高 瞻 陳 強(qiáng) 黎中寶 ① 李文靜 黃永春 徐安樂(lè) 楊 敏

(1.集美大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院 廈門 361021;2.福建省海洋漁業(yè)資源與生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 廈門 361021)

花鱸(Lateolabrax japonicus)又稱鱸魚、七星鱸等,屬硬骨魚綱(Osteichsthyes)、鱸形目(Perciformes)、鮨科(Servanidae)、花鱸屬(Lateolabrax)?；|是廣溫廣鹽性魚類,在日本、朝鮮沿海以及我國(guó)沿岸海域均有分布(張春丹等,2005)?；|肉質(zhì)爽滑鮮美,味道可口。其生長(zhǎng)快,適應(yīng)能力強(qiáng),淡海水均能養(yǎng)殖,是一種經(jīng)濟(jì)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高的魚類,也是我國(guó)重要的養(yǎng)殖魚類。迄今關(guān)于花鱸的營(yíng)養(yǎng)研究主要有魚粉替代(Hu et al,2013)、維生素需求量(張璐等,2015)以及添加玉米蛋白粉(Men et al,2014)等,但關(guān)于滸苔對(duì)花鱸的營(yíng)養(yǎng)研究還未見報(bào)道。

近幾十年來(lái),我國(guó)作為世界水產(chǎn)大國(guó),隨著集約化水平的不斷提高,水產(chǎn)品的產(chǎn)量大大超過(guò)了全球生產(chǎn)總量的1/3,長(zhǎng)達(dá)60年之久的海水魚人工養(yǎng)殖已取得巨大成就(Hong et al,2003;Cao et al,2015)。但漁業(yè)的過(guò)度開發(fā)與利用已經(jīng)引發(fā)了一系列問(wèn)題,如魚類病害,藥物殘留以及環(huán)境污染等。研究新型綠色抗病促長(zhǎng)添加劑開始日益得到關(guān)注,也已經(jīng)成為調(diào)節(jié)魚體營(yíng)養(yǎng)、增強(qiáng)魚體免疫性的有效途徑(黎中寶,2004)。

滸苔(Enteromorpha prolifera)俗稱苔條、青海苔等,屬于大型綠藻,隸屬于綠藻門(Chlorophyta)、石莼目(Ulvales)、石莼科(Ulvaceae)、滸苔屬(Enteromorpha)(Hiraoka et al,2003;楊歡等,2013)。滸苔營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)極其豐富,富含氨基酸、礦質(zhì)元素等,具有極高的藥用和食用價(jià)值。近年來(lái),海洋環(huán)境污染加劇,滸苔大量繁殖,綠潮頻頻暴發(fā)(Nelson et al,2008)。綠潮的頻發(fā)不僅會(huì)改變海洋生態(tài)環(huán)境和海洋生物多樣性,還會(huì)嚴(yán)重污染水質(zhì)。因此,如何使得滸苔資源被合理有效利用,改善生態(tài)環(huán)境問(wèn)題,非常值得研究。而國(guó)內(nèi)外也已經(jīng)有一系列關(guān)于滸苔作為飼料添加劑在養(yǎng)殖業(yè)中的報(bào)道,如虹鱒(Oncorhynchus mykiss)(Onder et al,2009),大黃魚( Larimichthys crocea)幼魚(Asino et al,2011),大菱鲆(Scophthalmus maximus)(盧青等,2015)以及梭魚(Liza haematocheila)(閆杰等,2012)等。以上研究均表明,飼料添加滸苔對(duì)水生動(dòng)物具有顯著促長(zhǎng),增強(qiáng)免疫力的作用。而滸苔在花鱸中的應(yīng)用研究未見報(bào)道。故本試驗(yàn)利用發(fā)酵滸苔作為添加劑,探求其對(duì)花鱸生長(zhǎng)、消化以及免疫性能的影響,為發(fā)酵滸苔在鱸魚飼料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

