陳萌萌，李艷芳*，彭余波，蔣志麗，宋俊迎

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長效硝酸酯對心力衰竭大鼠肺α1、β腎上腺素受體各亞型表達(dá)水平的影響

陳萌萌1,2，李艷芳1,2*，彭余波1,2，蔣志麗1,2，宋俊迎1,2

（1首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院：急診35病房，北京 100029；2北京市心肺血管疾病研究所，北京 100029）

探討長效硝酸酯對心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能和肺α1、β腎上腺素受體（AR）各亞型表達(dá)水平的影響。選用雄性Wistar大鼠90只，分為正常對照組（N組，＝9）、假手術(shù)組（SH組，＝8），其余73只大鼠結(jié)扎左冠狀動脈前降支制作心肌梗死后心力衰竭模型，成功44只，分為心力衰竭模型組（HF組，＝9）、硝酸酯小劑量組（LN組，＝9）、硝酸酯大劑量組（HN組，＝9）、陽性藥物對照組（奧美沙坦酯，OL組，＝9）及硝酸酯大劑量聯(lián)合陽性藥物組（HN＋OL組，＝8），灌胃法給藥6周。超聲心動圖檢測用藥前后心功能，逆轉(zhuǎn)錄?聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）和免疫印跡法（Western blot）檢測各組肺β1-AR、β2-AR、β3-AR、α1A-AR、α1B-AR及α1D-AR的表達(dá)水平。用藥后，與HF組比較，HN組、OL組及HN＋OL組左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）顯著升高（＜0.05）。與SH組相比，HF組β1-AR和β3-AR表達(dá)水平明顯下降（＜0.05），α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平明顯升高（＜0.05）；與HF組相比，HN組、OL組和HN＋OL組β1-AR、β3-AR表達(dá)水平明顯升高（＜0.05），α1A-AR、α1B-AR及β2-AR表達(dá)水平明顯降低（＜0.05）。與OL組相比，HN＋OL組各受體表達(dá)水平差異更顯著（＜0.05）。各組大鼠α1D-AR表達(dá)水平間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05）。應(yīng)用長效硝酸酯藥物可顯著提高心肌梗死后心力衰竭大鼠LVEF，使心力衰竭大鼠肺α1、β-AR各亞型表達(dá)水平反向調(diào)節(jié)趨于正常，對保護(hù)肺功能起到了有益的治療作用。

大鼠；硝酸酯；心力衰竭；肺；腎上腺素能受體；亞型

慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）是各類心血管疾病的臨床終末階段，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和生存率。CHF時(shí)神經(jīng)體液系統(tǒng)被激活，主要包括交感神經(jīng)系統(tǒng)（sympathetic nervous system，SNS）和腎素?血管緊張素?醛固酮系統(tǒng)（renin- angiotensin-aldosterone system，RAAS）的激活。除血循環(huán)中神經(jīng)體液系統(tǒng)的活性升高外，心力衰竭肺局部SNS和RAAS也被激活，嚴(yán)重?fù)p害肺功能。硝酸酯類主要是通過擴(kuò)張外周血管以改善血流動力學(xué)、擴(kuò)張冠狀動脈以增加缺血心肌氧供來增加心排出量，改善CHF心功能，并減輕肺循環(huán)淤血，但其是否還能影響SNS激活以及肺α1?、β?腎上腺素受體（adrenergic receptor, AR）各亞型的表達(dá)報(bào)道甚少。為此，本研究選用心肌梗死后心力衰竭大鼠模型和5?單硝酸異山梨酯（ISMN）緩釋制劑，觀察長效硝酸酯類對CHF心功能和肺α1、β?AR各亞型表達(dá)水平的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

清潔級近交系Wistar大鼠，雄性，10周齡，體質(zhì)量250～280g（北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司，許可證號：SCXK-2012-0001），由首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院清潔級動物房提供飼養(yǎng)和觀察場地。實(shí)驗(yàn)期間以標(biāo)準(zhǔn)鼠飼料喂養(yǎng)，自由攝食、飲水，動物房溫度維持在（22±3）℃，相對濕度為（50±20）%，12h光照/12h無光照。

