曾嶸

血清IL-17與MMP-9在過敏性紫癜中的臨床意義

曾嶸

【摘要】目的觀察過敏性紫癜(HSP)患兒血清白介素-17(IL-17)與基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平的變化，探討其在HSP發(fā)病機(jī)制中的作用。方法30例健康兒童為對(duì)照組，92例初發(fā)HSP患兒按尿常規(guī)結(jié)果分為HSP組(68例)和HSPN組(24例)，將68例HSP患兒依據(jù)臨床表現(xiàn)分為單純型、關(guān)節(jié)型、腹型及混合型。采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)兩組患兒血清IL-17和MMP-9的水平，采用透射免疫比濁法檢測(cè)胱抑素C(CysC)，分析血清IL-17與MMP-9相關(guān)性，及其IL-17、MMP-9與CysC的相關(guān)性。結(jié)果2組患兒急性期IL-17、MMP-9和CysC高于對(duì)照組(P＜0.05) ; HSPN組急性期患兒IL-17、MMP-9和CysC高于HSP組(P＜0.05) ; HSP組各型之間IL-17水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05) ; HSP組中混合型MMP-9水平高于單純型、關(guān)節(jié)型和腹型(P＜0.05) ;單純型、關(guān)節(jié)型、腹型MMP-9水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05) ;經(jīng)相關(guān)分析，HSP急性期患兒IL-17、MMP-9水平分別與CysC呈顯著正相關(guān)(P＜0.01) ; HSP急性期患兒IL-17水平與MMP-9水平呈顯著正相關(guān)(P＜0.05) ; 2組患兒恢復(fù)期IL-17和MMP-9水平仍然高于對(duì)照組(P＜0.05) ; HSPN組患兒恢復(fù)期IL-17和MMP-9水平仍然高于HSP組(P＜0.05)。結(jié)論IL-17和MMP-9可能參與HSP急性期血管內(nèi)皮細(xì)胞炎性以及腎臟損傷的機(jī)制，對(duì)HSP早期診斷具有良好的臨床價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】過敏性紫癜;白介素-17;基質(zhì)金屬蛋白酶-9;兒童

作者單位: 644000四川省宜賓市第一人民醫(yī)院兒科

過敏性紫癜(HSP)是兒童時(shí)期常見的一種免疫介導(dǎo)的全身性血管炎性疾病，是否合并腎臟受累，直接影響HSP的預(yù)后。其發(fā)病機(jī)制目前尚不明確，大量研究顯示HSP的發(fā)病機(jī)制主要為體液及細(xì)胞免疫的異常，凝血與纖溶紊亂，基因多態(tài)性改變，炎性介質(zhì)的參與，同時(shí)細(xì)胞因子也發(fā)揮著重要作用。白細(xì)胞介素-17 (IL-17)是一種前炎性細(xì)胞因子，在多種免疫性血管炎性疾病中發(fā)揮著重要作用?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是一組鈣、鋅離子依賴性蛋白水解酶，MMP-9是其中一員，MMP-9是降解Ⅳ型膠原最主要的酶，在調(diào)節(jié)基質(zhì)降解方面發(fā)揮著重要作用。本研究探討HSP急性期患兒血清IL-17、MMP-9變化，分析兩者相關(guān)性，了解IL-17、MMP-9在HSP中的發(fā)病機(jī)制，從而為HSP患兒腎損害的診斷、及時(shí)治療和預(yù)后提供理論依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料2011年8月至2014年7月我院兒科收治的HSP患兒92例，均符合HSP診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］。男52例，女40例;年齡3～15歲，平均年齡(7.69±2.82)歲。均為初次發(fā)病，并且在1周內(nèi)未用過糖皮質(zhì)激素及免疫抑制劑，并排除其他自身免疫性疾病及過敏性疾病史。將92例初發(fā)HSP患兒按尿常規(guī)結(jié)果分為HSP組68例和HSPN組(尿蛋白含量＞150 mg/d 或100 mg/L，定性試驗(yàn)陽性;尿鏡檢紅細(xì)胞＞3個(gè)/HP) 24例。將68例無腎損害的HSP患兒依據(jù)臨床表現(xiàn)分為單純型15例、關(guān)節(jié)型16例、腹型19例和混合型18例。對(duì)照組為同期健康查體的兒童30例。2組患兒年齡、性別比與分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2治療方法2組患兒入院后均予以維生素C 1～2 g/d靜脈滴注7 d;西咪替丁每次10 mg/kg，2次/d靜脈滴注7 d;蘆丁片20 mg/d，分3次口服; 10%葡萄糖酸鈣1 ml·kg－1·d－1靜脈滴注7 d;低分子肝素鈣60～80 μg·kg－1·d－1皮下注射，連續(xù)2周。另給予口服孟魯司特抗過敏，有臨床感染癥狀表現(xiàn)者予以抗感染治療，關(guān)節(jié)腫痛嚴(yán)重者加用琥珀氫化可的松5～10 mg·kg－1·d－1靜脈滴注7 d。