發(fā)酵技術(shù)是指利用工程技術(shù)手段,直接用微生物參與,或者利用菌體細(xì)胞或酶的某些功能,通過(guò)其代謝活動(dòng)將底料轉(zhuǎn)化成我們所需要的產(chǎn)物的一項(xiàng)技術(shù)(祝玉洪等,2013)。我國(guó)利用微生物發(fā)酵來(lái)釀酒早有應(yīng)用,后在中草藥也有大量研究。隨著發(fā)酵技術(shù)的日益成熟,發(fā)酵技術(shù)在飼料行業(yè)中應(yīng)用越來(lái)越廣泛。因其可以增加原料風(fēng)味、改善適口性、提高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值而受到歡迎。本試驗(yàn)初步嘗試開發(fā)利用發(fā)酵滸苔,這對(duì)使?jié)G苔成為具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的海藻類飼料也有著重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)用魚及馴養(yǎng)

試驗(yàn)所用花鱸購(gòu)于福建省漳浦縣錦興育苗場(chǎng)。置于集美大學(xué)海水試驗(yàn)場(chǎng)循環(huán)過(guò)濾桶(1200L)中暫養(yǎng)14d。期間每天兩次定時(shí)(7: 30—8: 00,16: 30—17: 00)投喂基礎(chǔ)飼料,并逐漸將其淡化至純淡水養(yǎng)殖。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)飼料

花鱸所用基礎(chǔ)飼料購(gòu)于廈門市嘉康飼料廠,其主要成分包括魚粉、豆粕、面粉、卵磷脂、維生素和礦物質(zhì)等(主要營(yíng)養(yǎng)成分見表 1)。所選用的滸苔于2014年3—5月從廈門龍舟池采集,將采集到的滸苔用海水沖洗干凈,自然晾干。直至滸苔表面無(wú)水分后置于 60°C烘箱中進(jìn)行烘干,之后在冷凍超微粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎,過(guò)200目篩制得粉碎好的滸苔粉。將粉碎好的滸苔粉加入 2‰的二型飼料發(fā)酵助劑(購(gòu)于北京華夏康源科技有限公司),1%的玉米粉作為能量飼料,同時(shí)加入65%的蒸餾水,裝入規(guī)格為350*450mm,厚度為10絲的發(fā)酵袋內(nèi),密封發(fā)酵3—4 d。得到的發(fā)酵滸苔閉封保存?zhèn)溆?。將發(fā)酵滸苔與基礎(chǔ)飼料按等差數(shù)列設(shè)計(jì)成比例,按逐級(jí)擴(kuò)大法混勻,利用催化成型機(jī)配制成對(duì)照組(0%)、Diet 1(1%)、Diet 2(2%)、Diet 3(3%)、Diet 4(4%)、Diet 5(5%)六種不同發(fā)酵滸苔添加水平的顆粒型飼料,風(fēng)干2—3 d,于自封袋內(nèi)–20°C冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 基礎(chǔ)飼料配方(%干重)Tab.1 Formulation and proximate composition of the basal diet (% dry matter)

1.3 飼養(yǎng)管理

在暫養(yǎng)結(jié)束后挑選出體格健壯、規(guī)格一致的花鱸苗540尾[初始體重為(6.40±0.14)g],隨機(jī)分配到18個(gè)設(shè)有循環(huán)過(guò)濾水系統(tǒng)的玻璃水族缸(40cm × 40cm × 70cm)中,共分為6個(gè)處理組,每處理組3個(gè)重復(fù)。在試驗(yàn)期間每天同樣兩次定時(shí)(7: 30—8: 00,16: 30—17: 00)飽食投喂。喂食 30min后收集殘餌,烘干,稱量,確保得到準(zhǔn)確飼料攝入量。然后吸糞換水,保持24h不間斷充氣增氧。試驗(yàn)期間水溫(26±1)°C、pH(8.0±0.2)、溶氧≥7 mg/L、氨氮濃度＜0.2 mg/L。每天觀察記錄花鱸攝食與生長(zhǎng)狀況,記錄水溫以及死亡情況。

