祖 雙，劉黎峰，梁 潔，劉明穎，肖 雪2,,4，羅國(guó)安

(1.吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司，吉林 延邊 133700；2. 廣東藥學(xué)院，廣東 廣州 510006；3.清華大學(xué) 分析中心，北京 100084；4. 中山大學(xué) 南沙研究院， 廣東 廣州 511458)

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兩種相似度表征參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜質(zhì)量研究

祖 雙1，劉黎峰1，梁 潔2*，劉明穎3，肖 雪2,3,4，羅國(guó)安3

(1.吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司，吉林 延邊 133700；2. 廣東藥學(xué)院，廣東 廣州 510006；3.清華大學(xué) 分析中心，北京 100084；4. 中山大學(xué) 南沙研究院， 廣東 廣州 511458)

目的：用兩種相似度評(píng)價(jià)方法進(jìn)行參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜相似度的評(píng)價(jià)，為其質(zhì)量控制提供依據(jù)。方法：采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2004A版)和程度相似度對(duì)參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)。結(jié)果：兩種方法對(duì)參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜相似度均有有效表征。結(jié)論：程度相似度可作為參芪王漿養(yǎng)血口服液的質(zhì)量控制方法。

參芪王漿養(yǎng)血口服液；指紋圖譜；相似度

參芪王漿養(yǎng)血口服液是由人參、黃芪、當(dāng)歸、蜂王漿等原料經(jīng)現(xiàn)代生產(chǎn)工藝制成，主要功能為補(bǔ)益氣血、養(yǎng)心安神，可用于氣血兩虛證，癥見神倦乏力、食欲不振、失眠等[1]。在研究過程中，我們采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2004A版)對(duì)其進(jìn)行了相似度評(píng)價(jià)研究[2-4]，發(fā)現(xiàn)其表征參芪王漿養(yǎng)血口服液的整體質(zhì)量存在些許不足。因此本試驗(yàn)引入了程度相似度技術(shù)[5-7]對(duì)參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1100型高效液相色譜儀(包括G13158 DAD檢測(cè)器、G1312A低壓四元泵、在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱)(Agilent科技有限公司，美國(guó))，KQ-500E超聲波清洗器(昆山超聲設(shè)備有限公司)，Mill-Q Synthesis超純水純化系統(tǒng)(美國(guó)Millipore公司)，Excellence XP205型十萬分之一分析天平(Mettler Toledo公司)，SL300N型電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)等。

1.2 材料

乙腈(色譜純、Fisher公司)，甲酸(分析純，北京現(xiàn)代東方精細(xì)化工有限公司)，超純水自制。參芪王漿養(yǎng)血口服液由吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司提供。

1.3 軟件

中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2004A版)(國(guó)家藥典委員會(huì))，程度相似度評(píng)價(jià)軟件V1.0(清華大學(xué)羅國(guó)安教授研究團(tuán)隊(duì)自主研發(fā))

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[8]

Agilent Zorbax-SB C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動(dòng)相：采用梯度洗脫，A相為水，B相為乙腈(0～20min，B：1.0～8.0%；20～35min，B：8.0～40%；35～60min，B：40～95%；60～65min，B：95%～95%)；流速：1.0mL/min，DAD檢測(cè)器，柱溫35 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm，進(jìn)樣量為5μL。所得到的指紋圖譜見圖1。

2.2 中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)

采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2004A版)進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，選取13個(gè)共有峰為參照，將9個(gè)批次指紋圖譜導(dǎo)入中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2004A版)，時(shí)間窗設(shè)置為0.1min，以S1為基準(zhǔn)，設(shè)為中位數(shù)，自動(dòng)匹配，生成對(duì)照?qǐng)D譜，并采用夾角余弦法計(jì)算相似度，結(jié)果見表1。

圖1 參芪王漿養(yǎng)血口服液203nm檢測(cè)結(jié)果

2.3 程度相似度評(píng)價(jià)

程度相似度軟件V1.0是清華大學(xué)羅國(guó)安教授研究團(tuán)隊(duì)自主研發(fā)的一款用于評(píng)價(jià)指紋圖譜量化相似度軟件，其主要原理是通過比較各色譜峰峰面積的差異，來表征指紋圖譜的相似度。本試驗(yàn)選取“2.2”項(xiàng)下13個(gè)指標(biāo)峰的峰面積作為原始參數(shù)，同時(shí)求算13個(gè)指標(biāo)峰的平均值，導(dǎo)入程度相似度軟件，以平均值為目標(biāo)指標(biāo)，計(jì)算各個(gè)指標(biāo)峰的程度相似度，并計(jì)算13個(gè)指標(biāo)峰的平均程度相似度作為該指紋圖譜的程度相似度。結(jié)果見表1。