1.3檢測(cè)方法2組患兒于入院第1天和恢復(fù)期分別采集外周靜脈血3 ml注入干凈試管，室溫凝固20 min，離心1 000 r 15 min，收集血清，分裝后－20℃冷凍保存。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)IL-17和MMP-9;采用乳膠顆粒增強(qiáng)透射免疫比濁法檢測(cè)CysC，試劑盒均購(gòu)自上海恒遠(yuǎn)公司。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.12組IL-17、MMP-9和CysC檢測(cè)結(jié)果比較2組患兒急性期血清IL-17、MMP-9和CysC高于對(duì)照組，2組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ; HSPN組急性期患兒血清IL-17、MMP-9和CysC高于HSP組，2組差異有計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1　3組IL-17、MMP-9和CysC檢測(cè)結(jié)果比較　±s

表1　3組IL-17、MMP-9和CysC檢測(cè)結(jié)果比較　±s

組別　IL-17(pg/ml)　MMP-9(ng/ml)　CysC(mg/L) HSP組(n=68)85±33　177±87　1.31±0.51對(duì)照組(n=30)　59±13　94±32　0.69±0.21 F值36.75　47.61　29.28 P值?。?.05?。?.05?。?.05

2.2HSP組各型之間IL-17、MMP-9檢測(cè)結(jié)果比較HSP組各型之間IL-17水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞ 0.05) ; HSP組中混合型MMP-9水平高于單純型、關(guān)節(jié)型和腹型，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ;單純型、關(guān)節(jié)型、腹型MMP-9水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表2。

表2　HSP組各型之間IL-17、MMP-9檢測(cè)結(jié)果比較　±s

表2　HSP組各型之間IL-17、MMP-9檢測(cè)結(jié)果比較　±s

類別　IL-17(pg/ml)　MMP-9(ng/ml)單純型(n=15)79±23　163±61腹型(n=19)　85±29　174±67關(guān)節(jié)型(n=16)　82±25　173±79混合型(n=18)　88±32　190±81 F值1.98　5.68 P值　＞0.05?。?.05

2.3HSP急性期患兒血清IL-17、MMP-9與胱抑素相關(guān)性分析HSP急性期患兒血清IL-17水平與胱抑素呈顯著正相關(guān)(r=0.68，P＜0.01) ; HSP急性期患兒血清MMP-9水平與胱抑素呈顯著正相關(guān)(r=0.57，P＜0.01)。

2.4HSP急性期患兒血清IL-17與MMP-9相關(guān)性分析HSP急性期患兒血清IL-17水平與血清MMP-9水平呈顯著正相關(guān)(r=0.76，P＜0.05)。

2.52組患兒治療前后血清IL-17和MMP-9水平比較2組患兒經(jīng)過抗炎、抗凝等綜合治療后，患兒病情好轉(zhuǎn)出院，進(jìn)入恢復(fù)期。2組患兒IL-17和MMP-9水平仍然高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ;兩組患兒恢復(fù)期IL-17和MMP-9水平低于急性期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05) ; HSPN組患兒恢復(fù)期IL-17和MMP-9水平仍然高于HSP組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表3　2組患兒治療前后血清IL-17、MMP-9檢測(cè)結(jié)果比較±s

表3　2組患兒治療前后血清IL-17、MMP-9檢測(cè)結(jié)果比較±s

組別　IL-17(pg/ml)　MMP-9(ng/ml) HSPN急性期113±36　258±85恢復(fù)期　83±22　163±67 t值5.78　6.92 P值?。?.05?。?.05 HSP急性期85±33　177±87恢復(fù)期　67±10　112±46 t值4.75　5.19 P值?。?.05?。?.05對(duì)照組59±13　94±32