1.4 樣品采集及處理

飼喂28d后,將花鱸饑餓24h,采用丁香酚麻醉,對(duì)各試驗(yàn)缸魚進(jìn)行整體稱重和計(jì)數(shù)。每缸隨機(jī)撈取5尾魚測(cè)體質(zhì)量和體長(zhǎng),采用 1mL無(wú)菌注射器對(duì)其進(jìn)行尾部靜脈取血。將收集得到的血樣靜置 12h后在3000r/min條件下離心 10min,收集上層血清置–80°C冰箱保存用于分析血清生化指標(biāo)。同時(shí)將其進(jìn)行解剖,快速分離肝臟,胃,腸道。將肝臟稱重以計(jì)算肝體指數(shù),然后分裝入凍存管投入液氮后轉(zhuǎn)移至–80°C冰箱中保存?zhèn)溆?。每缸隨機(jī)選取3只花鱸保存于–80°C冰箱用于全魚體成分的測(cè)定。

1.5 測(cè)定指標(biāo)

1.5.1 生長(zhǎng)指標(biāo)分析 對(duì)試驗(yàn)魚生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定時(shí)所用公式為:

1.5.2 體成分分析分析 魚體稱濕重后于70°C烘至恒重,再次稱重。水分的測(cè)定采用105°C常壓烘箱干燥恒重法。將烘干的魚體絞碎,采用半微量凱氏定氮法(總氮×6.25)測(cè)粗蛋白;索氏抽提法(乙醚為抽提液)測(cè)粗脂肪;馬福爐灼燒法(550°C)測(cè)灰分。

1.5.3 腸、胃消化酶活性測(cè)定 將胃和腸道稱重,按1 : 9 (V/W)加入4°C的0.85%生理鹽水,在冰水浴中勻漿 5min。采用低溫高速離心機(jī)(4°C,3000r/min,15min)對(duì)勻漿液進(jìn)行離心,吸取上清于–80°C冰箱保存待測(cè)消化酶。測(cè)定指標(biāo)有胰蛋白酶、胃蛋白酶、腸、胃道淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)活性,測(cè)定所用相應(yīng)試劑盒均由南京建成生物工程研究所生產(chǎn),操作步驟按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.5.4 血清、肝臟免疫酶活性測(cè)定 將肝臟稱重,加入9倍體積(V/W)的85%生理鹽水(4°C),用勻漿器冰水浴勻漿5 min,再用低溫高速冷凍離心機(jī)3000 r/min離心15 min,取上清液制成20%的組織勻漿。測(cè)定指標(biāo)有血清、肝臟總超氧化物歧化酶(T-SOD)、溶菌酶(LZM)和堿性磷酸酶(AKP)活性均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的相應(yīng)試劑盒測(cè)定,操作步驟按照說(shuō)明書進(jìn)行。

1.5.5 統(tǒng)計(jì)方法 試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA),利用Duncan法進(jìn)行多重比較,取顯著水平P＜0.05。試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤進(jìn)行表示。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸生長(zhǎng)性能的影響

發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸生長(zhǎng)性能影響見表 2,飼料中添加發(fā)酵滸苔顯著提高了花鱸的增重率和特定生長(zhǎng)率(P＜0.05)(表 3)。生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明添加水平在 Diet 2(2%)時(shí)增重率和特定生長(zhǎng)率達(dá)到最大,比對(duì)照組分別顯著提高了45.2%、18.2% (P＜0.05),但添加組與對(duì)照組相比不存在顯著差異(P＞0.05)。隨發(fā)酵滸苔添加濃度的上升,各實(shí)驗(yàn)組花鱸飼料系數(shù)呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢(shì),Diet 3(3%)組花鱸的飼料系數(shù)顯著低于對(duì)照組 16.6% (P＜0.05)。各組肥滿度均無(wú)顯著差異(P＞0.05),各組存活率均為100%。

