郭茂華, 鄭瑞鋒，申培紅, 胡景團(tuán), 汪晟坤, 藺紅麗, 喬亞光, 陳峰杰, 李彥偉, 趙 瓊

1)河南護(hù)理職業(yè)學(xué)院病理學(xué)教研室 安陽(yáng)455000 2)中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)河南總隊(duì)醫(yī)院腫瘤中心 鄭州450052 3)鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 鄭州450009 4)鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院病理科 鄭州450052

乳腺腫瘤組織中BCSG1、MMP-2、TIMP-2和VEGF蛋白的表達(dá)*

郭茂華1), 鄭瑞鋒2)，申培紅1,3)#, 胡景團(tuán)1), 汪晟坤3), 藺紅麗1), 喬亞光1), 陳峰杰1), 李彥偉4), 趙 瓊1)

1)河南護(hù)理職業(yè)學(xué)院病理學(xué)教研室 安陽(yáng)455000 2)中國(guó)人民武裝警察部隊(duì)河南總隊(duì)醫(yī)院腫瘤中心 鄭州450052 3)鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 鄭州450009 4)鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院病理科 鄭州450052

#通信作者，女，1967年4月生，博士，教授，主任醫(yī)師，研究方向：腫瘤病理，E-mail:13838122660@163.com

乳腺腫瘤；乳腺癌特異性基因；細(xì)胞外基質(zhì)蛋白；基質(zhì)金屬蛋白酶；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移

以往研究[1-6]顯示，在乳癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移過(guò)程中，乳癌特異基因1(breast cancer specific gene-1, BCSG1)、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑(tissue inhibitor of metalloproteinases，TIMPs)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)均起到一定的作用。作者對(duì)乳腺纖維腺瘤、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁乳腺組織、無(wú)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌和伴腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中BCSG1、MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)，分析其表達(dá)特征，為判斷乳癌惡性進(jìn)程和評(píng)估預(yù)后提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 標(biāo)本來(lái)源于鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院及河南省腫瘤醫(yī)院病理科2008年1月至2010年12月手術(shù)切除的乳腺腫瘤標(biāo)本?；颊呔鶠榕裕挲g32～65歲，術(shù)前均未經(jīng)任何抗腫瘤治療。纖維腺瘤40例，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁增生組織(浸導(dǎo)癌旁)48例，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織(浸導(dǎo)癌1組)13例，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織(浸導(dǎo)癌2組)49例，術(shù)后均經(jīng)常規(guī)病理檢查確診。

1.2 BCSG1、MMP-2、TIMP-2、VEGF的檢測(cè) 取手術(shù)切除標(biāo)本，常規(guī)固定、脫水、石蠟包埋, 3 μm厚連續(xù)切片。采用免疫組化SP法進(jìn)行檢測(cè)。 陽(yáng)性對(duì)照為已知陽(yáng)性切片，陰性對(duì)照采用 PBS代替一抗。BCSG1鼠抗人單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Santa Cruz生物技術(shù)有限公司，MMP-2、TIMP-2鼠抗人單克隆抗體購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)有限公司，VEGF兔抗人多克隆抗體購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，SP免疫組化試劑盒購(gòu)自上海太陽(yáng)生物技術(shù)有限公司。

1.3 結(jié)果判定 參考Mohsin等[7]報(bào)道的標(biāo)準(zhǔn)并加以改良進(jìn)行結(jié)果判定。BCSG1、MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白陽(yáng)性細(xì)胞均表現(xiàn)為細(xì)胞漿呈棕黃或棕褐色著色。每張切片選取10個(gè)熱點(diǎn)，在高倍鏡視野下計(jì)數(shù)細(xì)胞，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)<25%計(jì)0分，25%～計(jì)1分，51%～計(jì)2分，>75%計(jì)3分；輕度著色計(jì)1分，中度著色計(jì)2分，重度著色計(jì)3分。兩項(xiàng)得分之和<3分為陰性，≥3分為陽(yáng)性[8]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 17.0分析，4種組織中蛋白陽(yáng)性率的比較采用χ2檢驗(yàn)，用列聯(lián)系數(shù)描述乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中各指標(biāo)間的關(guān)聯(lián)程度。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 4組乳腺組織中BCSG1、MMP-2、TIMP-2和VEGF的表達(dá) 見(jiàn)表1。在纖維腺瘤、乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁、乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中BCSG1、MMP-2、VEGF陽(yáng)性率逐漸增高，TIMP-2陽(yáng)性率逐漸降低。

