溫建輝，趙改云

（晉中學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院，山西晉中030619）

（編輯 楊樂(lè)中）

0 引言

發(fā)生于2012年的“毒膠囊事件”讓人記憶猶新，其主要原因是由于膠囊中鉻含量超標(biāo)引起的.鉻對(duì)人體有較大的毒性，環(huán)境中低濃度的鉻會(huì)引起亞急性慢性中毒，粉塵還會(huì)引起肺炎、潰瘍、肺癌等疾病.Cr（Ⅵ）容易進(jìn)入細(xì)胞，并被還原為Cr3+，產(chǎn)生的中間體Cr5+和活性自由基，易對(duì)DNA造成損傷，對(duì)呼吸道、消化道有刺激作用，對(duì)肝腎有明顯的傷害，且有顯著的致癌、致畸、生殖毒性等作用[1].空心膠囊由藥用明膠加輔料精制而成，藥用明膠是從牛骨中提煉出來(lái)的，而工業(yè)明膠是用皮革下腳料制得.為了使皮革不易變形，生產(chǎn)皮革時(shí)使用了含有重金屬鉻的試劑進(jìn)行處理.如果用工業(yè)明膠代替藥用明膠，其中鉻含量必然超標(biāo).為防止用鉻糅劑鞣制過(guò)的皮革制取明膠，我國(guó)醫(yī)藥包裝協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)空心膠囊鉻的含量有所限定，2010年版《中國(guó)藥典》新增加了空心膠囊中鉻的限量，同時(shí)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB6783-94，GB/T5009.123-2003也規(guī)定，鉻元素的含量應(yīng)≤2 mg·kg-1[5]1205.

目前，測(cè)定空心膠囊中鉻含量時(shí)常用的樣品前處理方法有濕法消解[6]、干法灰化[7]、微波消解[8~12]等.高壓微波消解技術(shù)具有溶樣時(shí)間短、溶劑用量少、空白值低以及樣品消解完全等優(yōu)點(diǎn)，在近年來(lái)得到了迅速的發(fā)展.對(duì)于痕量元素鉻含量的測(cè)定，主要有化學(xué)分析法、電化學(xué)分析法、二苯碳酰二肼分光光度法、火焰原子吸收法、石墨爐原子吸收法、電感耦等離子體原子發(fā)射光譜法和電感耦合等離子體質(zhì)譜原子吸收分光光度法等.分光光度法、火焰原子吸收光譜法會(huì)受樣品中鉻元素存在形態(tài)的影響，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的不準(zhǔn)確；石墨爐原子吸收光譜法、電感耦等離子體原子發(fā)射光譜法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法有較好的檢出限，不受干擾，穩(wěn)定性能滿足檢測(cè)要求，準(zhǔn)確度好，相互間測(cè)定結(jié)果的對(duì)照良好，均可在日常檢測(cè)中使用[13].其中，原子吸收分光光度法還具有選擇性高、操作簡(jiǎn)便、分析速度快等優(yōu)點(diǎn).本試驗(yàn)采用高壓微波消解技術(shù)，對(duì)明膠空心膠囊樣品進(jìn)行消解；采用石墨爐原子吸收分光光度法，在波長(zhǎng)為357.9 nm的條件下測(cè)定了20批明膠空心膠囊中痕量元素鉻的含量.依據(jù)2010年版《中國(guó)藥典》中對(duì)明膠空心膠囊中鉻含量的最新標(biāo)準(zhǔn)，考察了20批明膠空心膠囊中痕量元素鉻的含量.

1 儀器和試劑

1.1 儀器與設(shè)備

AA-7000原子分光光度計(jì)：日本島津；AL-204電子天平：梅特勒-托利多（上海）有限公司；031-B-SP微波消解儀：SCP-SCINENCE；TTL-6A超純水儀：北京同泰聯(lián)泰科技發(fā)展有限公司；GXZ-9140 MBZ數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱：上海博訊實(shí)業(yè)有限公司；GS-24控溫電熱板：大連中匯達(dá)科學(xué)儀器有限公司.

