崔偉偉

(南京市中醫(yī)藥研究院，江蘇 南京 210028)

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白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型小鼠的影響研究

崔偉偉

(南京市中醫(yī)藥研究院，江蘇 南京 210028)

目的：觀察白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型小鼠的抗疲勞作用、抗應(yīng)激反應(yīng)能力、血清總蛋白及白蛋白含量的影響。方法：采用氫化可的松口服給藥造成小鼠陽(yáng)虛模型，分別給小鼠連續(xù)28天灌胃白首烏顆粒藥液11.0、5.5、2.3g生藥/kg。結(jié)果：各給藥組小鼠零度游泳時(shí)間明顯長(zhǎng)于模型對(duì)照組(P<0.05～0.001)；血清總蛋白及白蛋白明顯高于模型對(duì)照組(P<0.05～0.001)。結(jié)論：白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型的小鼠有一定的治療作用，能延長(zhǎng)陽(yáng)虛模型小鼠的游泳時(shí)間，具有明顯的抗疲勞和提高應(yīng)激反應(yīng)能力；可提高陽(yáng)虛小鼠的血清總蛋白、白蛋白含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示提高陽(yáng)虛小鼠的免疫功能是白首烏顆粒的作用機(jī)理之一。

白首烏顆粒；陽(yáng)虛模型；實(shí)驗(yàn)研究

陽(yáng)虛癥為中醫(yī)學(xué)常見(jiàn)病癥，是指機(jī)體陽(yáng)氣虧耗，陽(yáng)不制陰，所表現(xiàn)的虛寒證候。自古以來(lái)的醫(yī)家凡遇陽(yáng)虛之病多采用扶正壯陽(yáng)、溫中驅(qū)寒之法，常用腎氣丸、右歸丸等治療。近年來(lái)，隨著中藥學(xué)的發(fā)展，許多藥學(xué)工作者通過(guò)各種方法，用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(如大、小白鼠，家兔，犬等)造成各種陽(yáng)虛證模型[1]，再以單味中藥或是其復(fù)方制劑給予治療，觀察其療效，研究其作用機(jī)理，以便更好地為臨床服務(wù)。本實(shí)驗(yàn)探討了新藥白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型小鼠的游泳時(shí)間、血清總蛋白和白蛋白的影響。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 動(dòng)物

清潔級(jí)KM種小鼠,體重18～22g,雌雄各半,購(gòu)于上海斯來(lái)克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司(原中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，合格號(hào)：中科動(dòng)管第SCXK(滬)。

1.2 試劑及儀器

供試品：白首烏顆粒浸膏1.5g/mL，由江蘇省中醫(yī)藥研究院中藥分析研究室提供。陽(yáng)性藥：桂附地黃丸：3g生藥/8丸，河南省宛西制藥股份有限公司。氫化可的松注射液：5mL∶25mg，揚(yáng)州制藥有限公司?？捡R斯亮蘭蛋白測(cè)定試劑盒:南京建成生物工程研究所產(chǎn)品；白蛋白測(cè)定試劑盒:南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。PB303-N千分之一電子天平：上海產(chǎn)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型小鼠游泳時(shí)間的影響[2-3]

取小鼠96只，隨機(jī)分為6組，每組16只，雌雄各半，分別為空白對(duì)照組(蒸餾水20mL/kg)、模型對(duì)照組(蒸餾水20mL/kg)、陽(yáng)性對(duì)照桂附地黃丸組(6.6g生藥 /kg)和白首烏顆粒大、中、小三個(gè)劑量組(11.0、5.5、2.3g生藥/kg)，白首烏顆粒大劑量相當(dāng)于臨床人日用量的22倍。各組動(dòng)物每日灌胃 1次，給藥量均為20mL/kg,受試藥用蒸餾水配制，連續(xù)給藥28天，于給藥后第15天，除空白組外，各組動(dòng)物在給藥的同時(shí)灌胃氫化可的松1mg/只(5mg/mL)，連續(xù)14天。末次給藥后1h將小鼠放入冰水中(零度)游泳，以小鼠頭沉入水中10s為體力耗竭，記錄小鼠游泳時(shí)間。組間比較采用t檢驗(yàn)。