表1 4組乳腺組織中BCSG1、MMP-2、TIMP-2和VEGF的表達(dá) 例(%)

2.2 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中VEGF、BCSG1、 MMP-2、TIMP-2表達(dá)之間的關(guān)系 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中， BCSG1與VEGF、MMP-2的表達(dá)有一定的關(guān)聯(lián)性，與TIMP-2的表達(dá)無(wú)關(guān)。VEGF與MMP-2的表達(dá)有一定的關(guān)聯(lián)性，與TIMP-2的表達(dá)無(wú)關(guān)。見(jiàn)表2、3。

表2 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中BCSG1與MMP-2、TIMP-2、VEGF表達(dá)的關(guān)系 例

*:rP=0.255,P=0.038;#：rP=0.112,P=0.374;△:rP=0.268,P=0.029。

表3 乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中VEGF與MMP-2、TIMP-2表達(dá)的關(guān)系 例

*:rP=0.300,P=0.013;#：rP=0.104,P=0.409。

3 討論

BCSG1是由Ji等[9]從人乳癌cDNA文庫(kù)中分離出的基因，編碼合成1條含127個(gè)氨基酸的蛋白。文獻(xiàn)[1]報(bào)道，BCSG1在乳腺良性疾病中表達(dá)較低,在乳癌中則呈現(xiàn)高表達(dá),其在乳癌發(fā)展過(guò)程中屬中晚期事件，高表達(dá)與乳癌進(jìn)程有關(guān)。MMP-2屬Ⅳ型膠原酶類，主要降解包括明膠、纖維蛋白、基底膜Ⅳ、Ⅴ和Ⅶ型膠原等在內(nèi)的多種膠原蛋白，在腫瘤細(xì)胞突破基底膜屏障和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用[10-11]。TIMP-2為MMP-2的特異性抑制因子[12]，多項(xiàng)研究[1-2，13]表明二者在肝癌、胃癌、大腸癌、乳癌、卵巢癌等多種腫瘤組織中均表達(dá)較高。VEGF是一類血管淋巴管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的總稱，在眾多促血管生長(zhǎng)因子中作用力最強(qiáng)，與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系密切；在多種腫瘤組織中，如乳腺腫瘤、胃癌、大腸癌、胰腺癌、上皮性卵巢癌、結(jié)直腸癌等，VEGF表達(dá)均明顯升高[5-6,14]。

該研究結(jié)果表明，在纖維腺瘤、乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁、乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中BCSG1、MMP-2、VEGF陽(yáng)性率逐漸增高，TIMP-2陽(yáng)性率逐漸降低，與上述相關(guān)報(bào)道結(jié)果一致。可以看出，BCSG1、MMP-2、VEGF為乳腺腫瘤進(jìn)程中的危險(xiǎn)因子，而TIMP-2發(fā)揮一定的保護(hù)作用。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中BCSG1與MMP-2、VEGF表達(dá)均呈正關(guān)聯(lián)，與TIMP-2表達(dá)無(wú)關(guān)，而VEGF與MMP-2表達(dá)亦呈正關(guān)聯(lián)，與TIMP-2表達(dá)無(wú)關(guān)。因此，作者認(rèn)為BCSG1、MMP-2、TIMP-2、VEGF均與乳癌發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，其檢測(cè)對(duì)指導(dǎo)判斷患者乳癌惡性進(jìn)程和估計(jì)預(yù)后具有重要的指導(dǎo)價(jià)值。

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(2014-06-18 收稿 責(zé)任編輯王 曼)

10.13705/j.issn.1671-6825.2015.03.036

*鄭州市科技局科技領(lǐng)軍人才項(xiàng)目 10LGRC173