學(xué)成分進(jìn)行分離純化，并根據(jù)波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，為射干藥材的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1

研究對象。射干來源于泰州市高港中藥飲片有限公司，產(chǎn)地為湖北，經(jīng)嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院王峻副教授鑒定為Belamcanda chinensis（L.）DC.的干燥根莖。

1.1.2

主要儀器。核磁共振儀（Varian INOVA-400型，TMS為內(nèi)標(biāo)），Sephadex LH20（美國GE公司），Waters 1525分析型高效液相色譜儀（美國Waters公司）。

1.1.3

主要試劑。薄層色譜及柱色譜用硅膠（青島遠(yuǎn)洋化工有限公司）；液相用甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

1.2 方法

取射干藥材10 kg粉碎后，過3號篩，用甲醇回流提取3次（每次10倍量，提取2 h）。合并提取液并減壓濃縮得到甲醇提取物，將甲醇提取物分散于水中成懸濁液，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，濃縮得到乙酸乙酯部分（765.3 g）和正丁醇部分（543.6 g）。乙酸乙酯部分經(jīng)硅膠柱色譜粗分，用石油醚-乙酸乙酯（1∶0～0∶1）梯度洗脫，用石油醚-乙酸乙酯（2∶1）薄層檢測，得到9個流分（Fr.1～Fr.9）。其中將Fr.7～9再反復(fù)經(jīng)Sephadex LH20柱層析以及重結(jié)晶分離純化得到化合物1～6。取正丁醇部分經(jīng)硅膠柱色譜粗分，用乙酸乙酯洗脫，乙酸乙酯-甲醇-水（25∶5∶1）薄層檢測，得到6個流分，各部分再反復(fù)經(jīng)SephadexLH20柱層析得到化合物7～11。

2結(jié)果與分析

2.1化合物1

白色針晶，分離得到107.2 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.04（1H，s，OH-5）、8.29（1H，s，H-2′）、7.37（2H，d，J=8 Hz，H-2′，6′）、6.82（2H，d，J=8Hz，H-3′，5′）、6.47（1H，s，H-8）、3.75（3H，s，O-CH3-6）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為180.5（C-4）、158.1（C-5）、131.6（C-6）、154.0（C-7）、94.0（C-8）、153.2（C-9）、104.7（C-10）、121.8（C-1′）、130.2（C-2′，6′）、115.1（C-3′，5′）、157.4（C-4′）、60.0（OCH3-6）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]一致，故鑒定化合物1為鳶尾苷元（tectorigenin）。

2.2化合物2

白色針晶，分離得到62.7 mm。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.06（1H，s，OH-5）、1075（1H，s，OH-7）、9.14（1H，s，OH-3′）、8.34（1H，s，H-2）、6.49（1H，s，H-8）、6.83（1H，d，J=8Hz，H-5′）、6.94（1H，dd，J=8Hz，1.6Hz，H-6′）、6.99（1H，d，J=1.6Hz，H-2′）、3.80（3H，s，OCH3-6）、3.75（3H，s，OC-H3-4′）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為152.7（C-2）、121.9（C-3）、180.6（C-4）、157.5（C-5）、131.4（C-6）、154.3（C-7）、93.9（C-8）、153.3（C-9）、104.9（C-10）、121.7（C-1′）、113.3（C-2′）、146.7（C-3′）、147.3（C-4′）、115.3（C-5′）、121.6（C-6′）、60.0（OCH3-6）、55.7（OCH3-4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]一致，故鑒定化合物2為鳶尾甲黃素A（tectorigenin A）。

2.3化合物3

淡黃色針晶，分離得到413.6 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.03（1H，s，OH-5）、1077（1H，s，OH-7）、9.24（1H，s，OH-3′）、8.37（1H，s，H-2）、6.50（1H，s，H-8）、6.71（1H，d，J=2Hz，H-2′）、6.66（1H，d，J=2Hz，H-6′）、3.70（3H，s，H-2）、3.75（3H，s，OCH3-4′）、3.79（3H，s，OCH3-5′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]一致，故鑒定化合物3為野鳶尾黃素（irigenin）。

2.4化合物4

淡黃色針晶，分離得到260.1 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.06（1H，s，OH-5）、1075（1H，s，OH-7）、8.32（1H，s，H-2）、6.49（1H，s，H-8）、7.14（1H，d，J=2Hz，H-2′）、6.83（1H，d，J=8Hz，H-5′）、6.98（1H，dd，J=8Hz，H-6′）、9.05 （1H，s，OH-4′）、379（3H，s，OCH3-6）、3.75（3H，s，OCH3-3′）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為154.3（C-2）、121.7（C-3）、180.5（C-4）、153.3（C-5）、131.4（C-6）、157.5（C-7）、93.9（C-8）、152.7（C-9）、104.9（C-10）、121.8（C-1′）、112.0（C-2′）、147.7（C-3′）、146.1（C-4′）、116.4（C-5′）、121.6（C-6′）、55.7（OCH3-6）、59.9（OCH3-3′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]一致，故鑒定化合物4為鳶尾甲黃素B（iristectorigenin B）。