1.2 藥物、試劑及主要儀器

單硝酸異山梨酯緩釋膠囊（isosorbide mononitrate sustained-release capsules，異樂定，ISMN，50mg/膠囊劑，珠海許瓦茲制藥有限公司）；奧美沙坦酯片（olmesartan medoxomil tablets，傲坦，20mg/片，日本第一三共制藥上海有限公司）；兔抗大鼠β1-AR、β2-AR、β3-AR、α1A-AR、α1B-AR、α1D-AR及3?磷酸甘油醛脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）多克隆抗體（美國Santa Cruz Biotechnology公司）；熒光二抗羊抗兔IgG，Odyssey雙色紅外激光成像系統(tǒng)（美國Licor公司）；β1-AR、β2-AR、β3-AR、α1A-AR、α1B-AR、α1D-AR引物（由北京三博遠(yuǎn)志生物技術(shù)有限公司合成）；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒A3500（美國Promega公司）；PCR儀（美國Bio-Rad公司）。

1.3 大鼠心肌梗死后心力衰竭模型制作及分組

90只Wistar大鼠，分為正常對照組（N組，9只）、假手術(shù)組（SH組，8只，開胸后在左冠狀動脈前降支下方只穿線不結(jié)扎），其余73只大鼠通過結(jié)扎左冠狀動脈前降支造成心肌梗死，4周后行超聲心動圖檢測示左室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fraction，LVEF）≤45%為心力衰竭模型制作成功[1]。心力衰竭模型成功44只（成功率60.3%），隨機(jī)分為5組：心力衰竭模型組（heart failure，HF組，9只，0.9%氯化鈉溶液2ml灌胃）、ISMN小劑量組（low-dose nitrate，LN組，9只，ISMN3.6mg/kg溶于2ml 0.9%氯化鈉溶液灌胃）、ISMN大劑量組（high-dose nitrate，HN組，9只，ISMN7.2mg/kg溶于2ml 0.9%氯化鈉溶液灌胃），陽性藥物對照組（olmesartan，OL組，9只，奧美沙坦3mg/kg溶于2ml 0.9%氯化鈉溶液灌胃），ISMN大劑量聯(lián)合奧美沙坦組（high-dose nitrate＋olmesartan，HN＋OL組，8只，ISMN按7.2mg/kg、奧美沙坦按3mg/kg溶于2ml 0.9%氯化鈉溶液灌胃），ISMN的給藥劑量按動物與人體表面積換算成等效劑量，3.6mg/kg為小劑量，7.2mg/kg為大劑量。每組均為1次/d灌胃，持續(xù)6周。

1.4 超聲心動評價(jià)左心室心功能

用藥前（術(shù)后4周）及用藥6周后分別進(jìn)行超聲心動圖檢測大鼠左室心功能。取胸骨旁左室長軸及短軸切面進(jìn)行測量，測量參數(shù)包括左室舒張末期內(nèi)徑（left ventricular end-diastolic dimension，LVEDD），左室收縮末期內(nèi)徑（left ventricular end-systolic dimension，LVESD），LVEF，每項(xiàng)指標(biāo)均測量3個(gè)連續(xù)完整心動周期，結(jié)果取平均值。

1.5 肺組織提取

大鼠以1%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔注射麻醉，剖開胸腔暴露肺，剪取數(shù)塊肺組織，迅速置液氮中凍存，后轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱保存待測。

1.6 半定量逆轉(zhuǎn)錄?聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）測定

Trizol試劑提取肺組織總RNA，取5μg總RNA行逆轉(zhuǎn)錄，RT-PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增條件為94℃5min，94℃45s，53℃～62℃45s，72℃45s，共28～35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸10min（各受體引物序列及退火溫度詳見表1），每個(gè)樣本重復(fù)3遍，分別檢測肺組織α1、β-AR各亞型在mRNA水平的表達(dá)，選用管家基因GAPDH作為內(nèi)參照。PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳分離，紫外燈下照相，結(jié)果用Quantity one軟件分析，得出與內(nèi)參GAPDH的比值，進(jìn)行分析。