3　討論

HSP是兒童時(shí)期常見的一種全身性小血管炎性疾病，?？衫奂捌つw、肌肉、關(guān)節(jié)、循環(huán)系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、消化道和腎臟等多個(gè)臟器和系統(tǒng)［2］。HSPN是HSP患兒最常見的并發(fā)癥，是導(dǎo)致終末期腎病的重要原因之一。腎臟受累的嚴(yán)重程度是決定HSP患兒遠(yuǎn)期預(yù)后的主要因素。目前大量的研究顯示HSP及HSPN的發(fā)病機(jī)制主要為體液及細(xì)胞免疫的異常，凝血與纖溶紊亂，基因多態(tài)性改變，炎性介質(zhì)的參與，同時(shí)細(xì)胞因子也發(fā)揮著重要作用，但其確切機(jī)制尚不明確，也沒有有效的措施阻斷HSP出現(xiàn)腎臟受累，因此，明確HSP發(fā)病機(jī)制，對(duì)預(yù)防HSPN的發(fā)生非常重要［3］。

IL-17是由CD4+輔助性T細(xì)胞—Th17細(xì)胞分泌的前炎性細(xì)胞因子，具有強(qiáng)大的促炎作用，是T細(xì)胞誘導(dǎo)的炎性反應(yīng)的早期啟動(dòng)因素［4］。IL-17能生產(chǎn)多種促炎趨化和細(xì)胞因子，在多種急慢性炎癥和自身免疫性疾病中起重要作用［5］。在急慢性炎癥中，機(jī)體中會(huì)產(chǎn)生大量的IL-17，促進(jìn)機(jī)體局部產(chǎn)生單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCPes-l)、白介素8(IL-8)等趨化因子，使單核細(xì)胞及其中性粒細(xì)胞增多; IL-17還通過刺激上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等分泌白介素6(IL-6)和IL-8，促進(jìn)局部炎癥; IL-17還能誘導(dǎo)細(xì)胞表面的細(xì)胞間粘附分子(ICAM)的生成，協(xié)同腫瘤壞死因子(TNF-α)和白介素1等其他炎性細(xì)胞因子誘導(dǎo)炎癥活性的基因表達(dá)，放大炎性效應(yīng)［6］。因此，IL-17在局部組織炎癥的發(fā)生和發(fā)展過程中起著促進(jìn)作用。本研究對(duì)2組患兒檢測(cè)血清IL-17水平。結(jié)果表明，HSP組和HSPN組急性期患兒血清IL-17水平高于對(duì)照組(P＜0.05) ; HSPN組急性期患兒血清IL-17水平高于HSP組(P ＜0.05)。HSP組各型之間IL-17水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05) ; 2組患兒恢復(fù)期IL-17水平仍然高于對(duì)照組(P＜0.05) ; HSPN組患兒恢復(fù)期IL-17水平仍然高于HSP組(P＜0.05)。結(jié)果表明在HSP急性期IL-17在血管炎性中發(fā)揮著重要作用，HSP各型之間IL-17參與的血管炎性反應(yīng)程度并無輕重之分。

