李 慧賈新華，2

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南250014；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，山東濟(jì)南250011）

中藥抗病毒機(jī)制的研究進(jìn)展

李 慧1賈新華1，2

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南250014；2.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，山東濟(jì)南250011）

中醫(yī)藥抗病毒有較好的療效，其作用機(jī)理可分為直接抑制和間接抑制。直接抑制作用主要是阻斷病毒繁殖過程中的某一環(huán)節(jié)阻止其復(fù)制，以清除體內(nèi)的病原體；間接抑制則是激發(fā)調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫防御系統(tǒng)而發(fā)揮抗病毒作用。且中藥發(fā)揮抗病毒作用并非單一機(jī)制起效，通常是幾種機(jī)制共同作用。中藥復(fù)方的抗病毒效果優(yōu)于單味中藥，而中藥復(fù)方的有效成分眾多，作用機(jī)制復(fù)雜，研究困難，需要綜合分析，運(yùn)用系統(tǒng)的方法進(jìn)行研究，使臨床用藥更有依據(jù)。

中藥 抗病毒機(jī)制 綜述

病毒是一類主要由核酸和蛋白質(zhì)組成的非細(xì)胞型微生物，其感染為病毒侵入人體并在靶器官細(xì)胞中增殖，并與機(jī)體發(fā)生相互作用。具體來說，其致病機(jī)理有:一是可以引起感染細(xì)胞的損傷和死亡；二是使感染的細(xì)胞膜發(fā)生改變，而導(dǎo)致感染細(xì)胞與鄰近未感染細(xì)胞發(fā)生融合；三是病毒感染中的炎性反應(yīng)和免疫病理損傷；四是病毒感染引起的暫時(shí)性免疫抑制。由于病毒對(duì)抗生素不敏感且特效藥少，少數(shù)有一定療效的現(xiàn)代藥物尚不理想。

中醫(yī)藥在防治病毒性疾病方面有豐富的經(jīng)驗(yàn)和完整的理論體系，具有獨(dú)特的優(yōu)越性。中藥抗病毒不只單純著眼于直接的抗病毒作用，更重視“病毒-機(jī)體-中藥”的關(guān)系，不僅直接殺滅病毒，阻止病毒的吸附、穿入、復(fù)制、轉(zhuǎn)染，更重要的是還能增強(qiáng)機(jī)體的免疫力，激發(fā)調(diào)動(dòng)一切的免疫防御系統(tǒng)發(fā)揮抗病毒作用。中藥抗病毒目前大多從中藥中提取的單體、單味中藥及其提取物和中藥復(fù)方制劑三個(gè)方面入手，對(duì)其作用機(jī)制以及臨床應(yīng)用等進(jìn)行深入研究。本文對(duì)近幾年醫(yī)學(xué)界有關(guān)中藥抗病毒作用機(jī)制的研究做了粗略的總結(jié)。從研究來看，中藥抗病毒的作用機(jī)理可分為直接抗病毒作用和間接抗病毒作用。前者主要是阻斷病毒繁殖過程中的某一環(huán)節(jié)阻止其復(fù)制，后者則是激發(fā)調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫防御系統(tǒng)而發(fā)揮抗病毒作用?，F(xiàn)將研究進(jìn)展概述如下。

1 直接抗病毒途徑

此途徑主要是對(duì)病毒的直接滅活作用，以及阻斷病毒增殖過程中的各環(huán)節(jié)而發(fā)揮抗病毒作用。病毒的增殖過程大致可分為吸附、穿入、脫殼、基因組轉(zhuǎn)錄、基因組復(fù)制與基因表達(dá)、裝配、成熟與釋放。此增殖周期中，病毒附于宿主細(xì)胞表面與細(xì)胞表面結(jié)合后穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞，在細(xì)胞溶酶體酶作用下，脫去衣殼蛋白釋放病毒核酸，核酸釋放入細(xì)胞內(nèi)，則進(jìn)入病毒的生物合成階段，包括病毒核酸復(fù)制和基因表達(dá)，最后病毒核酸與蛋白質(zhì)合成之后，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)或細(xì)胞核內(nèi)組裝成成熟的病毒顆粒。根據(jù)病毒增殖過程并結(jié)合中藥抗病毒相關(guān)研究，可將直接抗病毒作用分為三個(gè)階段:

1.1 侵入前抗病毒作用 侵入前抗病毒作用除了對(duì)病毒的直接滅活作用之外，還主要作用于病毒增殖過程中的吸附和穿入兩個(gè)環(huán)節(jié)，通過阻止病毒吸附與穿入，達(dá)到抗病毒效果。此作用機(jī)制可分為兩類:

一類是直接滅活作用:在對(duì)板藍(lán)根提取液抗病毒的雞胚實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)[1]，板藍(lán)根提取液能直接滅活甲1型流感病毒鼠肺適應(yīng)株。王志玉[2]實(shí)驗(yàn)研究表明大黃醇提液中蒽醌類對(duì)單純皰疹病毒有直接的殺滅作用。另外，中藥抗病毒膠囊可使Ⅱ型單純皰疹病毒顆粒變形，大小不均勻，包膜裸露或破損以及病毒顆粒凝集融合成塊，結(jié)構(gòu)模糊不清，從而失去感染活力[3]。復(fù)方金銀花則在體外有較好的抑制Ⅰ型單純皰疹病毒的作用，效果要優(yōu)于無環(huán)鳥苷和鹽酸嗎啉胍，而且能夠增加細(xì)胞對(duì)環(huán)境的耐受力和延長細(xì)胞壽命[4]。

還有一類是阻止病毒的吸附及穿入，從而發(fā)揮抗病毒作用。有研究表明板藍(lán)根主要通過其多糖組分協(xié)同其蛋白組分，作用于細(xì)胞膜表面的唾液酸，與病毒（如流感病毒）產(chǎn)生競爭性吸附，以包被的方式保護(hù)細(xì)胞，有效預(yù)防了病毒對(duì)細(xì)胞的侵害，從而達(dá)到抗病毒的目的[5-6]。有報(bào)道黃芪A6組分阻斷流感病毒吸附感染宿主細(xì)胞的機(jī)制與其抑制流感病毒包膜功能、影響病毒對(duì)敏感細(xì)胞的吸附和穿入密切相關(guān)[7]。

中藥抗病毒活性成分中的黃酮類、多糖及其衍生物、三萜類化合物及其衍生物、生物堿及苷類等，都能通過阻止病毒顆粒對(duì)宿主細(xì)胞的吸附過程，而發(fā)揮抗病毒作用。有人認(rèn)為甘草甜素的抗帶狀皰疹病毒活性可能與抑制病毒顆粒穿入脫殼或釋放有關(guān)，但其確切機(jī)制還不清楚[8]。甘草酸苷抑制HIV-1（Ⅰ型人類免疫缺陷病毒）病毒粒子在CD4+T細(xì)胞中的復(fù)制機(jī)制為甘草酸苷部分地防止了HIV-1吸附到CD4+T細(xì)胞上[9]。甘草甜素抗HSV（單純皰疹病毒）感染機(jī)制之一也可能是通過抗黏附來實(shí)現(xiàn)的，它可以對(duì)抗HSV感染后機(jī)體內(nèi)黏附力和黏附應(yīng)力的變化[10]。黃芩苷能抑制HIV（人類免疫缺陷病毒）與細(xì)胞CD4受體的結(jié)合，主要是通過與轉(zhuǎn)化因子結(jié)合，削弱HIV與細(xì)胞受體的結(jié)合能力，抑制HIV感染人體外周血單個(gè)核細(xì)胞（包含淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等）[11]。

1.2 細(xì)胞內(nèi)抗增殖作用 中藥抗病毒可通過抑制病毒基因組轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄的修飾，抑制病毒基因組核酸的復(fù)制，以及抑制病毒蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運(yùn)來實(shí)現(xiàn)。病毒核酸的復(fù)制需多種病毒酶的協(xié)同合作才能完成，這些病毒酶不同于人體細(xì)胞復(fù)制所需的酶蛋白，尋找這些病毒酶活性抑制劑可以阻斷病毒核酸的復(fù)制。其中抑制病毒基因組活性的酶大致有抑制DNA多聚酶、抑制病毒RNA多聚酶、抑制逆轉(zhuǎn)錄酶、抑制病毒核苷酸還原酶。

段林建等[12]研究結(jié)果表明連翹苷可能通過抑制甲型流感病毒NP與病毒RNA結(jié)合形成NP復(fù)合物，阻礙NP基因復(fù)制，也有可能是抑制NP的轉(zhuǎn)錄水平或NP翻譯后修飾。有研究用MTT法檢測板藍(lán)根抗巨細(xì)胞毒效應(yīng)，結(jié)果認(rèn)為其抗病毒作用的機(jī)制可能與其所含之尿苷、尿嘧啶、次黃嘌呤等成分有關(guān)[13]。板藍(lán)根煎劑與病毒混合存在于培養(yǎng)上清中，其所含嘌呤嘧啶能干擾病毒DNA、RNA的復(fù)制，從而抑制病毒增殖，起到保護(hù)細(xì)胞免受病毒損害的作用。

