呂楊，董矜

(1.中國(guó)人民解放軍第187中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南海口571159；2.中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院生化科，北京100853)

血清低密度脂蛋白膽固醇Friedwald計(jì)算法與均相法測(cè)定結(jié)果比較

呂楊1，董矜2

(1.中國(guó)人民解放軍第187中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南海口571159；2.中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院生化科，北京100853)

目的探討低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)Friedewald計(jì)算法(F法)與均相法的結(jié)果相關(guān)性。方法調(diào)取進(jìn)行血脂檢測(cè)[包括總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)]的984例空腹標(biāo)本的檢測(cè)數(shù)據(jù)，按TG水平分組比較F法與均相法所得LDL-C的相關(guān)性及其對(duì)血脂水平風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的影響。結(jié)果兩法所得LDL-C的相關(guān)性均良好(R≥0.817)，兩法所得LDL-C的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。隨著TG升高，兩種方法血脂水平分級(jí)的一致性降低。結(jié)論F法計(jì)算LDL-C適用于多數(shù)人群(無乳糜，TG＜4.52 mmol/L)血脂水平的評(píng)價(jià)；F法的準(zhǔn)確使用需嚴(yán)格排除Ⅲ型及繼發(fā)性高脂蛋白血癥。

低密度脂蛋白膽固醇；Friedewald計(jì)算法；均相法；血脂

血清低密度脂蛋白膽固醇(Low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)由一組不均勻的富含膽固醇的脂蛋白顆粒組成，是評(píng)價(jià)心血管危險(xiǎn)因素的一個(gè)重要指標(biāo)，同時(shí)也是進(jìn)行降脂治療的主要參考指標(biāo)[1]。其檢測(cè)的參考方法為超速離心法和沉淀法結(jié)合的BQ (Beta quantification)法[2]。由于BQ法操作繁瑣，臨床日常工作中常采用Friedewald公式[3]計(jì)算(F法)或均相法直接測(cè)定LDL-C。F公式由Friedewald等于1972年提出，根據(jù)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的結(jié)果進(jìn)行計(jì)算，不需其他檢測(cè)試劑，不需附加費(fèi)用。由于F公式計(jì)算LDL-C的方法簡(jiǎn)便和有相當(dāng)?shù)目煽啃?，?dāng)前在我國(guó)較大比率的臨床實(shí)驗(yàn)室仍作為經(jīng)典方法使用；但F法存在一定的局限性，其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度和精密度受到諸多因素的影響[3-5]。其后出現(xiàn)的均相法則使用特定的生化檢測(cè)試劑，隨著檢測(cè)試劑的快速發(fā)展，其檢測(cè)精確度和特異性日益提高[2]。均相法受TG水平升高及實(shí)驗(yàn)室分析性能的干擾較小，具有更好的可靠性，但缺點(diǎn)是成本較高。為降低檢測(cè)成本，同時(shí)保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，研究F法正確使用的限定條件頗有實(shí)用意義[6]。本研究選取日常檢驗(yàn)工作中進(jìn)行血脂檢測(cè)的實(shí)際樣本，探索F法與均相法所得LDL-C結(jié)果的相關(guān)性，并比較兩法對(duì)血脂水平分級(jí)的影響情況。旨在從檢驗(yàn)者角度為F公式計(jì)算法在臨床的正確使用提供參考，在不影響檢測(cè)結(jié)果精確度的基礎(chǔ)上降低醫(yī)療成本。

1 資料與方法

1.1 樣本解放軍總醫(yī)院2013年8月6日和7日進(jìn)行血脂檢測(cè)的門診和住院標(biāo)本共1 000例，均為空腹樣本。以3 500 r/min離心7 min，取血清進(jìn)行檢測(cè)。嚴(yán)格排除含有乳糜(CM)的標(biāo)本及TG＞4.52 mmol/L的標(biāo)本后，共984例標(biāo)本符合按照F公式進(jìn)行計(jì)算的條件。根據(jù)美國(guó)國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃(National Cholesterol Education Program，NCEP)的成人治療專家組第三版中的膽固醇治療指南(Adult Treatment PanelⅢ，ATPⅢ)[1，7]，按照TG的水平，分為總體(所有TG＜4.52 mmol/L，共984例)、TG＜1.70 mmol/L(合適范圍，694例)、1.70 mmol/L≤TG≤2.25 mmol/L(邊緣升高，156例)、2.26 mmol/L≤TG＜4.52 mmol/L(升高，134例)四組。