1.7 Western印跡法檢測

常規(guī)提取肺組織蛋白，BCA蛋白濃度測定試劑盒進(jìn)行蛋白定量。經(jīng)十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）分離，轉(zhuǎn)膜，5%脫脂奶粉封閉，加入一抗抗體，4℃過夜；PBST沖洗3次，再加入熒光二抗，室溫孵育2h，PBST沖洗3次。Odyssey雙色紅外激光成像系統(tǒng)對膜進(jìn)行掃描成像，計(jì)算各個(gè)條帶的灰度值。用Quantity one軟件對圖像進(jìn)行吸光度分析，以目的條帶與內(nèi)參照條帶信號強(qiáng)度的比值代表組織中目的受體的表達(dá)水平。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用檢驗(yàn)（Newman-Keuls test）。以＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 用藥前后超聲心動圖結(jié)果

用藥前，N組和SH組LVEF、LVEDD及LVESD組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05）；與SH組相比，HF組、LN組、HN組、OL組及HN＋OL組大鼠LVEF明顯降低（＜0.01），LVEDD和LVESD均明顯增加（＜0.01），但5組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05）。用藥后，與HF組相比，LN組LVEF有所增加，LVEDD、LVESD有所降低，但兩者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05），HN組、OL組和HN＋OL組LVEF顯著升高（＜0.05），LVESD顯著降低（＜0.05），HN＋OL組LVEDD顯著降低（＜0.05）；OL組LVEF較HN組進(jìn)一步升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05）；與LN組比較，HN＋OL組LVEF顯著升高，LVESD顯著降低（＜0.05）；與HN組、OL組相比，HN＋OL組LVEF顯著升高（＜0.05；表2）。

2.2 肺α1、β-AR各亞型mRNA表達(dá)水平比較

用藥6周后檢測各組大鼠肺組織α1、β-AR各亞型的mRNA表達(dá)水平。與N組相比，SH組α1、β-AR各亞型表達(dá)水平無顯著性變化（＞0.05）；與SH組相比，HF組大鼠β1-AR和β3-AR表達(dá)水平明顯下調(diào)，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平明顯上調(diào)（＜0.01）；與HF組相比，HN、OL、HN＋OL 3組β1-AR和β3-AR表達(dá)水平均顯著上調(diào)，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平均顯著下調(diào)（＜0.05）；與LN組相比，HN、OL、HN＋OL 3組β1-AR和β3-AR表達(dá)水平均上調(diào)，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平均下調(diào)（＜0.05）；與HN組相比，OL組β1-AR和β3-AR表達(dá)水平有上調(diào)趨勢，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平有下調(diào)趨勢（＞0.05）；與HN、OL組相比，HN＋OL組β1-AR和β3-AR表達(dá)水平進(jìn)一步上調(diào)，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平進(jìn)一步下調(diào)（＜0.05）。各組大鼠α1D-AR表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05；圖1）。

表1 α1、β腎上腺素能受體各亞型引物序列及退火時(shí)間

AR: adrenergic receptor; GAPDH: glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase

表2 用藥前后各組大鼠超聲心動圖檢測結(jié)果

N: normal control group; SH: sham-operation group; HF: heart failure group; LN: low-dose nitrate group; HN: high-dose nitrate; OL: olmesartan group; HN＋OL: high-dose nitrate＋olmesartan group. LVEF: left ventricular ejection fraction; LVEDD: left ventricular end-diastolic dimension; LVESD: left ventricular end-systolic dimension. Compared with SH group,**＜0.01; compared with HF group,#＜0.05; compared with LN group,△＜0.05; compared with HN group,▲＜0.05; compared with OL group,☆＜0.05