有人認(rèn)為抑制逆轉(zhuǎn)錄酶活性是抗HIV病毒復(fù)制的重要環(huán)節(jié)[11]，而黃酮類化合物抗HIV病毒主要作用于逆轉(zhuǎn)錄酶和整合。在HIV-1病毒逆轉(zhuǎn)錄酶試驗(yàn)中，黃酮類化合物的多種多羥甲基表現(xiàn)出良好的抗HIV活性。比如黃酮類黃芩素和黃芩苷均有抑制逆轉(zhuǎn)錄酶活性的作用，且黃芩素的作用強(qiáng)于黃芩苷，還有從大戟地上部分得到的槲皮素對(duì)于HIV-1整合酶具有選擇性抑制活性。國外也有研究認(rèn)為，黃酮類化合物可能通過抑制病毒復(fù)制過程信號(hào)傳遞物質(zhì)的活性，阻斷病毒復(fù)制所需的信號(hào)傳遞，進(jìn)而抑制病毒的復(fù)制[14]。蒲公英中抑制甲型H1N1的化學(xué)成分，其作用機(jī)制為通過抑制病毒在狗腎細(xì)胞或人肺腺癌細(xì)胞中的核蛋白質(zhì)的合成并抑制聚合酶活性來抑制病毒的增殖[15]。其對(duì)HIV-1也具有明顯抑制作用，作用機(jī)制為抑制HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶的活性來抑制病毒繁殖[16]。

穿心蓮提取物炎琥寧能夠在病毒復(fù)制過程中通過占據(jù)DNA與蛋白質(zhì)的結(jié)合位點(diǎn)，阻止蛋白質(zhì)對(duì)DNA片段的包裹，從而導(dǎo)致病毒不能正常復(fù)制，同樣屬于抑制病毒的復(fù)制，來抑制人類皰疹病毒[17]。1.3 抗表達(dá)（溢出）再感染作用 此過程主要是阻止病毒由感染細(xì)胞向未感染細(xì)胞浸染。甘草甜素對(duì)VZV（水痘帶狀皰疹病毒）的體外抑制研究表明，病毒感染16h后加入甘草甜素，可抑制病毒從感染細(xì)胞向未感染細(xì)胞的擴(kuò)散[18]。

2 間接抗病毒作用

此途徑主要是指通過增強(qiáng)機(jī)體的免疫力，激發(fā)調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫防御系統(tǒng)來間接發(fā)揮抗病毒的作用，十分符合中醫(yī)“正氣存內(nèi)，邪不可干”的思想。中藥對(duì)機(jī)體免疫具有重要的調(diào)節(jié)作用，各種中藥都是多層次、多途徑、多靶點(diǎn)地作用機(jī)體，識(shí)別自己，排除非己成分，從而維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，提高機(jī)體免疫力。

2.1 免疫促進(jìn)作用

2.1.1 促進(jìn)免疫器官發(fā)育 免疫器官是人體產(chǎn)生免疫反應(yīng)和執(zhí)行免疫功能的組織機(jī)構(gòu)，免疫器官的質(zhì)量與免疫功能密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖可以使正常小鼠脾臟及胸腺的重量增加，還可以糾正燒傷后小鼠脾臟及胸腺的重量減輕，調(diào)節(jié)其免疫功能[19]。

2.1.2 增強(qiáng)免疫細(xì)胞的作用 中藥抗病毒對(duì)T淋巴細(xì)胞、殺傷細(xì)胞和自然殺傷B細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞以及白細(xì)胞等免疫細(xì)胞均有不同程度的影響。中藥免疫增強(qiáng)劑可作用于胸腺淋巴系統(tǒng)，誘導(dǎo)T細(xì)胞分化增殖，形成效應(yīng)細(xì)胞，產(chǎn)生淋巴因子。茅蘇萍等[20]通過對(duì)106例單皰病毒性角膜炎患者黃芪治療前后Th1/Th2細(xì)胞因子水平研究，發(fā)現(xiàn)其能調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞因子的失衡狀態(tài)，上調(diào)Th2細(xì)胞，抑制Th1細(xì)胞，改善患者機(jī)體免疫功能紊亂狀況。蔡小燕等[21]則認(rèn)為黃芪在一定程度上增加了激素/免疫抑制劑對(duì)細(xì)胞凋亡的抑制作用，調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞亞群比例趨于正常。大青葉能促進(jìn)ConA活化的T細(xì)胞分泌IL-2（白細(xì)胞介素-2），輔助Tc細(xì)胞和B細(xì)胞的分化和增殖，調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫和體液免疫功能[22]。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明黃芪多糖可提高小鼠B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)[23]，因而黃芪對(duì)B淋巴細(xì)胞功能也有增強(qiáng)作用。