1.2 方法儀器為羅氏C701全自動(dòng)生化分析儀，試劑為羅氏配套試劑，包括膽固醇(酶比色法)檢測(cè)試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇(酶比色法)檢測(cè)試劑盒、甘油三酯(酶比色法)檢測(cè)試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇(酶比色法)檢測(cè)試劑盒。定標(biāo)采用配套的C.f.a.s多項(xiàng)定標(biāo)液及C.f.a.s脂類定標(biāo)液，質(zhì)控在控。F公式為：LDL-C(mmol/L)=TC-[HDL-C+TG(mmol/L)/2.2][3]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 11.5軟件，選擇配對(duì)t檢驗(yàn)(Paired-sample t test)分析總體樣本及分組樣本F法和均相法所得LDL-C結(jié)果的相關(guān)性。對(duì)LDL-C水平按合適水平(≤2.59 mmol/L)、接近理想(2.60～3.36 mmol/L)、邊緣增高(3.37～4.12 mmol/L)、增高(≥4.13 mmol/L)進(jìn)行分級(jí)是評(píng)價(jià)心血管危險(xiǎn)因素的一個(gè)重要指標(biāo)[1]。本研究對(duì)總體樣本及分組樣本F法和均值法分別進(jìn)行血脂水平分級(jí)，分析F法和均相法對(duì)血脂水平分級(jí)的影響。

2 結(jié)果

2.1 一般情況全部984例樣本年齡2～99歲，為較平坦的負(fù)偏態(tài)分布，40～70歲者占多數(shù)(59.24%)，平均年齡50.64歲(見圖1)。其中男性566例，占57.5%，女性418例，占42.5%。

圖1984 例受試樣本的年齡分布

2.2 兩種方法結(jié)果相關(guān)性圖2為對(duì)總體樣本LDL-C的均相法與F法結(jié)果[(LDL-C(D)，LDL-C(F)]進(jìn)行相關(guān)性分析所得的散點(diǎn)圖。由圖2可見，對(duì)多數(shù)樣本兩種檢測(cè)結(jié)果有很好的相關(guān)性。散點(diǎn)圖趨勢(shì)線的回歸方程為y=0.938 5x+0.133 6，y為F公式計(jì)算值，x為均相法測(cè)定值。按照TG水平，分析總體樣本和各分組樣本相關(guān)系數(shù)的結(jié)果見表1。對(duì)于984例樣本總體，LDL-C(D)與LDL-C(F)間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，兩者間的相關(guān)系數(shù)r=0.880。

圖2 LDL-C的F法與均相法結(jié)果的相關(guān)性分析散點(diǎn)圖

表1 均相法與F法結(jié)果的分組比較±s，mmol/L)

表1 均相法與F法結(jié)果的分組比較±s，mmol/L)

注：LDL-C(F)：Friedewald公式計(jì)算的LDL-C；LDL-C(D)：均相法測(cè)定的LDL-C。

組別( m m o l / L ) T G＜1 . 7 0 1 . 7 0≤T G≤2 . 2 5 2 . 2 6≤T G＜4 . 5 2 T G＜4 . 5 2相關(guān)系數(shù)0 . 8 7 4 0 . 9 7 3 0 . 8 1 7 0 . 8 8 0例數(shù)6 9 4 1 5 6 1 3 4 9 8 4 L D L -C ( D ) 2 . 4 9 8 7 ± 0 . 8 7 2 1 3 . 0 6 9 7 ± 1 . 0 7 8 2 3 . 1 4 5 3 ± 1 . 1 4 8 9 2 . 6 7 7 2 ± 0 . 9 8 7 4 L D L -C ( F ) 2 . 5 2 3 1 ± 0 . 9 1 8 3 2 . 9 4 6 1 ± 1 . 1 3 1 8 2 . 9 3 4 3 ± 1 . 4 3 0 3 2 . 6 4 6 2 ± 1 . 0 5 3 3

2.3 兩種方法對(duì)血脂分級(jí)影響的比較對(duì)984例樣本按照TG水平進(jìn)行分組，考察F法和均相法LDL-C血脂水平分級(jí)的結(jié)果見表2。比較分析可知，984例樣本中85.26%分級(jí)一致，10.47%F法分級(jí)低于均相法，4.27%F法分級(jí)高于均相法。隨著TG水平的升高，兩種方法分級(jí)的一致性不斷降低：當(dāng)TG＜1.70 mmol/L時(shí)，分級(jí)一致性為90.06%；當(dāng)TG為1.70～2.25 mmol/L時(shí)，分級(jí)一致性為80.13%；當(dāng)TG為2.26～4.52 mmol/L時(shí)，分級(jí)一致為66.42%。對(duì)分級(jí)不一致的樣本進(jìn)行具體分析，可以發(fā)現(xiàn)，當(dāng)出現(xiàn)F法分級(jí)低于均相法時(shí)，其偏低的程度為只低1級(jí)，但F法分級(jí)高于均相法時(shí)，可能會(huì)高出1～3級(jí)。984例樣本中分級(jí)差別超過1級(jí)的共有7例，僅占0.711%的極小比例。

