宋代玉 劉有旺 李雅林

(泰山醫(yī)學院，山東泰安271016)

赤靈芝抗腫瘤作用的研究現(xiàn)狀*

宋代玉 劉有旺 李雅林

(泰山醫(yī)學院，山東泰安271016)

赤靈芝;抗腫瘤;靈芝酸

赤靈芝又稱靈芝草。多孔菌科，是一種藥用真菌。在我國已有悠久的藥用歷史，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有補中益氣、滋補強壯、扶正固本、延年益壽等功效，被列為名貴藥材，在《本草綱目》中靈芝亦被列為上品，其中記載“靈芝味苦，無毒，可補中，增智慧，久食可輕身不老。”現(xiàn)代醫(yī)學界經(jīng)研究發(fā)現(xiàn):赤靈芝對心臟病、腦血管病、肝肺病、腎臟病等有顯著療效，有提高人體免疫力和抗腫瘤作用，兼有抗衰老、解毒、抗菌抗病毒、提高血液供氧能力、保健等功能等功能［1－2］。而赤靈芝的抗腫瘤作用越來越受到人們的關(guān)注，本文赤靈芝的抗腫瘤作用如下綜述。

1 赤靈芝抗腫瘤的活性成分

赤靈芝具有抗腫瘤作用人們已經(jīng)明確:腫瘤之所以會發(fā)生發(fā)展，這很重要的一個原因是自身免疫功能的低下或失調(diào)。通過研究提示:赤靈芝確是最佳的自身免疫功能調(diào)節(jié)和激活劑，它能提高機體免疫功能，靈芝多糖和靈芝總提取物都能夠刺激機體產(chǎn)生干擾素－γ(IFN－γ)和腫瘤壞死因子α，誘導癌細胞凋亡［3］。赤靈芝的藥理成分非常豐富，目前已分離的有數(shù)十種之多，主要有靈芝酸(三萜類)、靈芝多糖、腺苷、氨基酸、蛋白質(zhì)、有機鍺和微量元素等［4－6］。

其中有關(guān)靈芝酸藥理作用的研究近年來取得了相當豐富的科研成果。1982年，Kubota等［7］首次分離到靈芝酸A和靈芝酸B;并用波普技術(shù)對其化學結(jié)構(gòu)進行了鑒定。對靈芝三萜類化合物藥理作用的深入研究，促進了對靈芝酸的臨床應(yīng)用。引起了科學家們關(guān)注的是，靈芝的抑瘤效果與靈芝酸密切相關(guān)。近年來研究人員又在實驗中發(fā)現(xiàn)，靈芝酸能激活可直接破壞腫瘤細胞核形成的蛋白酶。靈芝三萜類化合物，是從赤靈芝中分離得到的另一類具有重要生物活性的成分，具有較強的生理活性，如增強免疫力，延緩衰老，抗腫瘤、抗病毒，保肝護膽，低膽固醇、降血脂、降血糖等［8］，目前已分離到的靈芝三萜類化合物有130余種［9］。

多糖類是赤靈芝中除三萜類外研究最深入最廣泛的一類化合物。70年代對靈芝多糖的研究主要集中在多糖和多糖復合物組分的分離、制備及藥理作用方面，80和90年代則主要集中在靈芝多糖及多糖復合物的結(jié)構(gòu)及其與功能的關(guān)系方面。。經(jīng)分子生物學、免疫藥理學研究發(fā)現(xiàn)，具有β-(1，3)，β-(1，6)甙鍵的多糖體及肽多糖均表現(xiàn)了較強的生物活性。Pan等［10］用優(yōu)化后的提取方法得到靈芝多糖，并對靈芝多糖抗胃癌作用進行了研究，結(jié)果顯示，靈芝多糖能夠緩解MNNG誘導的胃癌大鼠的癥狀，Sun等［11］研究發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)黑色素瘤細胞B16F10過程中添加靈芝多糖，能夠提高黑色素瘤細胞的免疫原性，徐晉等［12］對靈芝多糖與氟尿嘧啶聯(lián)合給藥抗人肝癌細胞HepG2的作用進行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，單獨使用氟尿嘧啶對HepG2細胞的增殖抑制效果較差，而靈芝多糖與氟尿嘧啶聯(lián)合作用后，對HepG2細胞增殖具有顯著的抑制作用。

近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，靈芝子實體中含有Mn，Cr，Cu，F(xiàn)e，Ca，K，Mg，Zn，Se，Ge等微量元素［13］。其中有些微量元素(如鍺和硒)對靈芝多糖的抗腫瘤作用有協(xié)同作用。尚德靜等［14］以靈芝為載體，通過靈芝的深層培養(yǎng)，把無機硒轉(zhuǎn)化為有機硒。研究結(jié)果表明，靈芝對硒的生物轉(zhuǎn)化能力非常強，硒主要與靈芝多糖結(jié)合。

2 赤靈芝抗腫瘤活性物質(zhì)的化學結(jié)構(gòu)