2.1.3 增強(qiáng)體液免疫 抗病毒體液免疫的主要因素是抗體，分泌型IgA可防止病毒的局部入侵，IgG、IgM可中斷已入侵的病毒通過血液循環(huán)擴(kuò)散。

甘草甜素（GL）可以改善機(jī)體的體液免疫功能，研究發(fā)現(xiàn)GL劑量依賴性地減少血IgE水平，增加IgA、IgG、IgM水平和AchE活性，減少外周血和鼻黏膜P物質(zhì)水平[24]。許多中藥如人參、茯苓、靈芝、山藥、黃精、菟絲子、當(dāng)歸、冬蟲夏草、刺五加等，均具有促進(jìn)體液免疫的功能。

2.1.4 增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用和NK細(xì)胞的殺傷作用 中藥人參中有效成分人參皂苷對(duì)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（RES）吞噬功能有刺激作用[25]，其機(jī)理可能與人參皂苷使巨噬細(xì)胞內(nèi)cAMP含量顯著下降，cGMP顯著升高有關(guān)。黃芪可增加外周血中多核白細(xì)胞的數(shù)量，加強(qiáng)單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)功能，增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞（NKC）和LAK細(xì)胞（淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞）活性，通過對(duì)細(xì)胞免疫功能的雙向調(diào)節(jié)來增強(qiáng)體液免疫，同時(shí)對(duì)補(bǔ)體系統(tǒng)的影響可誘生干擾素等細(xì)胞因子。劉培民[26]通過研究升降散對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的影響，結(jié)果表明升降散水煎液組可促進(jìn)小鼠剛果紅的吞噬，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，提高小鼠的非特異性免疫力。

2.1.5 誘生干擾素（IFN） 干擾素是由細(xì)胞基因組控制的一類誘生蛋白質(zhì)。它具有抗病毒繁殖及腫瘤生長等多種生物活性，是機(jī)體內(nèi)自身產(chǎn)生的一種抵御外來病毒入侵，維持機(jī)體或細(xì)胞功能自穩(wěn)定的防御性物質(zhì)。近年來在中藥研究中發(fā)現(xiàn)一些中藥具有誘生干擾素和促誘生干擾素的作用，其中尤以內(nèi)源性干擾素最多。

有研究表明，黃芪多糖能使動(dòng)物體誘生內(nèi)源性干擾素，作用于細(xì)胞后產(chǎn)生抗病毒蛋白而抑制病毒蛋白合成，從而產(chǎn)生抗病毒感染作用[27]。另有研究者將煎液加入培養(yǎng)的小鼠脾細(xì)胞中，能誘生γ-干擾素。從香菇中提取的香菇素，能誘導(dǎo)血清IFN（干擾素）生成；青蒿素、丹參、刺五加和龍膽草等都能誘生干擾素，而具有抗病毒作用[24]。葛根湯則主要通過增強(qiáng)IFN的活性，抑制白細(xì)胞介素-1α（IL-1α）的產(chǎn)生，在流感早期服用，能快速誘生干擾素抑制病毒顆粒，降低lL-1α水平而控制機(jī)體對(duì)流感病毒感染后所表現(xiàn)的異常亢進(jìn)的病理反應(yīng)。