2.5化合物5

白色針晶，分離得到302.4 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為8.29（1H，s，H-2）、7.00（1H，s，H-8）、6.18（2H，s，OCH2O）、6.83（2H，s，H-2′， 6′）、3.80（6H，s，OCH3-2′， 6′）、3.69（3H，s，OCH3-4′）、3.91（3H，s，OCH3-5）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]一致，故鑒定化合物5為次野鳶尾黃素（irisflorentin）。

2.6化合物6

淡黃色針晶，分離得到124.3 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.89（1H，s，OH-5）、9.26（1H，s，OH-3′）、8.47（1H，s，H-2）、6.68（1H，s，H-8）、673（1H，s，H-2′）、6.87（1H，s，H-6′）、6.18（2H，s，OCH2O）、3.79（3H，s，OCH3-4′）、3.70（3H，s，OCH3-5′）。13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為155.2（C-2）、122.1（C-3）、180.6（C-4）、154.0（C-5）、129.7（C-6）、141.4（C-7）、89.6（C-8）、150.3（C-9）、107.4（C-10）、125.8（C-1′）、110.4（C-2′）、150.3（C-3′）、136.5（C-4′）、153.0（C-5′）、104.6（C-6′）、103.0（OCH2O）、60.0（OCH3-4′）、55.8（OCH3-5′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]一致，故鑒定化合物6為白射干素（dichotomitin）。

2.7化合物7

淡灰黃色針晶，分離得到62.4 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為13.75（1H，s，OH-1）、10.58（3H，brs，OH-3，6，7）、7.33（1H，s，H-8）、6.80（1H，s，H-5）、6.36（1H，s，H-4）、4.57（1H d， J=7.6Hz，H-1′）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為179.1（C-9）、164.0（C-3）、161.9（C-1）、156.4（C-4a）、155.3（C-6）、151.2（C-10a）、144.3（C-7）、111.3（C-8a）、107.8（C-8）、107.6（C-2）、102.6（C-5）、101.4（C-9a）、93.5（C-4）、81.6（C-5′）、79.1（C-1′）、73.3（C-2′）、70.8（C-3′）、70.4（C-54′）、61.6（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]一致，故鑒定化合物7為芒果苷（mangiferin）。

2.8化合物8

黃色粉末，分離得到114.8 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.94（1H，s，OH-5）、9.16（1H，s，OH-3′）、8.46（1H，s，H-2）、6.89（1H，s，H-8）、716（1H，s，H-2′）、6.84（1H，d，J=7.6Hz，H-5′）、 7.01（1H，d，J=7.6Hz，H-6′）、 3.80（3H，s，OCH3-6）、3.77（3H，s，OCH3-4′）、5.09（1H，d，J=7.2Hz，Glc-1）、3.19～4.62（葡萄糖上氫質(zhì)子信號）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為152.4（C-2）、122.1（C-3）、180.7（C-4）、154.9（C-5）、132.5（C-6）、156.6（C-7）、94.0（C-8）、152.9（C-9）、106.4（C-10）、121.7（C-1′）、113.3（C-2′）、146.8（C-3′）、147.3（C-4′）、115.3（C-5′）、121.5（C-6′）、55.7（OCH3-4′） 、60.3（OCH3-6）、100.1（C-1′′）、73.1（C-2′′）、 76.7 （C-3′′）、69.6 （C-4′′）、 77.3 （C-5′′）、60.6 （C-6′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]一致，鑒定化合物8為鳶尾甲苷A（iristectoridin A）。

2.9化合物9

白色結(jié)晶，分離得到214.8 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.93（1H，s，OH-5）、9.59（1H，s，OH-4′）、8.44（1H，s，H-2）、6.89（1H，s，H-8）、740（2H，d，J=8Hz，H-3′，5′）、6.83（2H，d，J=8Hz，H-2′，6′）、3.77（3H，s，OCH3-6）、5.07（1H，d，J=8Hz，Glc-1）、318～3.48（葡萄糖上氫質(zhì)子信號）。結(jié)合化合物1以及文獻(xiàn)[14]數(shù)據(jù)進(jìn)行對比，鑒定化合物9為鳶尾苷（tectoridin）。

2.10化合物10

白色粉末，分離得到132.5 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.93（1H，s，OH-5）、9.06（1H，s，OH-3′）、8.43（1H，s，H-2）、6.88（1H，s，H-8）、682（1H，d， J=8.0Hz，H-2′）、7.01（1H，dd，J=1.8，8.0Hz，H-6′）、 7.15（1H，d，J=1.8Hz，H-5′）、 3.79（3H，s，OCH3-6）、3.77（3H，s，OCH3-3′）、5.09（1H，d， J=7.2Hz，Glc-1）；13C-NMR（100 MHz，DMSO-d6），δ分別為152.4（C-2）、123.1（C-3）、180.7（C-4）、154.9（C-5）、132.5（C-6）、156.6（C-7）、94.0（C-8）、152.9（C-9）、106.4（C-10）、121.6（C-1′）、112.0（C-2′）、147.8（C-3′）、146.1（C-4′）、116.3（C-5′）、121.6（C-6′）、55.6（OCH3-4′）、60.3（OCH3-6）、100.1（C-1′′）、 73.1（C-2′′）、77.3 （C-3′′）、69.6 （C-4′′）、76.7 （C-5′′）、60.6（C-6′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]一致，鑒定化合物10為鳶尾甲苷B（iristectoridin B）。