靈芝酸的前體物質(zhì)是由二分子的焦磷酸合歡酶(FPP)尾接尾縮合成前鯊烯酯，經(jīng)閉環(huán)轉(zhuǎn)位成各種三萜類化合物，為高度氧化的羊毛甾烷類衍生物，按分子中碳原子數(shù)可分為C24，C27，C30三大類。靈芝酸的結(jié)構(gòu)中，環(huán)上的雙鍵大多位于△8(9)位，大部分在C11和C21位有羰基，而且在C3、C7和C15位也大多被羰基或羧基所取代。而在三萜醇、醛和過氧化物的結(jié)構(gòu)中環(huán)上大多存在兩個不飽和雙鍵，其位置在△7(8)和△9(11)位，C11和C23位也不存在羰基且環(huán)上的取代基明顯減少［15］。

靈芝多糖分子結(jié)構(gòu)中單糖間的連接方式多為β-(1，3)鍵、β-(1，4)鍵和β－(1，6)鍵三種，主鏈上多枝部分多糖還含有膚鏈［16－19］。靈芝多糖的免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤活性與其分子結(jié)構(gòu)中甙鍵的結(jié)合形式密切有關(guān)，當甙鍵主要以β-(1，3)(1，6)鍵連接或β-(1，4)(1，6)鍵連接時，靈芝多糖常具有活性;當靈芝多糖的分子結(jié)構(gòu)中完全以β-(1，4)鍵連接的，則沒有抗腫瘤活性。

3 赤靈芝抗腫瘤的機制

3.1激活NK細胞的免疫調(diào)節(jié)

機體免疫調(diào)節(jié)主要依賴T細胞和NK細胞，而赤靈芝中的靈芝酸發(fā)酵液抗腫瘤作用與激活NK細胞有著密切關(guān)系。許多因子如IL-2、IFN-γ激活NK細胞殺傷腫瘤靶細胞，活化的NK細胞可釋放許多細胞因子如IFN-γ、IL-2、TNF-α、GM-CSF，呈正性調(diào)節(jié)作用，調(diào)節(jié)巨噬細胞的功能擴大抗瘤譜［20］。

3.2抑制拓撲異構(gòu)酶的活性

DNA的超螺旋程度影響著機體的活動，而拓撲異構(gòu)酶的作用正是調(diào)控DNA的空間構(gòu)型，因此DNA拓撲異構(gòu)酶就成為抗腫瘤藥物作用的重要靶點。陳陵際等［21］研究發(fā)現(xiàn)靈芝精粉和孢子粉混合物(MLGLGS)對拓撲異構(gòu)酶(topoisomerases，TOPO)Ⅰ和Ⅱ有明顯的酶活性抑制作用，進而起到抑制腫瘤的作用。

3.3誘導腫瘤細胞凋亡和分化、使細胞周期停滯

靈芝酸通過阻斷人肝瘤細胞株BEL7402細胞周期G1期向S期轉(zhuǎn)變，使細胞周期停滯從而抑制癌細胞的生長，在濃度500μg/mL時，其抑制率可以達到70%，但對正常人的肝細胞株L02并沒有影響［22］，Shang D等［23］研究表明靈芝多糖以劑量和時間依賴方式抑制MCF-7細胞生長，使其顯示典型凋亡特征。靈芝多糖可以誘導THP-1和U937細胞的增殖反應(yīng)，誘導THP-1細胞轉(zhuǎn)化為典型樹突狀細胞形態(tài)［24］。

3.4抑制腫瘤細胞增殖和轉(zhuǎn)移

Wang J等［25］研究發(fā)現(xiàn)化學修飾后靈芝多糖通過介導S180腫瘤細胞周期，使其阻滯于G2/M階段、上調(diào)Bax表達、降低Bcl-2表達發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)。李穎博等［26］采用transwell雙層小室觀察靈芝多糖對前列腺癌細胞遷移穿過單層人臍靜脈內(nèi)皮細胞的影響。

3.5提高腫瘤細胞MHC的表達

SunLX等［27］研究發(fā)現(xiàn)靈芝多糖能增強B16F10細胞MHC-1類分子H-2D(b)及共刺激分子B7-1和B7-2表達。說明靈芝多糖有可能通過提高腫瘤細胞表面的MHC分子表達，增強淋巴細胞對腫瘤細胞的識別。

4 結(jié)語

腫瘤是威脅人類生命的重大疾病，已成為人類死亡的重要因素，嚴重危害人們的健康。對赤靈芝抗腫瘤作用的研究可為治療腫瘤提供一種新的方法。赤靈芝中的靈芝三萜和靈芝多糖對惡性腫瘤復發(fā)轉(zhuǎn)移的有效遏止，彌補了傳統(tǒng)腫瘤治療的不足，成為腫瘤免疫治療中的主力軍，同時也讓腫瘤患者看到希望。

綜觀近年來相關(guān)研究進展，赤靈芝抗腫瘤作用的研究較多，但赤靈芝抗腫瘤作用機制的相關(guān)研究相對較少。盡管己有研究在靈芝免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤方面取得了一些進展，但對赤靈芝的免疫受體、抗腫瘤作用的分子機制等方面仍不明了，此外，赤靈芝免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤的臨床分析研究也偏少。因此，對赤靈芝抗腫瘤作用的深入研究將會有更廣闊的醫(yī)學前景。

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R961

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10.3969/j.issn.1004-7115.2015.11.052

2015-03-18)

2014年國家級大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃(201410439023)。

宋代鈺，男，山東濰坊人，本科，泰山醫(yī)學院公共衛(wèi)生學院學生。

劉有旺(1974－)，男，碩士，實驗師，主要從事預(yù)防醫(yī)學以及中藥方面的研究。