2.1.6 多種細(xì)胞因子綜合調(diào)節(jié) 機(jī)體內(nèi)自然殺傷細(xì)胞（NK）、干擾素1（IFN-1）和白介素（IL-2）相互作用，形成免疫網(wǎng)絡(luò)，增強(qiáng)抗病毒和免疫調(diào)節(jié)作用。有學(xué)者研究解毒利肺口服液（簡稱JLOL，主要由金銀花、連翹、黃茶、川貝等組成）對(duì)感染病毒機(jī)體免疫系統(tǒng)的影響，運(yùn)用流感病毒鼠肺適應(yīng)株感染小鼠制成病毒性肺炎模型觀察，經(jīng)JLOL治療后，血漿中IL-2及IFN-γ水平均升高，說明該藥可促進(jìn)病毒感染動(dòng)物IL-2及IFN-γ的產(chǎn)生。這兩種細(xì)胞因子均能增強(qiáng)細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）作用，并激活自然殺傷細(xì)胞（NK），從而相互作用形成免疫網(wǎng)絡(luò)[28]。中藥單體虎杖苷、甘草酸、黃芪多糖、野黃芩苷、白藜蘆醇和氧化苦參堿在體外具有良好的抗甲型流感病毒的作用，其抗病毒機(jī)制與調(diào)節(jié)IFN-β1、IL-29等基因的表達(dá)有關(guān)[29]。

2.2 改善病毒所致機(jī)體的不良反應(yīng)和病變 病毒對(duì)細(xì)胞的殺傷作用可導(dǎo)致器官的損傷和功能障礙，所以疾病早期所導(dǎo)致的細(xì)胞損傷是由病毒所引起，后期的機(jī)體炎癥與損傷則由復(fù)雜的免疫病理反應(yīng)所引起。因而病程早期以抗病毒為主，后期則應(yīng)著重修復(fù)機(jī)體損傷，防止繼發(fā)感染。富杭育等[30]對(duì)小鼠灌胃正柴胡飲（由柴胡、陳皮、防風(fēng)、芍藥、甘草、生姜組成），結(jié)果發(fā)現(xiàn)其能顯著抑制流感病毒在鼠肺內(nèi)的增殖及由病毒引起的肺部炎癥，并呈明顯的量效關(guān)系，而且能降低致死量病毒感染小鼠的死亡率，延長存活時(shí)間。

3 結(jié)語

綜上所述，中藥抗病毒是通過直接抑制作用和間接抑制作用來實(shí)現(xiàn)的。直接抑制作用通過對(duì)病毒的直接殺滅或阻止其復(fù)制來清除體內(nèi)的病原體，而間接抑制作用則通過促進(jìn)人體的特異性和非特異性免疫，來增強(qiáng)機(jī)體抵抗病毒的能力。但是中藥在抗病毒過程中并非只是單純一種機(jī)制起作用，通常是幾種作用機(jī)制并存，相互交叉作用的結(jié)果。因而我們要從已經(jīng)篩選并證明有顯著抗病毒作用的中藥中提取抗病毒的有效成分，研究復(fù)方中藥制劑中各中藥成分之間的相互作用和影響。相對(duì)于單味中藥來說，中藥復(fù)方具有更好的抗病毒效果，能更好地反映中藥的辨證論治與組方原則。例如蓮花清瘟顆粒，可以通過綜合抑制作用、對(duì)病毒吸附的預(yù)防作用、抑制病毒吸附后的復(fù)制增殖作用以及直接殺傷病毒的作用，實(shí)現(xiàn)多環(huán)節(jié)抗甲型人流感病毒的目的[31]。因此，中藥抗病毒可以通過藥物的配伍組合應(yīng)對(duì)病情變化，實(shí)現(xiàn)治療的個(gè)體化與整體性。

中藥的藥理作用廣泛而復(fù)雜，化學(xué)成分也不易測定，且其抗病毒機(jī)制為多種途徑綜合作用的結(jié)果。因而中藥抗病毒機(jī)制的研究存在一定的困難性。中藥中的多種有效成分，根據(jù)不同的病理作用，可在多個(gè)方面發(fā)揮直接殺滅病毒、促進(jìn)機(jī)體免疫系統(tǒng)殺傷病毒、減輕病毒對(duì)機(jī)體的損傷等作用。因而在中藥抗病毒機(jī)制方面需要綜合分析，增強(qiáng)對(duì)中藥復(fù)方的認(rèn)識(shí)，運(yùn)用系統(tǒng)的方法進(jìn)行研究，從而為指導(dǎo)中藥抗病毒臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

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R286.87

A

1672-397X（2015）06-0082-04

李慧（1991—），女，碩士研究生，從事中西醫(yī)結(jié)合治療呼吸系統(tǒng)疾病的研究。

賈新華，博士研究生，副主任醫(yī)師。breathcn@163.com

2014-12-09

編輯：傅如海

“泰山學(xué)者”建設(shè)工程專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)資助（ts20110819）