表2 空腹樣本在不同的TG水平時(shí)均相法與F法所得LDL-C的差異對(duì)其NCEP分級(jí)一致性的影響(mmol/L)

2.4 兩種方法分級(jí)差異較大的樣本分級(jí)差別超過1級(jí)的7例，在TG＜1.70 mmol/L組有5例，TG為1.70～2.25 mmol/L組有1例，TG為2.26～4.52 mmol/L組有1例，見表3。參考NCEP的標(biāo)準(zhǔn)見表4，具體分析這些數(shù)據(jù)可發(fā)現(xiàn)，7例樣本的其他血脂指標(biāo)(TC、HDL-C)均有一項(xiàng)或兩項(xiàng)存在明顯異常(位于風(fēng)險(xiǎn)區(qū))。

表3 均相法與F法測(cè)定LDL-C差異較大的樣本詳情

表4 NCEP標(biāo)準(zhǔn)參考值(mmol/L)

3 討論

由于LDL-C作為高膽固醇血癥的診斷和評(píng)估心血管疾病危險(xiǎn)性的主要依據(jù)，同時(shí)對(duì)心血管疾病的預(yù)防和治療有重要意義，很多研究者在不同地區(qū)、人群和各種異常脂蛋白血癥病例用LDL-C測(cè)定的國(guó)際參考方法(BQ法)與F公式對(duì)照，對(duì)F公式的可靠性和局限性作出了較客觀和全面的評(píng)價(jià)。同時(shí)也對(duì)近年來建立的均相法與F公式進(jìn)行了比較[8-10]。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與BQ法比較，大部分直接法能達(dá)到NCEP要求的不精密度和不準(zhǔn)確度(1%～3%)，總誤差≤12%。大部分直接法TG＜4.52 mmol/L時(shí)與BQ法之間差別很小。因此，本研究以目前檢測(cè)精確度較高的Roche均相法作為參照，比較F法與Roche均相法所測(cè)得的LDL-C結(jié)果之間的相關(guān)性，為簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)的F法在臨床的正確使用提供指導(dǎo)。結(jié)果表明，排除含有CM標(biāo)本及TG＞4.52 mmol/L的標(biāo)本后，F(xiàn)法與均相法檢測(cè)結(jié)果間的相關(guān)性良好(r=0.880)。對(duì)多數(shù)樣本(85.26%)的ATPⅢ分級(jí)一致，即F公式計(jì)算LDL-C屬正確分級(jí)的占85.26%。隨著TG水平的升高，兩種方法分級(jí)的一致性不斷降低。當(dāng)TG為2.26～4.52 mmol/L(升高)時(shí)，分級(jí)一致性顯著降低(66.42%)，與以往的研究結(jié)果一致[11-12]。當(dāng)兩種方法分級(jí)差別僅為1級(jí)時(shí)，其臨床影響不大，分級(jí)差別為2～3級(jí)時(shí)，其差異較有臨床意義。本研究中984例樣本中分級(jí)差別超過1級(jí)的僅占0.711%的極小比例?？芍?，排除含有CM標(biāo)本及TG＞4.52 mmol/L的標(biāo)本后，F(xiàn)法檢測(cè)結(jié)果的可靠性與均相法基本相當(dāng)。

