雷 艷，郭洪峰，侯曉宇，楊愛軍，蘭陽軍，蔣登金，文 燦 (第三軍醫(yī)大學(xué)衛(wèi)勤訓(xùn)練基地醫(yī)學(xué)綜合教研室，重慶400038)

鼠(包括大鼠、豚鼠、小鼠、裸鼠等)是科學(xué)研究中常用的實驗動物，廣泛應(yīng)用于構(gòu)建各種動物模型和藥物學(xué)、行為學(xué)研究等領(lǐng)域［1］。在眾多的鼠類實驗研究過程中，常需對其實施科學(xué)、有效的麻醉，且多采用腹腔注射給藥方式［2］。戊巴比妥鈉是動物實驗的常用麻醉藥物，具有給藥簡便、起效快、麻醉效果好且較為持久等優(yōu)點［3-4］，但該藥具有較強的呼吸抑制作用，有效劑量和致死劑量之間的安全范圍較小，容易引起動物死亡［5］。而鼠的體質(zhì)量小，小鼠不到30 g，有的僅10 g 多甚至不到10 g，因此，使用戊巴比妥鈉麻醉時非常容易引起鼠死亡，影響實驗順利進行和結(jié)果分析。本文針對鼠戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉的各環(huán)節(jié)，詳細(xì)描述其操作細(xì)節(jié)，以期為正確掌握此麻醉技巧提供操作指導(dǎo)。

1 戊巴比妥鈉溶液的準(zhǔn)備

1.1 濃度的選擇

關(guān)于戊巴比妥鈉溶液的濃度，各實驗室常有其習(xí)慣用法，如3.0%、1.0%、0.3%等［6］。對鼠(尤其是小鼠)進行麻醉時，若無注射溶液量影響實驗數(shù)據(jù)的情況(如血液稀釋后影響血生化指標(biāo))，筆者強烈推薦采用0.3%的濃度。采用這一濃度時，安全范圍較大，且易于計算溶液量，也便于在追加藥物后掌握注射總量，減小計量誤差，這與梅福榮的觀點一致［7］。麻醉時若按30 mg/kg 體質(zhì)量實施基礎(chǔ)給藥，則該濃度溶液的給藥劑量為1.0 mL/100 g 體質(zhì)量。例如，150 g 大鼠的給藥量為1.5 mL;25 g 小鼠的給藥量為0.25 mL(用1.0 mL 注射器幾乎可以做到精確抽取，即使注射略多也不易造成死亡)。

1.2 配制方法

戊巴比妥鈉為白色粉末，用蒸餾水或0.9%生理鹽水溶液配制均可。配制時稱取戊巴比妥鈉0.3 g，用80 mL 0.9%生理鹽水溶解，充分?jǐn)嚢韬蠖ㄈ葜?00 mL 即可。

1.3 注意事項

注意事項:①現(xiàn)配現(xiàn)用。戊巴比妥鈉水溶液不穩(wěn)定，放置時間較長后容易析出結(jié)晶，從而導(dǎo)致濃度變化，引起計量誤差。②根據(jù)實驗需求確定配制總量。不同廠家(甚至不同批號)戊巴比妥鈉的麻醉效果可能有所差異，不同批次配制的藥液麻醉效果可能也有所不同。為減少不同時間配置的溶液間麻醉效果的差異，最好一次性配足一次實驗所需的藥液［8］。③使用前先驗證麻醉效果。實驗中的某些關(guān)鍵鼠，如昂貴或難以獲得的轉(zhuǎn)基因小鼠、已經(jīng)過6 個月甚至1 年以上的長時程鼠、建模成功率極低的鼠等，若發(fā)生麻醉意外而導(dǎo)致死亡，則可能對實驗進程造成嚴(yán)重影響。為此，在給藥前先驗證藥物的麻醉效果十分重要。可通過試麻醉體質(zhì)量相近的普通鼠，掌握所配戊巴比妥鈉溶液的準(zhǔn)確有效劑量。在每次使用新配置的溶液前，均應(yīng)先驗證其麻醉效果，減少麻醉意外的發(fā)生。