表1 9批成品相似度評(píng)價(jià)結(jié)果

3 討論

按照國(guó)家藥典委員會(huì)關(guān)于“中藥注射液指紋圖譜研究的技術(shù)要求(暫行)通知”，采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)(2004A版)計(jì)算的相似度均≥0.85，其結(jié)果表明，參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜方法可操作性強(qiáng)、重復(fù)性好，也說明了在此指紋圖譜條件下參芪王漿養(yǎng)血口服液中含有的物質(zhì)基礎(chǔ)變化不大。此相似度評(píng)價(jià)技術(shù)可以作為參芪王漿養(yǎng)血口服液指紋圖譜的初步評(píng)價(jià)基礎(chǔ)。

采用程度相似度軟件得到的相似度數(shù)據(jù)參差不齊，整體數(shù)據(jù)偏低，同時(shí)程度相似度計(jì)算的是各個(gè)指標(biāo)峰的峰面積，其代表了該指標(biāo)峰所表征的物質(zhì)含量，因此，程度相似度的數(shù)據(jù)一定程度上表明了參芪王漿養(yǎng)血口服液中主要指標(biāo)成分的含量差異較大。

目前諸多中藥(原藥材、提取物、中間體、成品等)采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，均取得了較好的研究結(jié)果[9]。我們建議在保證采用中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)得到良好的質(zhì)量保證之后，開展對(duì)中藥的主要成分進(jìn)行含量穩(wěn)定性的控制研究，而采用程度相似度技術(shù)則是一個(gè)較好的選擇。

[1] 金光日，洪海. 參芪王漿養(yǎng)血口服液中10-羥基-2-癸烯酸(10-HAD)的含量測(cè)定[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，23(5)：32-33.

[2] 羅國(guó)安，梁瓊麟，王義明.中藥指紋圖譜-質(zhì)量控制與新藥研發(fā)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2009.

[3] 羅國(guó)安，王義明.中藥指紋圖譜的分類和發(fā)展[J]. 中國(guó)新藥雜志，2002(11):46-51.

[4] 肖雪，羅國(guó)安，王義明，等.中藥板藍(lán)根高效液相色譜法指紋圖譜研究[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，22(3)：67-69.

[5] 段和祥，劉永鎖，羅國(guó)安，等.程度相似度結(jié)合聚類分析在金銀花藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)中的應(yīng)用[J]. 中成藥，2007，29(3)：318-321.

[6] 劉永鎖，孟慶華，蔣淑敏，等. 相似系統(tǒng)理論用于中藥色譜指紋圖譜的相似度評(píng)價(jià)[J]. 色譜，2005，23(2)：158-163.

[7] 聶磊，曹進(jìn)，羅國(guó)安，等.中藥指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)方法的比較[J].中成藥，2005，27(3)：249-252.

[8] 祖雙，梁潔，劉明穎，等.參芪王漿養(yǎng)血口服液高效液相指紋圖譜研究[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2014,11(2)：19-21.

[9] 曹進(jìn)，饒毅，沈群，等. 中藥指紋圖譜及其建立原則[J].中藥新藥與臨床藥理，2001，12(3)：200-203.

(責(zé)任編輯：宋勇剛)

The Quality Study of Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root by Two Kinds of Similarity Methods

Zu Shuang1, Liu Lifeng1, Liang Jie2*, Liu Mingying3, Xiao Xue2, 3, 4, Luo Guoan3

(1.Jilin Aodong Medicine Industry Group Co., Ltd., Yanbian 133700, China; 2.Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China; 3.Analysis Center, Tsinghua Unviersity, Beijing 100084, China; 4.Nansha Research Institute, Sun Yat-sen University, Guangzhou 511458, China)

Objective:To evaluate the quality of Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root (NOLRJGA) by two kinds of similarity methods.Methods:The chromatographic fingerprint similarity evaluation system (2004 A) and the extent similarity were used to evaluate the fingerprints of NOLRJGA.Results: The two kinds of similarity methods were useful to evaluate the quality of NOLRJGA. Conclusion:The extent similarity could be an effective method to control the quality of NOLRJGA.

Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root, Fingerprint, Similarity

2014-09-27

祖雙(1970-)，男，吉林敖東延邊藥業(yè)股份有限公司主管藥師，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量控制。

梁潔(1969-)，女，廣東藥學(xué)院副教授，研究方向?yàn)槭称焚|(zhì)量安全及中藥質(zhì)量控制。

R284

A

1673-2197(2015)03-0030-02

10.11954/ytctyy.201503012