進(jìn)一步分析兩種方法所得LDL-C分級(jí)不一致的標(biāo)本，其差異與多種因素相關(guān)。首先，F(xiàn)公式的原理是根據(jù)血清中TC、TG、HDL-C之間的濃度關(guān)系得出的經(jīng)驗(yàn)公式，通過計(jì)算得到LDL-C濃度的計(jì)算公式為L(zhǎng)DL-C(mmol/L)=TC-HDL-C-TG/2.2。F公式計(jì)算法假設(shè)VLDL-C/TG之比2.2是恒定不變的。事實(shí)上，大量研究指出[6]，F(xiàn)公式的誤差不僅局限于TG＞4.52 mmol/L的標(biāo)本。TG＜4.52 mmol/L時(shí)，隨著TG濃度增加，VLDL中TC/TG的比例下降，F(xiàn)公式計(jì)算LDL-C的可靠性不可避免地降低。本研究中同樣發(fā)現(xiàn)，2.26≤TG＜4.52組，F(xiàn)法與均相法的分級(jí)一致率顯著降低(66.42%)，進(jìn)一步驗(yàn)證了以上結(jié)論。繼發(fā)性高脂蛋白血癥時(shí)，TG增高，VLDL-C/TG的比例變化較大，其他脂蛋白中TG含量也增多，使F公式的準(zhǔn)確性降低。大部分文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)F公式對(duì)糖尿病患者有較大的誤差，F(xiàn)公式明顯低估LDL-C，特別是TG＞2.26 mmol/L標(biāo)本，結(jié)論是F公式不適用于治療中血脂異常的糖尿病患者[3，13]。酒精性肝損害患者血清LDL、HDL中TG含量增加，VLDL-C/TG下降，F(xiàn)公式使VLDL-C假性升高，低估LDL-C[4]。輕微肝損害患者和肝硬化患者偏差均會(huì)出現(xiàn)低估LDL-C的情況。腎衰的終末期常見VLDL和LDL增高，F(xiàn)公式也不適用。其次，Ⅲ型高脂蛋白血癥血清中富含IDL和VLDL殘粒，這些顆粒中所含的膽固醇比率較其他脂蛋白高，使F公式產(chǎn)生較大的誤差。再次，F(xiàn)公式由TC、TG和HDL-C 3個(gè)變量計(jì)算而得，即使3項(xiàng)測(cè)定的技術(shù)性能均符合NCEP目標(biāo)，3項(xiàng)測(cè)定誤差的累計(jì)總和可能超過LDL-C要求的技術(shù)性能(NCEP性能目標(biāo)為L(zhǎng)DL-C不準(zhǔn)確性≤±4%，總誤差≤12%)。美國(guó)CAP綜合化學(xué)調(diào)查約1 150實(shí)驗(yàn)室的平均變異為12%。NCEP專家組觀察在有經(jīng)驗(yàn)、很好標(biāo)準(zhǔn)化的脂質(zhì)實(shí)驗(yàn)室，F(xiàn)公式計(jì)算LDL-C的總分析變異2.7%～6.8%。

對(duì)于門診和住院患者，檢驗(yàn)科對(duì)患者的以上相關(guān)信息(繼發(fā)性高脂蛋白血癥、Ⅲ型高脂蛋白血癥)不一定能掌握，并且檢驗(yàn)科每天需處理大量的標(biāo)本，逐個(gè)檢查其診斷的詳細(xì)信息不具有可行性。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，兩種方法LDL-C結(jié)果血脂分級(jí)情況差別較大的樣本，都有比較明顯的血脂異常，即TC處于高水平，同時(shí)HDL-C明顯偏低，可在實(shí)驗(yàn)室將這些樣本甄別出來另行處理。因此，可行的方法是改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室TC、 TG和HDL-C的分析性能，并在生化儀或?qū)嶒?yàn)室信息管理軟件里面設(shè)定好復(fù)檢規(guī)則，對(duì)脂蛋白異常的樣本采用直接法檢測(cè)LDL-C。

綜上所述，本研究認(rèn)為，在分析性能較高的檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室，可用Friedewald公式計(jì)算作為L(zhǎng)DL-C的常規(guī)檢測(cè)手段。但若檢測(cè)出膽固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白膽固醇有顯著異常的標(biāo)本，則改用均相法測(cè)定。從而在保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性的基礎(chǔ)上有效減少醫(yī)療費(fèi)用支出。

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Comparison of low-density lipoprotein cholesterol concentrations measured by a direct homogeneous assay and by the Friedewald formula.

LV Yang1,DONG Jin2.1.Department of Clinical Laboratory,the 187thHospital of Chinese PLA,Haikou 571159,Hainan,CHINA;2.Department of Biochemistry,the PLA General Hospital,Beijing 100853, CHINA

ObjectiveTo compare the low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C)concentrations measured by a direct homogeneous assay and by the Friedewald formula.MethodsA total of 984 routine samples with triglyceride(TG)concentrations＜4.52 mmol/L were enrolled for blood lipids examination,including total cholesterol(TC), triglyceride(TG),high density lipoprotein cholesterol(HDL-C),LDL-C.LDL-C were measured by both enzymatic homogeneous assay(LDL-C(D))and Friedewald formula(LDL-C(F)).Correlation and linear regression analysis were performed,and the concordance of the National Cholesterol Education Program(NCEP)risk category was estimated by paired-samples t test.ResultsCorrelation between LDL-C(D)and LDL-C(F)was quite good(R≥0.817).The difference between LDL-C(F)and LDL-C(D)was not statistically significant(P＞0.05).The concordance between LDL-C (F)and LDL-C(D)declined as TG increased.ConclusionFriedewald formula is valid for the estimation of most TG＜4.52 mmol/L specimen without chyle。Patients with typeⅢor secondary hyperlipoproteinemia should be screened to ensure the accuracy of Friedewald method.

Low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C);Friedewald formula;Homogeneous assay;Blood lipid

R446

A

1003—6350（2015）01—0064—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.01.0020

2014-06-15)

呂楊。E-mail:lvyounger@126.com