2.2 白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型小鼠血清總蛋白及白蛋白含量的影響

取小鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組10只，雌雄各半，按上述實(shí)驗(yàn)方法，末次給藥后1h小鼠眼眶取血，分離血清，測(cè)定血清總蛋白及血清白蛋白含量，組間比較采用t檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1 白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型小鼠游泳時(shí)間的影響

小鼠連續(xù)14天灌服氫化可的松1mg/只后，模型對(duì)照組小鼠的游泳時(shí)間明顯低于正常對(duì)照組，表明基本形成陽(yáng)虛動(dòng)物模型。白首烏顆粒大、中劑量組小鼠的游泳時(shí)間比模型對(duì)照組明顯延長(zhǎng)(P<0.05～0.001)；而小劑量組的作用不明顯(P>0.05)。提示服用一定劑量的白首烏顆粒后的陽(yáng)虛模型小鼠具有明顯的抗疲勞和提高應(yīng)激反應(yīng)能力。

表1 白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型小鼠游泳的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

3.2 白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型小鼠血清總蛋白及白蛋白的影響

模型組小鼠的血清總蛋白和白蛋白含量均明顯低于對(duì)照組(P<0.001)。白首烏顆粒各給藥組小鼠血清總蛋白及白蛋白含量明顯高于模型對(duì)照組(P<0.05～0.001)，多數(shù)動(dòng)物接近正常動(dòng)物的水平，表明白首烏顆粒能提高陽(yáng)虛小鼠的免疫功能，增強(qiáng)其抵抗力。

4 討論

陽(yáng)虛模型組小鼠與正常對(duì)照組小鼠相比，其皮溫[4]降低，自主活動(dòng)次數(shù)明顯減少，負(fù)重游泳時(shí)間明顯縮短，耐寒能力明顯下降，血清中總蛋白和白蛋白顯著降低，表明基本成功復(fù)制了符合中醫(yī)“陽(yáng)虛”的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。白首烏顆粒溶液灌胃給藥后，給藥組小鼠與模型組相比，皮溫明顯升高，自主活動(dòng)次數(shù)明顯增加，負(fù)重游泳時(shí)間顯著延長(zhǎng)，耐寒能力明顯提高，陽(yáng)虛小鼠的血清總蛋白、白蛋白水平的提高表明本品具有一定的溫腎助陽(yáng)作用；對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠的“陽(yáng)虛證”有明顯的治療作用，為白首烏顆粒溫補(bǔ)腎陽(yáng)的臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示提高陽(yáng)虛小鼠的免疫功能可能是白首烏顆粒的作用機(jī)理之一。

表2 白首烏顆粒對(duì)陽(yáng)虛模型小鼠血清總蛋白及白蛋白的影響

注：與模型組比較，*P<0.05， **P<0.01， ***P<0.001。

[1] 陳小野.實(shí)用中醫(yī)證候動(dòng)物模型學(xué)[M].北京：北京醫(yī)科大學(xué)、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1993：101-146.

[2] 陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M]. 第1版.北京: 人民衛(wèi)生出版社，1993:781-782.

[3] 張均田.現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法[M].北京：北京醫(yī)科大學(xué)中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社,1998：1818.

[4] 黃仁禮.鹿角通督湯治療陽(yáng)虛背惡寒舉隅[J].浙江中醫(yī)藥雜志，2004,39(11):506.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

2014-10-11

崔偉偉(1982-)，女，江蘇省南京市中醫(yī)藥研究院主管中藥師，研究方向?yàn)獒t(yī)院藥學(xué)。

R285.5

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1673-2197(2015)03-0014-02

10.11954/ytctyy.201503006