1.2 樣品

樣品均為空心膠囊，均由膠囊生產(chǎn)企業(yè)提供.它們是德元堂制藥集團(tuán)的心腦康膠囊、四方胃膠囊、骨筋丸膠囊、腎康復(fù)膠囊、肝喜樂(lè)膠囊、脂可清膠囊、心可舒膠囊、舒秘膠囊、脂脈康膠囊；安特制藥的鹽酸氟桂利嗪膠囊、膠體果膠鉍膠囊（兩批）、馬來(lái)酸曲美布汀膠囊；中遠(yuǎn)威的溶栓膠囊、鹽酸氨基葡萄糖膠囊；頤圣制藥的抗栓膠囊、更年安膠囊、十六味消渴膠囊、降糖寧膠囊；廣譽(yù)遠(yuǎn)國(guó)藥的甘露消渴膠囊等.首先傾出內(nèi)容物，用棉棒擦凈囊殼內(nèi)外面，防止內(nèi)容物對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾.

1.3 試劑

硝酸：優(yōu)級(jí)純；來(lái)源：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；技術(shù)條件：符合GB/T626-2006參照；批號(hào)：T20101116.

菠菜：地球物理地球化學(xué)勘查研究院；批號(hào)：GBW10015（GSB-6）；國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，CRMSpinach.

鉻：?jiǎn)卧貥?biāo)準(zhǔn)溶液；來(lái)源：中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院；批號(hào)：GBW08614；標(biāo)準(zhǔn)值：1000μg·mL-1.

樣品均為空心膠囊，均由膠囊生產(chǎn)企業(yè)提供.傾出內(nèi)容物，用棉棒擦凈囊殼內(nèi)外面，防止內(nèi)容物對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾，備用.除特殊注明外，本實(shí)驗(yàn)所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水；所用玻璃器皿以及容器經(jīng)體積分?jǐn)?shù)為10%的HNO3溶液浸泡8小時(shí)以上.

2 樣品制備

2.1鉻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的制備

取1 mL1000μg·mL-1的鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液于1000 mL容量瓶中，然后用2%的HNO3溶液定容至刻度，得10 μg·mL-1中間標(biāo)準(zhǔn)溶液.取2.5 mL10μg·mL-1的中間標(biāo)準(zhǔn)溶液于50 mL容量瓶中，然后用2%的HNO3溶液定容至刻度得500 ng·mL-1的鉻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液.

2.2鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（10μg·mL-1）適量，制成每 1 mL含鉻 0、5、10、15、20、25 ng的標(biāo)準(zhǔn)溶液.

2.3空白、對(duì)照品、供試品溶液的制備

精密稱取0.2 g的菠菜（對(duì)照品）于石英管中，稱取0.5 g左右的膠囊（供試品）于石英管中，分別加5 mL HNO3，搖勻，浸泡過(guò)夜，置于聚四氟乙烯消解罐內(nèi)，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置于微波消解儀消解（按儀器規(guī)定的消解程序操作），消解完后放冷至室溫，緩慢開啟消解罐.然后將冷卻后的石英管置于控溫電熱板（趕酸儀）中，將溫度設(shè)定為140℃，緩緩加熱至紅棕色氣體揮盡，并濃縮至2 mL左右，放冷，用2%的HNO3溶液轉(zhuǎn)移至25 mL的納氏比色管中，稀釋至刻度，搖勻即得.同法做試樣空白，靜置至完全沉淀.