MMPs是一組鈣、鋅離子依賴性蛋白水解酶，對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)有特異的降解作用。血管炎的主要病理改變是內(nèi)皮屏障功能障礙，內(nèi)皮屏障包括基膜(ECM)和內(nèi)皮細(xì)胞。內(nèi)皮ECM主要成分是Ⅳ型膠原，MMPs家族中的MMP-9是降解Ⅳ型膠原最主要的酶，MMP-9在調(diào)節(jié)基質(zhì)降解方面發(fā)揮著重要的作用，促進(jìn)白細(xì)胞滲出和遷移;通過降解ECM來破壞血管內(nèi)皮屏障;還能通過增加內(nèi)皮細(xì)胞的通透性，促使免疫細(xì)胞在血管內(nèi)皮的黏附，促使炎性細(xì)胞因子的分泌，促進(jìn)炎性反應(yīng)的作用。因此，MMP-9在血管的損害中起著重要作用［7，8］。本研究對(duì)2組患兒急性期和恢復(fù)期檢測(cè)血清MMP-9水平。結(jié)果表明，2組急性期患兒血清MMP-9高于對(duì)照組(P＜0.05) ; HSPN組急性期患兒血清MMP-9高于HSP組(P＜0.05)。HSP組各型中混合型MMP-9水平高于單純型、關(guān)節(jié)型和腹型(P＜0.05) ;單純型、關(guān)節(jié)型、腹型MMP-9水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。2組患兒恢復(fù)期MMP-9水平仍然高于對(duì)照組(P＜0.05) ; 2組患兒恢復(fù)期MMP-9水平低于急性期(P＜0.05) ; HSPN組患兒恢復(fù)期MMP-9水平仍然高于HSP組(P＜0.05)。結(jié)果表明在HSP過程中MMP-9對(duì)ECM的損傷在疾病早期已起作用，HSP各型中混合型HSP血管損傷更嚴(yán)重。相關(guān)研究報(bào)道類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中IL-17可誘導(dǎo)外周血單核細(xì)胞MMP-9的生成，二者呈相關(guān)性［9］。在本研究中通過急性期患兒血清IL-17水平與MMP-9水平進(jìn)行相關(guān)分析，呈顯著正相關(guān)。結(jié)果表明證實(shí)MMP-9參與HSP血管炎性損傷，且與IL-17可能有協(xié)同作用。

胱抑素C(CysC)是一種低分子量非糖基化堿性蛋白質(zhì)，其水平能反應(yīng)腎小球?yàn)V過功能、腎小管的重吸收和分泌功能，是HSP早期診斷腎功能受損的敏感指標(biāo)之一［10］。本研究通過HSP急性期患兒血清IL-17、MMP-9與胱抑素相關(guān)性分析，經(jīng)直線相關(guān)分析表明，HSP急性期患兒血清IL-17水平與胱抑素呈顯著正相關(guān)(r=0.68，P＜0.01) ; HSP急性期患兒血清MMP-9水平與胱抑素呈顯著正相關(guān)(r=0.57，P＜0.01)。由此可見，血清IL-17與MMP-9也是較為理想的反映HSP腎臟早期損害的重要指標(biāo)，對(duì)HSP患兒腎損害的診斷、及時(shí)治療和預(yù)后具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

1胡亞美，江載芳主編.諸福棠實(shí)用兒科學(xué).第8版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2012.408.

2曾嶸，石明芳，張罡.過敏性紫癜患兒血清sE-選擇素和sP-選擇素水平的變化及其意義.海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，20: 241-243.

3袁芳.兒童過敏性紫癜研究進(jìn)展.臨床兒科雜志，2013，31: 287-289.

4于堯，肖君剛.過敏性紫癜患者IL-23/IL-17軸相關(guān)因子的檢測(cè).中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志，2014，28: 260-262.

5苗靜，周俊霖，彭曉杰，等.輔助性T細(xì)胞17及白介素-17在兒童過敏性紫癜的表達(dá)及意義.江西醫(yī)藥，2014，49: 102-104.

6徐麗娟.過敏性紫癜急性期患兒血清IL-17、MMP-9的變化及意義.國(guó)際兒科學(xué)雜志，2014，41: 431-433.

7唐艷麗，邵予，孫萬邦.基質(zhì)金屬蛋白酶在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎免疫致病機(jī)制及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的研究進(jìn)展.廣東醫(yī)學(xué)，2013，34: 2724-2727.

8孫鑫波，劉朝東.MIP-1與MMP-9在免疫炎癥反應(yīng)中作用及其關(guān)系研究進(jìn)展.中國(guó)免疫學(xué)雜志，2012，28: 474-477.

9Draganv J，Johanne MP，Johan A，et al.Stimulation of 92-kd gela tinase (Matrix Metalloproteinase 9 ) productiaon by interleukin-17 inhuman monocyte/macrophages.Arthritis＆Rheumatism，2000，43: 1134-1144.

10趙巍，黃偉萍，謝麗冰.血胱抑素C對(duì)兒童過敏性紫癜腎功能評(píng)價(jià)的臨床意義.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2013，29: 1028.

(收稿日期:2014－07－10)

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.08.014

【文章編號(hào)】1002－7386(2015) 08－1166－03

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【中圖分類號(hào)】R 554.6