2.3 肺α1、β-AR各亞型蛋白表達(dá)水平比較

用藥6周后檢測各組大鼠肺組織α1、β-AR各亞型蛋白表達(dá)水平。與N組相比，SH組α1、β-AR各亞型表達(dá)水平無顯著性變化（＞0.05）；與SH組相比，HF組大鼠β1-AR和β3-AR表達(dá)水平明顯下調(diào)，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平明顯上調(diào)（＜0.01）；與HF組相比，HN、OL、HN＋OL 3組β1-AR和β3-AR表達(dá)水平均顯著上調(diào)，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平均顯著下調(diào)（＜0.05）；與LN組相比，HN、OL、HN＋OL 3組β1-AR和β3-AR表達(dá)水平均上調(diào)，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平均下調(diào)（＜0.05）；與HN組相比，OL組β1-AR和β3-AR表達(dá)水平有上調(diào)趨勢，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平有下調(diào)趨勢（＞0.05）；與HN、OL組相比，HN＋OL組β1-AR和β3-AR表達(dá)水平進(jìn)一步上調(diào)，α1A-AR、α1B-AR和β2-AR表達(dá)水平進(jìn)一步下調(diào)（＜0.05）。各組大鼠α1D-AR表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05；圖2）。

3 討 論

CHF時(shí)左心房、肺靜脈壓升高，肺毛細(xì)血管擴(kuò)張，肺循環(huán)淤血，毛細(xì)血管內(nèi)液體進(jìn)入肺間充質(zhì)、肺泡，產(chǎn)生肺淤血、肺水腫。當(dāng)CHF持續(xù)存在，長時(shí)間的肺靜脈高壓，超過肺毛細(xì)血管網(wǎng)的緩沖能力，則可影響肺動脈壓，出現(xiàn)肺動脈高壓和右心功能不全[2,3]。

長效ISMN在臨床上主要用于治療冠心病和CHF[4]。硝酸酯類對CHF的治療作用主要通過擴(kuò)張靜脈和外周小動脈，減輕心臟前、后負(fù)荷，以及擴(kuò)張冠狀動脈改善心肌血供來實(shí)現(xiàn)[5]。本研究結(jié)果顯示，CHF組大鼠LVEF明顯降低，硝酸酯治療后LVEF顯著升高，提示硝酸酯通過上述作用改善CHF心功能，增加心排出量。其中，大劑量硝酸酯作用明顯優(yōu)于小劑量，與小劑量擴(kuò)張靜脈降低心臟前負(fù)荷、大劑量擴(kuò)張冠狀動脈和外周小動脈、進(jìn)一步改善心功能有關(guān)。

肺組織的腎上腺素受體包括α1-AR和β-AR各3種亞型。研究顯示，人和大鼠肺組織均表達(dá)α1A-AR、α1B-AR及α1D-AR 3種亞型，但以α1A-AR和α1B-AR為主，α1D-AR表達(dá)水平較低[6]，這3種亞型主要存在于肺小動脈、肺小靜脈的平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞[7]。肺的β-AR包括β1-AR、β2-AR、β3-AR 3種亞型[8]，以β2-AR為主。β2-AR分布于肺各部位，如氣道、肺實(shí)質(zhì)、肺淋巴組織等[9]。

本研究結(jié)果顯示，CHF大鼠肺α1A-AR、α1B-AR表達(dá)水平明顯上調(diào)，α1D-AR表達(dá)水平無顯著變化；與國內(nèi)學(xué)者[10]對低氧性肺動脈高壓大鼠外周肺組織的研究結(jié)果相一致，即肺α1A-AR、α1B-AR mRNA表達(dá)水平升高，而α1D-AR無顯著變化。α1-AR主要介導(dǎo)肺血管平滑肌收縮，其中α1A-AR介導(dǎo)肺動脈平滑肌細(xì)胞收縮和增殖，進(jìn)而引起肺動脈收縮、血管壁增厚，導(dǎo)致肺血管重建[11]。CHF時(shí)，肺α1A-AR表達(dá)上調(diào)，一方面是機(jī)體的代償反應(yīng)，因低氧部位α1A-AR上調(diào)可誘發(fā)肺阻力血管收縮，使血液向通氣好的肺區(qū)分流，改善通氣/血流比例[12]；另一方面，α1A-AR上調(diào)引起的肺血管重建可促進(jìn)肺動脈高壓和右心功能不全形成，使心功能進(jìn)一步惡化。有研究認(rèn)為，低氧使低氧誘生因子表達(dá)增加，并與α1B-AR基因上游啟動子區(qū)域結(jié)合增加，促進(jìn)α1B-AR的基因轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)[13]，使α1B-AR受體表達(dá)上調(diào)，與α1A-AR受體共同誘導(dǎo)低氧肺組織的血管收縮，使肺通氣/血流比例升高。