由表3可知,以特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)為指標(biāo)作最佳擬合曲線,花鱸魚飼料中發(fā)酵滸苔的最佳添加水平分別為2.91%、2.71%。

表2 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸生長(zhǎng)的影響Tab.2 Effects of fermented E.prolifera on the growth performance of L.japonicus

表3 擬合方程: 以特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)為指標(biāo)Tab.3 SGR,FCR of Fitting equations

2.2 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸魚體成分的影響

由表4可知: 添加發(fā)酵滸苔可適當(dāng)降低魚體中的水分,提高灰分含量但并不顯著(P＞0.05)。同時(shí)各添加組的粗脂肪和粗蛋白含量均高于對(duì)照組,各添加組之間并無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。

2.3 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸胃、腸道消化酶活性的影響

由表 5可以看出,在發(fā)酵滸苔添加濃度為 2%—3%時(shí)胰蛋白酶,腸淀粉酶,腸脂肪酶活性明顯高于其余各組(P＜0.05),隨著添加濃度的繼續(xù)上升,呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì)。胰蛋白酶在添加水平Diet 2(2%)時(shí)活性達(dá)到最高。腸淀粉酶和脂肪酶則在Diet 3(3%)時(shí)達(dá)到最高,處理組各組差異不顯著(P＜0.05),且均高于對(duì)照組(P＞0.05)。

花鱸攝食試驗(yàn)料后對(duì)胃中消化酶活性影響見表5,添加組中花鱸胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶均得到顯著的提高(P＜0.05),且隨著發(fā)酵滸苔添加濃度的上升呈現(xiàn)先上升后下降的趨在添加水平為 Diet 3(3%)時(shí)胃蛋白酶活性最高,且各處理組與對(duì)照組差異性顯著(P＜0.05)。各組定粉酶,脂肪酶在添加水平為Diet 2(2%)時(shí)活性最高,各添加組均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),但各添加組之間的脂肪酶并無(wú)顯著差異(P＞0.05)。在發(fā)酵滸苔添加量為 2%—3%濃度范圍時(shí)花鱸的胃消化酶活性達(dá)到最高且顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。

表 6為以各消化酶為指標(biāo)所得出的擬合曲線方程,由表可知花鱸魚飼料中發(fā)酵滸苔的最佳添加水平為2.50%—3.00%。

表4 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸體成分的影響(濕重%)Tab.4 Effects of fermented E.prolifera on the whole-body composition of L.japonicus (wet weight %)

表5 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸消化酶的影響Tab.5 Effects of fermented E.prolifera on the activities of digestive enzymes of L.japonicus

2.4 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸血清、肝臟中免疫酶活性的影響

發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸血清免疫酶的活性影響見表7。由表可知,飼料中添加發(fā)酵滸苔可提高處理組鱸魚血清的堿性磷酸酶活性,在Diet 2(2%)組活性達(dá)到最大,但差異不顯著(P＞0.05)。隨著添加發(fā)酵滸苔濃度的不斷增高,鱸魚血清中溶菌酶的活性呈現(xiàn)先上升后逐漸下降的趨勢(shì),在 Diet 2(2%)組活性達(dá)到最大,并且顯著高于其余各組(P＜0.05)。添加組血清中總超氧化物歧化酶活性顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),但添加組各組之間差異不顯著(P＜0.05)。

表6 擬合方程: 以消化酶活性為指標(biāo)Tab.6 Activities of digestive enzymes of Fitting equations

表7 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸血清免疫酶的影響Tab.7 Effects of fermented E.prolifera on the immune response of L.japonicus

