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        消喘飲平喘祛痰作用的實(shí)驗(yàn)研究

        2015-04-04 01:32:58陳伯靜王遵瓊
        黑龍江中醫(yī)藥 2015年6期
        關(guān)鍵詞:豚鼠平喘平滑肌

        陳伯靜 王遵瓊

        (湖北省宜昌市夷陵區(qū)醫(yī)院·430000)

        消喘飲是根據(jù)臨床應(yīng)用多年的經(jīng)驗(yàn)方研制而成的,主要藥物組成有苦參、地龍、淫羊藿等。本方標(biāo)本兼治,具有良好的清肺化痰、止咳平喘功效,是治療支氣管哮喘的有效方劑?,F(xiàn)僅對(duì)其平喘祛痰藥理作用的初步研究報(bào)道如下。

        1 實(shí)驗(yàn)材料

        1.1 藥物與試劑

        消喘飲(苦參、地龍、蛤蚧、淫羊藿等中藥組成,經(jīng)水煎煮2次,30 min/次,合并濾液濃縮至1:4,即1ml相當(dāng)于原生藥4g備用);海珠喘息定片(廈門中藥廠生產(chǎn),批號(hào)000606);磷酸組胺(上海麗珠東風(fēng)生物技術(shù)有限公司提供,批號(hào)9904060);乙酰膽堿 (上海試劑三廠生產(chǎn),批號(hào)881008);氨茶堿 (湖南制藥廠生產(chǎn),批號(hào)951017);異丙腎上腺素(上海禾豐制藥有限公司,批號(hào)000501);氯化胺 (汕頭化學(xué)試劑廠生產(chǎn),批號(hào)861101);苯酚紅 (上海試劑三廠生產(chǎn),批號(hào)951124)。

        1.2 動(dòng)物

        豚鼠、小鼠由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心供應(yīng)(合格證號(hào):SCXK(鄂)2012-0005)。

        1.3 儀器

        電光天平MA200(上海第二天平儀器廠);402超聲霧化器(上海四菱醫(yī)療器械廠);LMS-2B型二道生理記錄儀(成都儀器廠);3W-3G型恒溫平滑肌槽(正華科教儀器廠)、恒溫水浴鍋(北京市醫(yī)療儀器廠)、肌張力換能器(復(fù)旦大學(xué)傳感器工程研究室);754型分光光度計(jì)(上海第三分析儀器廠)。

        2 實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果

        2.1 平喘實(shí)驗(yàn)

        取經(jīng)篩選的合格雄性豚鼠28只(體重160±10g),隨機(jī)分成4組,即消喘飲(低)組、消喘飲(高)組、海珠喘息定片組、生理鹽水組。分別給予不同藥物或生理鹽水灌胃,0.5m1/只,1次/d,共給藥4d。于末次給藥后30min,將豚鼠置于玻璃鐘罩內(nèi),以1mg: 1ml磷酸組胺超聲霧化,超聲霧化lml/次,觀察豚鼠抽搐跌倒的時(shí)間。如6min仍不跌倒,將豚鼠取出,其潛伏值以6min計(jì)算,實(shí)驗(yàn)顯示兩種藥物均具較強(qiáng)的平喘作用。結(jié)果見表1。

        表l 消喘飲對(duì)各組豚鼠平喘作用比較(±s)

        表l 消喘飲對(duì)各組豚鼠平喘作用比較(±s)

        *與生理鹽水組比較P<0.01。

        組別(t/s) 動(dòng)物數(shù) 每只劑量 搐跌潛伏時(shí)間生理鹽水組 7 1.0 m1 54.6±9.2消喘飲高劑量組 7 3.0 g 325.3±24.5*消喘飲低劑量組 7 1.5 g 170.6±12.3*海珠喘息定片組 7 0.15片 332.9±17.6*

        實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:消喘飲灌胃給藥能有效的對(duì)磷酸組胺誘發(fā)的豚鼠哮喘,具有顯著的抑制作用(P<0.01),其平喘的作用強(qiáng)度存在明顯的量效關(guān)系,即隨濃度的加大而增強(qiáng)。消喘飲各劑量組平喘的作用與海珠喘息定片組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

        2.2 離體氣管條實(shí)驗(yàn)

        按文獻(xiàn)[1]方法,取豚鼠體重450±50g,雌雄兼用。用木棰擊其頭部致死,立即切開頸部皮膚,分離氣管,從甲狀軟骨下方至氣管分叉處將氣管全部剪下,放入經(jīng)過充分氧飽和的改良克-亨氏營(yíng)養(yǎng)液的培養(yǎng)皿中,不斷通入氧氣。仔細(xì)剔出氣管周圍的結(jié)締組織,將氣管剪成3mm×20mm的螺旋條備用。

        將氣管條標(biāo)本置于含30ml營(yíng)養(yǎng)液的麥?zhǔn)显〔蹆?nèi),一端固定于麥?zhǔn)显〔蹆?nèi),另一端連于肌張力換能器上(負(fù)荷為2 g),恒溫37℃,調(diào)節(jié)供氧旋扭(95%O2+5%CO2),保持每分鐘40~60個(gè)氣泡,讓氣管條在營(yíng)養(yǎng)液中平衡l小時(shí)后加藥,以10mm/min速度記錄正常曲線,觀察消喘飲對(duì)氣管平滑肌的直接作用。然后,加入乙酰膽堿0.5m1(使浴槽內(nèi)濃度為1.67×10-6g/ml),觀察記錄曲線變化。當(dāng)氣管條平滑肌張力達(dá)高峰時(shí),實(shí)驗(yàn)各組分別加入消喘飲0.6ml、0.3ml、0.1 ml(使浴槽內(nèi)濃度分別為80mg/ml、40mg/ml、10mg/ml);對(duì)照組加入異丙腎上腺素0.6ml(使浴槽內(nèi)濃度為1.0×10-6g/ml)。觀察各組給藥3分鐘后對(duì)抗乙酰膽堿的作用,記錄曲線下降幅度,并按下式求出藥物的解痙百分率。