圖1 各組大鼠肺組織α1-、β-AR各亞型mRNA表達(dá)水平

Figure 1 Expression of α- and β-AR subtypes on mRNA level in lungs

N: normal control group; SH: sham-operation group; HF: heart failure group; LN: low-dose nitrate group; HN: high-dose nitrate group; OL: olmesartan group; HN＋OL: high-dose nitrate＋olmesartan group. Compared with SH group,**＜0.01; compared with HF group,#＜0.05; compared with LN group,△＜0.05; compared with HN group,▲＜0.05; compared with OL group,☆＜0.05

本研究發(fā)現(xiàn)，CHF大鼠肺β2-AR表達(dá)水平顯著上調(diào)，β1-AR、β3-AR表達(dá)水平顯著下調(diào)，與國內(nèi)學(xué)者[11]所觀察到的低氧后大鼠肺動脈平滑肌細(xì)胞β2-AR mRNA表達(dá)增多、以及Miao等[14]發(fā)現(xiàn)老年心力衰竭大鼠肺β3-AR mRNA表達(dá)下調(diào)的結(jié)果相一致。肺β2-AR在β-AR中占主導(dǎo)地位，是調(diào)節(jié)肺生理功能的主要受體亞型。激動β2-AR可舒張支氣管平滑肌，抑制炎癥反應(yīng)，改善肺微血管通透性并促進(jìn)肺泡液體的清除等[15]，β1-AR和β2-AR還可介導(dǎo)大鼠肺動脈舒張[16]。CHF大鼠存在肺循環(huán)淤血和肺水腫，β2-AR表達(dá)上調(diào)有利于肺水腫液的清除和舒張肺血管，進(jìn)而減輕肺淤血、擴(kuò)張支氣管、增加肺通氣，最終改善CHF狀態(tài)下的肺功能。心力衰竭時(shí)肺β1-AR表達(dá)下調(diào)可能與其拮抗β2-AR的血管舒張作用以維持相對穩(wěn)定的肺血管張力有關(guān)。此外，有研究表明激動CHF的肺β3-AR可增加肺泡液體清除率、減輕肺水腫[14]，而促使CHF大鼠β3-AR表達(dá)下調(diào)，將延緩肺泡液體的清除，加重肺水腫。

本研究應(yīng)用硝酸酯藥物治療后，心力衰竭大鼠肺α1A-AR、α1B-AR及β2-AR表達(dá)水平較模型組下調(diào)，β1-AR、β3-AR表達(dá)水平上調(diào)，α1D-AR表達(dá)水平無顯著變化，可能與硝酸酯擴(kuò)張血管、改善血流動力學(xué)和心肌灌注、減輕肺循環(huán)淤血、使病理狀態(tài)下受體表達(dá)水平趨于正常有關(guān)。而α1-AR表達(dá)下調(diào)可延緩肺動脈高壓進(jìn)程，β3-AR表達(dá)上調(diào)可促進(jìn)肺泡液體清除，抑制心、肺功能的進(jìn)一步惡化。

圖2 各組大鼠肺組織α1、β-AR各亞型蛋白質(zhì)表達(dá)水平

Figure 2 Expression of α1- and β-AR subtypes on protein level in lungs

N: normal control group; SH: sham-operation group; HF: heart failure group; LN: low-dose nitrate group; HN: high-dose nitrate group; OL: olmesartan group; HN＋OL: high-dose nitrate＋olmesartan group. Compared with SH group,**＜0.01; compared with HF group,#＜0.05; compared with LN group,△＜0.05; compared with HN group,▲＜0.05; compared with OL group,☆＜0.05