2.11化合物11

白色粉末，分離得到342.7 mg。1H-NMR（400 MHz，DMSO-d6），δ分別為12.93（1H，s，OH-5）、9.16（1H，s，OH-3′）、8.44（1H，s，H-2）、6.84（1H，s，H-8）、370（3H，s，OCH3-6）、3.75（3H，s，OCH3-4′）、3.79（3H，s，OCH3-5′）、5.08（1H，d，J=8Hz，Glc-1）、3.16～3.50（葡萄糖上氫質(zhì)子信號）。結(jié)合化合物3以及文獻(xiàn)[16]數(shù)據(jù)進(jìn)行對比，鑒定化合物11為野鳶尾苷（iridin）。

3結(jié)論

該研究采用硅膠柱層析、Sephadex LH-20柱層析和重結(jié)晶等方法進(jìn)行分離純化，并根據(jù)波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，系統(tǒng)分析射干中苷和苷元類的化學(xué)成分。結(jié)果表明，在乙酸乙酯萃取物中分離鑒定了6個化合物，經(jīng)波譜解析分別鑒定為鳶尾苷元（tectorigenin，1）、鳶尾甲黃素A（tectorigenin A，2）、野鳶尾黃素（irigenin，3）、鳶尾甲黃素B（iristectorigenin B，4）、次野鳶尾黃素（irisflorentin，5）、白射干素（dichotomitin，6）；正丁醇萃取物中分離鑒定了5個化合物，分別為芒果苷（mangiferin，7）、鳶尾甲苷A（iristectoridin A，8）、鳶尾苷（tectoridin，9）、鳶尾甲苷B（iristectoridin B，10）、野鳶尾苷（iridin，11）?？梢?，從射干中分離得到了11個化合物，除化合物7屬于雙苯吡酮外，其他化合物均屬于異黃酮類。該研究結(jié)果涵蓋了異黃酮和雙苯吡酮類成分，為其進(jìn)一步的研究提供物質(zhì)基礎(chǔ)及對其藥用資源開發(fā)起到較好的促進(jìn)作用。

參考文獻(xiàn)

[1]

國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：2010年版一部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：267-268.

[2] 吉文亮，秦民堅(jiān)，王靖濤.中藥射干的化學(xué)與藥理研究進(jìn)展[J].國外醫(yī)藥·植物藥分冊，2000，15（2）：57-58.

[3] PUAPAIROJ P，NAENGCHOMONG W，KIJJOA A，et al.Cytotoxic activity of lupinetype triterpenes from Glachidion sphaerogynum and Glachidion eriocarpum[J].Planta Med，2004，70：1234-1236.

[4] 韓楊，孔紅，李宜平，等.射干的抗病毒實(shí)驗(yàn)研究[J].中草藥，2004，55（5）：306-308.

[5] 吳澤芳，熊朝敏.射干與鳶尾抗炎作用的比較[J].藥物分析雜志，1985，5（5）：167-168.

[6] 于軍，徐麗華，王云，等.射干和馬齒莧對48株綠膿桿菌體外抑菌試驗(yàn)的研究[J].白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，27（2）：150-151.

[7] 張良，張玉奎，陳艷，等.射干葉中異黃酮類化學(xué)成分的研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2011，23（1）：69-71.

[8] 楊勇勛，董小萍.川射干的化學(xué)成分研究[J].中藥與臨床，2010，1（1）：20-22.

[9] 邱鷹昆，高玉白，徐碧霞，等.射干的化學(xué)成分研究[J].中國藥學(xué)雜志，2006，41（15）：1133-1135.

[10] 李英娜，張國剛，毛德雙，等.射干化學(xué)成分的研究[J].中南藥學(xué)，2007，5（3）：222-224.

[11] 周立新，林茂，赫蘭峰.射干的化學(xué)成分研究[J].中草藥，1996，27（1）：8-10.

[12] 胡彥君，劉燊，王定勇.芒果葉的化學(xué)成分研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2010，6（2）：18-19.

[13] 黃龍，楊峻山，彭勇，等.白射干的化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志，2010，35（23）：3168-3171.

[14] 李應(yīng)勤，陸蘊(yùn)茹，魏璐雪.白射干黃酮類成分的研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，1986，21（11）：836-841.

[15] 賞后勤，秦民堅(jiān)，吳靳榮.川射干的化學(xué)成分[J].中國天然藥物，2007，5（4）：312-314.

[16] 袁崇均，玉茄，陳帥，等.川射干化學(xué)成分的研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2008，20（3）：444-446.