由表8可知,飼料中添加發(fā)酵滸苔可顯著提高添加組鱸魚肝的堿性磷酸酶活性(P＜0.05),在Diet 2(2%)組活性達(dá)到最大,但各添加組之間差異不顯著(P＞0.05)。在添加濃度為 2%—3%之間花鱸肝的溶菌酶活性顯著高于其余各組(P＜0.05),其余添加組與對(duì)照組之間不存在差異性(P＞0.05)。隨著添加發(fā)酵滸苔濃度的不斷增高,鱸魚肝中總超氧化氫歧化酶的活性呈現(xiàn)先上升后逐漸下降的趨勢(shì),在Diet 2(2%)組活性達(dá)到最大,并且顯著高于其余各組(P＜0.05)。

表 9為以各免疫酶為指標(biāo)所得出的擬合曲線方程,由表可知花鱸魚飼料中發(fā)酵滸苔的最佳添加水平為2.41%—3.00%。

表8 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸肝的免疫酶影響Tab.8 Effects of fermented E.prolifera on the immune response of L.japonicus

表9 擬合方程: 以免疫酶活性為指標(biāo)Tab.9 Immune response of Fitting equations

3 討論

3.1 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸生長(zhǎng)的影響

滸苔是一種優(yōu)質(zhì)的大型天然海藻,含有豐富的蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)、維生素等,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值及其利用率都非常高。Asino等(2011)研究了飼料中添加滸苔對(duì)大黃魚幼魚生長(zhǎng)的促進(jìn)作用,研究結(jié)果表明添加滸苔可以顯著提高其特定生長(zhǎng)率,存活率均達(dá)到 97%以上。閆杰等(2012)在餌料中添加滸苔探究對(duì)梭魚(Liza haematocheila)生長(zhǎng)效果影響,結(jié)果表明添加滸苔組可以顯著提高梭魚的特定生長(zhǎng)率,降低飼料系數(shù)。王曉蘭等(2014)在大菱鲆(Scophthalmus maximus)配合飼料中添加復(fù)方中草藥提取液、L-甘氨酸和干滸苔粉,結(jié)果表明滸苔添加組的大菱鲆的增重率得到了提高。在本試驗(yàn)中,滸苔添加組顯著提高了鱸魚的生長(zhǎng)性能,并且在一定添加濃度內(nèi),鱸魚的增重率和特定生長(zhǎng)率逐漸上升,其原因可能是由于滸苔蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸含量高,脂肪含量低,且含有生物活性物質(zhì)如多糖、萜類和甾體等(李曉等,2013),具有增強(qiáng)免疫力,調(diào)節(jié)機(jī)體代謝,促進(jìn)鱸魚生長(zhǎng)的作用。Y?ld?r?m等(2009)探究了將10%的滸苔粉作為配合飼料添加對(duì)虹鱒(Oncorhynchus mykiss)生長(zhǎng)效果的影響,結(jié)果表明添加 10%滸苔粉會(huì)降低魚的生長(zhǎng)速度和飼料利用率。在Yousif等(2004)對(duì)黃斑藍(lán)子魚飼料中添加滸苔的研究中也發(fā)現(xiàn)在添加量為 10%時(shí)可以提高魚體增重率。但隨著添加量由10%、20%到30%的增加,魚體的增重率、生長(zhǎng)效率會(huì)逐漸降低,同時(shí)提高飼料系數(shù)。這些結(jié)果與本試驗(yàn)中得到的一致。雖然在本試驗(yàn)中發(fā)酵滸苔的添加量最高只達(dá)到 5%,但隨著滸苔添加量的增多而降低原因可能是由于添加量過(guò)大而降低了飼料適口性所致,但具體研究機(jī)制仍需進(jìn)一步探索。楊春花等(2012)對(duì)海藻粉進(jìn)行發(fā)酵后再添加到基礎(chǔ)日糧中飼喂 1日齡櫻桃谷肉鴨(Cherry Valley Ducks),研究結(jié)果表明其大大高肉鴨采食量、日增重以及降低飼料系數(shù)。本試驗(yàn)對(duì)滸苔進(jìn)行發(fā)酵后對(duì)花鱸進(jìn)行研究同樣提高了花鱸的增重率,降低了飼料系數(shù)。分析其原因可能是在發(fā)酵時(shí)破壞了滸苔所含的膠質(zhì)所致,使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)更容易被吸收,避免了因利用率低而造成的浪費(fèi)。