        解痙百分率 =(給藥前曲線的高度-給藥后曲線的高度)/給藥前曲線的高度×100%結(jié)果見表2

        表2 消喘飲對(duì)各組豚鼠離體氣管平滑肌的影響比較(±s)

        表2 消喘飲對(duì)各組豚鼠離體氣管平滑肌的影響比較(±s)

        注:與生理鹽水組比較,*P<0.01。

        組 別 例 數(shù)(n) 劑量(mg/ml) 解痙百分率(%)生 理 鹽 水 組 7 - 0消喘飲高劑量組 7 80 77.76±13.68*消喘飲低劑量組 7 10 21.19±16.50*異丙腎上腺素組 7 1.0×10-6 100.00±0.00*

        實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:消喘飲各劑量組對(duì)正常氣管平滑肌均有不同程度的直接松弛作用,并能拮抗乙酰膽堿所致的離體豚鼠氣管平滑肌收縮,與生理鹽水組比較,差別均有高度顯著性意義(P<0.01),其作用強(qiáng)度有明顯的量效關(guān)系,即隨濃度的加大而增強(qiáng)。消喘飲各劑量組對(duì)平滑肌的直接松弛作用與異丙腎上腺素組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

        2.3 祛痰實(shí)驗(yàn)(小鼠氣管段酚紅法)

        按文獻(xiàn)[2]方法,取禁食12h健康小鼠,體重22±3g,雌雄兼用,稱重標(biāo)記后,按體重性別隨機(jī)分為5組:生理鹽水組(給等容積生理鹽水)、氯化胺組(給氯化胺lg/kg)、消喘飲高、中、低3個(gè)劑量組(分別給消喘飲24g/kg、12g/kg、6g/kg)。按0.2m1/l0g體重容積灌胃。灌胃后30min,腹腔注射苯酚紅生理鹽水溶液0.1ml(5mg)/10g體重,注射苯酚紅后0.5h,將小鼠頸椎脫臼法處死,剪下自甲狀軟骨至氣管分叉處的一段氣管,放入盛有2ml生理鹽水的試管中,再加lmol/L的氫氧化鈉溶液0.1ml,搖勻后,用754型分光光度計(jì)波長(zhǎng)546nm測(cè)吸光度(OD值),用苯酚紅作一標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)曲線計(jì)算苯酚紅含量(μg/m1)。結(jié)果見表3。

        表3 消喘飲對(duì)各組小鼠祛痰作用比較(±s)

        表3 消喘飲對(duì)各組小鼠祛痰作用比較(±s)

        注:與生理鹽水組比較:*P<0.01。

        組別 動(dòng)物數(shù)(n) 劑量(g/kg) 氣管條酚紅排泌量(μg/m1)生理鹽水組 7 1 0消喘飲高劑量組 7 24 1.82±0.45*消喘飲低劑量組 7 6 0.75±0.48*氯化銨組 7 1 1.75±0.51*

        實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:氯化銨、消喘飲各劑量組均能增加小鼠氣管內(nèi)苯酚紅排泌量,與生理鹽水組比較,差別均有高度顯著性意義(P<0.01)。消喘飲的祛痰作用強(qiáng)度存在明顯的量效關(guān)系,即隨濃度的加大而增強(qiáng)。消喘飲各劑量組對(duì)平滑肌的直接松弛作用與氯化銨組比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

        3 討論

        支氣管哮喘是一種常見病、多發(fā)病,資料表明我國支氣管哮喘患者達(dá)一千萬人以上,已成為較嚴(yán)重的社會(huì)衛(wèi)生問題[3]。大量的臨床證實(shí),中醫(yī)藥通過對(duì)機(jī)本免疫系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)節(jié),既能減少哮喘的急性發(fā)作,也可達(dá)到長(zhǎng)期緩解的治療目的,在治療支氣管哮喘中具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。本實(shí)驗(yàn)的研究目的在于尋求中藥治療哮喘的有效方劑。

        消喘飲經(jīng)大量臨床證實(shí)對(duì)哮喘具有良好的作用,且用量安全。其藥物組成中,除具有止咳平喘的藥物外,大多還具有拮抗炎癥細(xì)胞釋放炎性介質(zhì)或具有免疫調(diào)節(jié)作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,消喘飲對(duì)豚鼠磷酸組胺超聲霧化而致的喘、咳有顯著抑制作用;對(duì)正常氣管平滑肌均有不同程度的直接松弛作用,并能拮抗酰膽堿所致的離體豚鼠氣管平滑肌收縮;能增加小鼠氣管內(nèi)苯酚紅排泌量。以上作用度存在明顯的量效關(guān)系,即隨濃度的加大而增強(qiáng)。以上結(jié)果提示,消喘飲對(duì)支氣管哮喘的療效是肯定的,值得進(jìn)一步深入研究。

        [1]魏偉,吳希美,李元建. 藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2010.

        [2]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2011.

        [3]李明華,殷凱生,蔡映云. 哮喘病學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2005.

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