奧美沙坦是高度選擇性AT1R拮抗劑，能阻斷AngⅡ和ATR的結(jié)合。與其他血管緊張素受體拮抗劑有所不同，奧美沙坦還具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑的作用，可抑制AngⅡ的生成，增加CHF時(shí)Ang1～7的表達(dá)水平，起到擴(kuò)張血管的作用[17]。本研究中，奧美沙坦組心功能明顯改善，反向調(diào)節(jié)CHF時(shí)肺α1、β-AR各亞型表達(dá)的效應(yīng)略優(yōu)于大劑量硝酸酯，可能與其RAAS抑制作用有關(guān)。本研究結(jié)果表明，奧美沙坦及大劑量硝酸酯聯(lián)合用藥較單獨(dú)用藥療效更為顯著，可能與兩者優(yōu)勢互補(bǔ)、協(xié)同發(fā)揮治療心力衰竭的作用有關(guān)。

綜上所述，長效硝酸酯、奧美沙坦單用均可改善CHF大鼠心功能，反向調(diào)節(jié)心力衰竭時(shí)肺α1、β-AR的表達(dá)（使其趨于正常），二者聯(lián)合效果更優(yōu)，對心力衰竭時(shí)肺功能起到更為有益的保護(hù)作用。

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（編輯: 周宇紅）

Effect of long-acting nitrate on expression of α1- and β-adrenoceptor subtypes in lung of rats with heart failure

CHEN Meng-Meng1,2, LI Yan-Fang1,2*, PENG Yu-Bo1,2, JIANG Zhi-Li1,2, SONG Jun-Ying1,2

(1The 35thWard, Department of Emergency, Beijing Anzhen Hospital Affiliated to Capital Medical University, Beijing 100029, China;2Beijing Institute of Heart, Lung and Blood Vessel Diseases, Beijing 100029, China)

To investigate the effect of long-acting nitrate on the left ventricular function and the expression of α1- and β-adrenergic receptors subtypes in the lung tissue of rats with myocardial infarction-induced chronic heart failure (CHF).Ninety inbred male Wistar rats were divided into normal control group (N group,＝9), sham-operation group (SH group,＝8) and heart failure (HF) model group (＝73). The HF model was successfully induced by ligating left anterior descending (LAD) artery in 44 rats. In 4 weeks after operation, the rats from the model group were divided into 5 groups, HF group (HF group,＝9), low-dose nitrate group (LN group,＝9), high-dose nitrate group (HN group,＝9), positive medicine (olmesartan) control group (OL group,＝9) and high dose nitrate combined with positive medicine group (HN＋OL group,＝8). The medication was given by gastric gavage for 6 weeks. Cardiac function was examined by echocardiography before and after the treatment, and the expression of β1-AR, β2-AR, β3-AR, α1A-AR, α1B-AR, and α1D-AR at mRNA and protein levels in the lung parenchyma was determined by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blotting.After the treatment, left ventricular ejection fraction (LVEF) was markedly higher in HN, OL and HN＋OL groups than in HF group (＜0.05). Compared with SH group, the expression of α1A-AR, α1B-AR, and β2-AR was significantly up-regulated (＜0.05), and that of β1-AR and β3-AR was down-regulated in HF group (＜0.05). Compared with HF group, the expression of α1A-AR, α1B-AR, and β2-AR was significantly down-regulated, and the expression of β1-AR and β3-AR was significantly up-regulated in HN, OL, and HN＋OL groups (＜0.05). Furthermore, there was significant difference in the expression of above subtypes between the OL group and HN＋OL group (＜0.05). No obvious difference was seen in the expression level of α1D-AR among all groups.Long-acting nitrate therapy remarkably improves LVEF in CHF rats induced by myocardial infarction, reverses the lung expression levels of α1- and β-AR subtypes to normal, and exerts abeneficial effect on the protection of lungfunction.

rats; nitrate; heart failure; lung; adrenergic receptor; subtypes

(DFCMDA201203).

R541.6

A

10.11915/j.issn.1671-5403.2015.06.107

2015?02?03;

2015?03?27

中國醫(yī)師協(xié)會探索心血管研究基金項(xiàng)目（DFCMDA201203）

李艷芳, E-mail: liyf101@sohu.com