另外,在本試驗(yàn)中添加滸苔可以降低鱸魚的肝體指數(shù)、魚體水分含量,提高粗蛋白和粗灰分含量。從而在一定程度上改善魚肉品質(zhì),提高產(chǎn)品質(zhì)量。在Asino等(2011)的研究結(jié)果中添加滸苔可以提高其粗脂肪、粗灰分含量,結(jié)果基本一致。

3.2 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸胃、腸道消化酶的影響

魚類消化酶活性反應(yīng)的是魚類對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用情況,同一種消化酶在不同消化器官中分布將存在差異。微生物發(fā)酵不僅可以改變飼料理化性質(zhì),還可以降解底物中的大分子有機(jī)物,從而使消化利用率得到提高(李猛等,2015)。通過(guò)微生物發(fā)酵產(chǎn)物作為飼料添加劑研究花鱸的消化酶活性的試驗(yàn)并不多見,本試驗(yàn)在一定程度上彌補(bǔ)了類似研究的不足。本試驗(yàn)證明對(duì)滸苔進(jìn)行發(fā)酵后,不但提高了飼料的適口性,而且也顯著提高花鱸的消化性能。Wang等(2006)、Suzer等(2008)研究表明,消化性能的增強(qiáng)可能是提高魚類生長(zhǎng)率一個(gè)原因。楊春花等(2012)的研究中,將海藻粉發(fā)酵后飼喂 1日齡櫻桃谷肉鴨(Cherry Valley Ducks)后發(fā)現(xiàn),由于發(fā)酵工藝降低了滸苔的纖維素含量,使得滸苔所含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)更加利于肉鴨的消化吸收,進(jìn)而提高了肉鴨的消化性能,因此顯著提高了其生長(zhǎng)速度。孫建鳳等(2010)在肉雞飼糧中添加滸苔,結(jié)果發(fā)現(xiàn)肉雞的胃蛋白酶、胰蛋白酶以及淀粉酶活性都得到了顯著提高。王述柏等(2013)研究表明飼料中添加4%的滸苔可以提高肉雞腸淀粉酶、脂肪酶以及蛋白酶活性。這均與本試驗(yàn)結(jié)果較為一致。夏素銀等(2010)利用發(fā)酵蛋白飼料替代豆粕研究其對(duì)肉仔雞消化吸收的影響,發(fā)現(xiàn)提高了其養(yǎng)分消化率。本試驗(yàn)所研究的滸苔就是一種高蛋白的海藻,故該研究結(jié)果對(duì)本試驗(yàn)具有一定的參考價(jià)值。秦搏等(2015)發(fā)現(xiàn)添加滸苔粉可以顯著提高幼刺參(Apostichopus japonicus Selenka)的淀粉酶和胃蛋白酶,其中以添加水平25%含量為最優(yōu)。這與本試驗(yàn)中2%含量為最佳相差較大,究其原因一方面可能是因?yàn)檠芯繉?duì)象不同而差異,另一方面可能是因?yàn)闈G苔經(jīng)過(guò)發(fā)酵后大大提高了其利用率,故使其最適添加水平得以降低。