3 實(shí)驗(yàn)部分

3.1 儀器的主要參數(shù)

所用儀器為原子吸收分光光度計(jì)，光源為鉻空心陰極燈，以石墨爐為原子化器（光學(xué)參數(shù)：波長(zhǎng)357.9 nm，狹縫0.7 nm，鉻空心陰極燈電流10 mA，氘燈背景矯正；自動(dòng)進(jìn)樣，橫向加熱石墨管，進(jìn)樣體積10μL，標(biāo)準(zhǔn)溶液自動(dòng)稀釋功能；升溫程序：20 s升溫至150℃，10 s升溫至250℃，10 s升溫至800℃，800℃保持10 s，保持3 s升溫至2300℃，保持2 s升溫至2500℃，保持2 s）測(cè)定.石墨爐工作條件見表1：

3.2 測(cè)定方法

按照原子吸收分光光度法（《中國(guó)藥典》2010年版（二部）附錄IV D第一法，標(biāo)準(zhǔn)曲線法）.在儀器推薦的濃度范圍內(nèi)，制備含待測(cè)元素的對(duì)照品溶液至少3份，濃度依次遞增，并分別加入各品種項(xiàng)下制備供試品的相應(yīng)試劑，同時(shí)以相應(yīng)試劑制備空白對(duì)照溶液.將儀器按規(guī)定啟動(dòng)后，依次測(cè)定空白對(duì)照溶液和各濃度對(duì)照品溶液的吸光度，記錄讀數(shù).以每一濃度3次吸光度讀數(shù)的平均值為縱坐標(biāo)，相應(yīng)濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線.按各品種項(xiàng)下的規(guī)定制備供試品溶液，使待測(cè)鉻元素的估計(jì)濃度在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍內(nèi)，測(cè)定吸光度，取三次讀數(shù)的平均值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的濃度，計(jì)算鉻元素的含量.

表1 石墨爐工作條件

3.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

將已配制好的0、5、10、15、20、25 ng﹒mL-1的鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液置于自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，分別吸取5μL注入石墨爐原子化器，根據(jù)操作規(guī)則進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定，以吸光度（A）為橫坐標(biāo)，以濃度（C）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（見圖1）.

圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：A=0.023750C+0.030705；r=0.9995

3.2.2空白及樣品的測(cè)定

樣品明膠空心膠囊中鉻含量的測(cè)定結(jié)果見表2：

表2 樣品明膠空心膠囊中鉻含量的測(cè)定結(jié)果

3.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

精密稱取實(shí)驗(yàn)用心腦康空心膠囊平行樣品3份，按照本實(shí)驗(yàn)中的實(shí)樣溶解制備方法和儀器測(cè)定條件進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得的吸光度RSD為1.22%.

3.4 回收率實(shí)驗(yàn)

取某一明膠空心膠囊做回收率試驗(yàn)，平行測(cè)定三份進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分別加入10μg﹒mL-1的鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液1、2、3 mL，之后與供試品溶液同法、同條件測(cè)定，計(jì)算回收率，平均回收率為99.4%，結(jié)果見表3：

表3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)果討論

用膠囊封裝藥物，一般都是對(duì)食道和胃粘膜有刺激性的粉末或顆粒，或易于揮發(fā)、在口腔中易被唾液分解等原因的藥品.采用膠囊既可以保護(hù)藥物藥性的完好，也可保護(hù)人體的消化器官，因此，膠囊在藥品制作中得到了廣泛的應(yīng)用.明膠膠囊是世界上最受歡迎的兩節(jié)式膠囊，由膠囊用明膠加輔料制成的，由帽、體兩節(jié)膠囊殼組成，可容納各種藥粉、液體、半固體和藥片，具有掩飾藥物異味、易于吞服、崩解能力良好、保質(zhì)期較長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn).

《中國(guó)藥典》（2010版）規(guī)定，明膠空心膠囊的重金屬鉻的含量不得超過(guò)2mg﹒kg-1.2012年“毒膠囊事件”是由于一些不法廠家違規(guī)使用“藍(lán)礬皮”作為明膠生產(chǎn)原料，藍(lán)礬皮是經(jīng)過(guò)重金屬鞣制的皮革“下腳料”，其中鉻含量嚴(yán)重超標(biāo)，一般高達(dá)50mg﹒kg-1，甚至更高.本次檢驗(yàn)結(jié)果表明，所測(cè)樣品膠囊中鉻的含量均≤2 mg﹒kg-1，符合2010版《中國(guó)藥典》中對(duì)鉻含量的限制，消費(fèi)者可放心服用.

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