2 鼠腹腔注射麻醉的步驟與方法

2.1 抽取適量的戊巴比妥鈉溶液

準(zhǔn)確稱量鼠的體質(zhì)量，計算出基礎(chǔ)給藥的溶液量(0.3%戊巴比妥鈉溶液按1.0 mL/100 g 體質(zhì)量計算)，選用適當(dāng)?shù)淖⑸淦?通常大鼠用5.0 mL 注射器，小鼠用1.0 mL 注射器)，按照計算結(jié)果抽取等量藥液后備用。這種根據(jù)計算結(jié)果備好藥液，在麻醉時將其全部注入的方法，比先抽取較多的藥液而在麻醉時再計算注入量要準(zhǔn)確、簡便。

2.2 抓取待麻醉鼠

安全地抓取并固定鼠是注射麻醉藥物的必要措施。本文推薦以下操作方法，既安全又便于操作。大鼠的抓取方式(圖1):左手提起大鼠尾巴，讓其前爪抓住鼠籠，大鼠會向前爬，右手順勢用環(huán)鉗夾住其項部皮膚，拉直大鼠置于左手并夾住其一側(cè)后肢，此時大鼠頭部無法卷回咬到實驗人員手部;翻轉(zhuǎn)大鼠使其腹部向上，頭放低，內(nèi)臟移向上腹。小鼠的抓取方式(圖2):左手拇指、示指捏住小鼠項部皮膚，將小鼠置于左手掌，無名指和小指壓住小鼠后肢及尾部。

2.3 腹腔注射戊巴比妥鈉溶液

右手將備好麻醉溶液的注射器以約40°角斜刺入鼠右/左下腹外側(cè)部(圖3)，適當(dāng)退針并回抽后注入藥液。

圖1 抓取大鼠的方法

圖2 抓取小鼠的方法

圖3 鼠腹腔麻醉的注射方法

2.4 注意事項

腹腔注射麻醉應(yīng)注意:①進針及推注藥液時保持鼠頭低位，使其內(nèi)臟前移，減小損傷概率［9］。②進針部位要恰當(dāng)。因抓取時鼠的一側(cè)后肢被向后拉伸，故進針點應(yīng)選在后拉側(cè)腹中線靠外部位(即下腹部)，切忌靠前，否則在傾斜進針時容易傷及肝臟甚或膈肌。③進針后應(yīng)適當(dāng)退針并回抽，避免將藥液推入腸管、膀胱或胃等處。④推液動作一氣呵成。因注射前已充分掌握藥物麻醉效果，給藥量是依照動物體質(zhì)量計算所得，且藥物通過腹膜吸收發(fā)揮作用而非直接進入血液，故推注過程不宜過于緩慢，以免鼠掙扎而使推液中斷。⑤推注過程中，若鼠掙扎而導(dǎo)致部分戊巴比妥鈉溶液外流，無法準(zhǔn)確計算已注入溶液量時，勿盲目追加。對于珍貴的、長時相實驗鼠，最好待其清醒后再重新計量進行麻醉。⑥腹腔注射后10 ～15 min 即可達到麻醉效果，如不滿意，可適量追加藥物。若使用0.3%的戊巴比妥鈉溶液，大鼠每次可追加0.2 mL，一般情況下追加次數(shù)不超過2 次均較為安全;小鼠追加量不能超過0.05 mL。⑦若注射總量已達到計算所得基礎(chǔ)劑量的1.25 倍，但麻醉效果仍不好，應(yīng)考慮藥液是否注入皮下、肌肉、腸管、膀胱或被局限在某部，從而導(dǎo)致藥液吸收緩慢，影響麻醉效果。此時不可繼續(xù)追加藥物，否則容易引起鼠死亡。

3 麻醉后觀察

戊巴比妥鈉有顯著的中樞抑制作用，尤其對呼吸中樞抑制明顯［5］。腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉后，應(yīng)重點觀察鼠的呼吸。一旦發(fā)現(xiàn)鼠呼吸微弱或暫停，應(yīng)立即擠壓胸廓，持續(xù)數(shù)分鐘，多能使其恢復(fù)呼吸。在擠壓胸廓的同時還可注射呼吸興奮劑，如美解眠、尼可剎米等。

總之，只要做到對所配制戊巴比妥鈉溶液的麻醉效果心中有數(shù)，熟練掌握腹腔注射技巧，就能安全、快速地對鼠實施麻醉，保障實驗的順利進行。

［1］Hudson M，Balls M.European experimental animal use declines ever so slightly［J］.Altern Lab Anim，2010，38(6):529 －532.

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［4］周小林，雷 艷，侯曉宇，等.手術(shù)教學(xué)中動物犬的麻醉效果觀察［J］.局解手術(shù)學(xué)雜志，2010，19(6):541.

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