3.3 發(fā)酵滸苔對(duì)花鱸血清、肝臟免疫指標(biāo)的影響

魚類生存環(huán)境具有特殊性,因此在抵抗病害方面非特異性免疫機(jī)制比特異性免疫顯得更為重要(Anderson,1992)。本研究選取超氧化物歧化酶(SOD)、溶菌酶(LZM)和堿性磷酸酶(AKP)這三種具有代表性的非特異性免疫酶指標(biāo)對(duì)花鱸非特異性免疫性能進(jìn)行說(shuō)明。超氧化物歧化酶反應(yīng)了機(jī)體清除多余自由基的能力,是一種重要的抗氧化酶。溶菌酶(LZM)具有較強(qiáng)殺菌作用,可促進(jìn)機(jī)體細(xì)胞的吞噬活性,可在機(jī)體啟動(dòng)免疫保護(hù)時(shí)發(fā)揮作用。本試驗(yàn)在基礎(chǔ)飼料中添加不同水平的發(fā)酵滸苔進(jìn)行投喂后,結(jié)果表明添加發(fā)酵滸苔可以明顯提高花鱸血清、肝臟的免疫性能。徐大倫等(2005)研究發(fā)現(xiàn)向扇貝(Chlamys farreri))體內(nèi)注射滸苔多糖后,扇貝體內(nèi)超氧化物歧化酶和溶菌酶活性得到明顯提高,進(jìn)一步論證了滸苔具有促進(jìn)機(jī)體免疫活性的作用。Castro等(2004)研究證實(shí)綠藻類的滸苔能夠提高大菱鲆的呼吸活性,從而加強(qiáng)噬菌細(xì)胞中巨噬細(xì)胞殺死細(xì)菌病原體的能力。唐薇等(2014)在研究中發(fā)現(xiàn)滸苔粉能促進(jìn)刺參組織的免疫性能。王述柏等(2013)在日糧中添加滸苔粉顯著提高了肉雞的免疫力。這些結(jié)果都說(shuō)明了添加滸苔具有提高機(jī)體免疫性能的作用,與本試驗(yàn)結(jié)果較為吻合。盧青等(2015)采用滸苔粉作為飼料添加劑對(duì)大菱鲆(Scophthalmus maximus)的試驗(yàn)研究得出,當(dāng)添加量在 5%時(shí)并不會(huì)提高大菱鲆的免疫力,且隨著添加量繼續(xù)增高反而抑制其免疫活性。在本試驗(yàn)中,在發(fā)酵滸苔在添加量為 5%仍可增加機(jī)體免疫力,且在添加量為 3%時(shí)達(dá)到最佳。同時(shí)也隨著添加量的增高呈降低趨勢(shì),這點(diǎn)與盧青的研究相符合。但就添加量 5%能否提高魚體免疫力上與盧青的研究不一致,原因可能是盧青等采用的是滸苔粉,而本試驗(yàn)采用的是發(fā)酵滸苔,發(fā)酵滸苔中的發(fā)酵菌隨底物進(jìn)入機(jī)體環(huán)境,并作為外源微生物激發(fā)免疫,增加了具有殺菌作用的體液因子,從而有效提高機(jī)體免疫力。同樣在姜燕(2014)研究實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),與未發(fā)酵的飼料相比發(fā)酵飼料能提高刺參(Apostichopus japonicus Selenka)的超氧化物歧化酶、溶菌酶等非特異性免疫酶的活性。由此可以推知,對(duì)滸苔進(jìn)行發(fā)酵處理所得到的效果可能好于未經(jīng)過(guò)發(fā)酵處理的滸苔。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下,飼料中添加發(fā)酵滸苔能夠促進(jìn)花鱸的生長(zhǎng),降低花鱸魚體水分含量,在一定程度改善花鱸魚肉品質(zhì)。還可以提高飼料利用率,增強(qiáng)花鱸胃、腸道消化酶活性從而改善花鱸魚的生長(zhǎng)狀況。并且對(duì)花鱸免疫力也有顯著提高,增強(qiáng)花鱸抗病能力。

通過(guò)生長(zhǎng)指標(biāo),消化指標(biāo)以及免疫指標(biāo)等重要指標(biāo)的最佳擬合曲線可得知,在添加濃度為2%—3%時(shí)能顯著提高其生長(zhǎng)性能,消化性能和免疫性能。

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