許愛霞，余躍華，舒向榮

(江西省婦幼保健院，江西 南昌330006)

圍產(chǎn)期生殖道細(xì)菌感染易造成早產(chǎn)、死胎、胎膜早破、子宮內(nèi)膜炎等疾病，分娩時經(jīng)生殖道感染可引發(fā)嬰兒敗血癥、新生兒肺炎和腦膜炎，其中B群鏈球菌(Group B streptococcus，GBS)是主要致病菌之一。上世紀(jì)90年代以來，在發(fā)達(dá)國家GBS被列為圍產(chǎn)期感染的首要病原菌之一[1]，而在國內(nèi)GBS嚴(yán)重感染及胎兒、新生兒死亡的病例時有發(fā)生[2]。本文對1200例圍產(chǎn)期孕婦和非妊娠育齡婦女GBS感染情況進(jìn)行了分析，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 收集20l1年3月-20l3年12月在本院產(chǎn)科門診檢查或產(chǎn)科住院的圍產(chǎn)期孕婦600例,孕期35~37周,年齡2l~40歲,平均年齡29.3歲；同時收集同期在本院體檢的非妊娠育齡婦女600例，年齡19~41歲,平均年齡29.7歲，兩組一般資料比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。常規(guī)婦產(chǎn)科體檢的同時，不作清潔處理，由醫(yī)師規(guī)范采集陰道拭子標(biāo)本,立即送檢進(jìn)行培養(yǎng)。

1.2 儀器和試劑 鏈球菌分型膠乳凝集試劑盒 (法國Biomeriux公司)，二氧化碳培養(yǎng)箱(美國熱電公司)，細(xì)菌鑒定儀(美國德林公司)，哥倫比亞血瓊脂平板和抗菌藥物紙片(英國Oxoid公司)。

1.3 方法

1.3 .1標(biāo)本采集 具體方法參照2002年CDC推薦的取材方法,在進(jìn)行取材時,先擦去外陰分泌物,將無菌陰道棉拭子放入陰道下l/3內(nèi),旋轉(zhuǎn)l周采取陰道分泌物。

1.3 .2細(xì)菌培養(yǎng)鑒定 將陰道棉拭子直接涂在血平板上，在35℃5%CO2培養(yǎng)箱中孵育24~48h。觀察血平板上菌落特點(diǎn)，挑取可疑菌落，在血平板上進(jìn)行純培養(yǎng)，然后進(jìn)行涂片、革蘭染色鏡檢和相應(yīng)的生化等鑒定。并同時用鏈球菌B群分型試劑盒做凝集試驗，用細(xì)菌鑒定儀鑒定，并操作CAMP試驗確認(rèn)，陽性結(jié)果符合B群鏈球菌感染。

1.3 .3 藥敏試驗 采用紙片擴(kuò)散法(K-B法)，操作步驟依據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版[3]進(jìn)行。選擇青霉素、氨芐西林、頭孢曲松、克林霉素、紅霉素、萬古霉素、左氧氟沙星7種抗菌藥物紙片。對紅霉素、克林霉素敏感的菌株做D試驗檢測。藥敏結(jié)果判斷依據(jù)2009年CLSI標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSSl5.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析，計數(shù)資料用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 GBS檢出情況 共檢出GBS101株，其中圍產(chǎn)期孕婦GBS檢出率為8.67%(52/600)；非妊娠婦女GBS檢出率為8.17%(49/600)，兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。GBS血清學(xué)分型包括A、B、C、D、F和G6種，各型均有檢出，其中以 B型(34.65%)、A 型(30.69%)、G 型(21.78%)為多見。 各年齡組的圍產(chǎn)期孕婦和非妊娠育齡婦女均可見到陽性結(jié)果。

2.2 耐藥性分析 101株GBS陽性標(biāo)本全部進(jìn)行鏈球菌藥物敏感試驗，7種抗菌藥物的耐藥率為青霉素(1.98%)、氨芐西林(2.97%)、頭孢曲松(3.96%)、萬古霉素(0.00%)、左氧氟沙星(17.82%)、紅霉素(22.77%)、克林霉素(26.73%)見表 1。

表1 圍產(chǎn)期孕婦B群鏈球菌感染藥敏實驗結(jié)果(%)

3 討論

B族溶血性鏈球菌 (Group B streptococcus，GBS)又稱無乳鏈球菌，自上世紀(jì)70年代以來，已被證實為圍產(chǎn)期母嬰感染的主要病原菌之一。GBS是一種寄生于人類下消化道及泌尿生殖道的條件致病菌，國外研究顯示健康人群GBS帶菌率可達(dá)15%~35%，妊娠婦女的帶菌率為10%~30%[4]。國內(nèi)報道的妊娠婦女GBS帶菌率為3.5%~32.4%[5,6]。在本組圍產(chǎn)期婦女中GBS帶菌率8.67%,非妊娠育齡婦女帶菌率8.17%，兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本組結(jié)果與國內(nèi)的報道基本相近，與國外的報道有少許差異。分析原因可能有以下幾點(diǎn)：(1)檢測方法的差異：目前臨床檢測GBS方法有多種，但最常用的還是細(xì)菌培養(yǎng)法，盡管一些新型的檢測方法有較高的敏感性和特異性[7-9]，但由于價格偏貴，尚未在臨床廣泛應(yīng)用，檢測方法滯后可能是造成GBS感染漏診的原因[10]；(2)取材方法、部位和檢查時間，以及取標(biāo)本前患者服藥和身體狀態(tài)；(3)既往病史的影響：有流產(chǎn)史的產(chǎn)婦，有宮內(nèi)節(jié)育器者，有婦科炎癥史者的陰道GBS帶菌顯著增多[11]。

本組鏈球菌藥物敏感試驗發(fā)現(xiàn)現(xiàn)培養(yǎng)分離出的101例GBS對萬古霉素敏感率100%，青霉素98.02%，氨芐青霉素97.03%,頭孢曲松96.04%，而對左氧氟沙星、紅霉素、克林霉素的敏感率分別為71.29%、63.37%、57.43%，與國內(nèi)其他研究敏感率相似[12,13]。目前多數(shù)報道顯示B群鏈球菌對青霉素和氨芐青霉素敏感，但也有耐藥株出現(xiàn)。本組發(fā)現(xiàn)青霉素和氨芐青霉素有幾例耐藥，而且隨著抗生素廣泛使用，GBS對青霉素類耐藥性也會逐漸增高；而左氧氟沙星、紅霉素和克林霉素有較高的耐藥性，且紅霉素和克林霉素的耐藥率也高于國外文獻(xiàn)報道的16．7%和11%的耐藥率[14]。有研究報道GBS對紅霉素和克林霉素的耐藥主要由ermB基因介導(dǎo)[12]。根據(jù)表面抗原的有無和莢膜多糖體的結(jié)構(gòu)差異，可將 GBS 分為不同的血清型(A、B、C、D、F和G6種型)，決定何種血清型造成的感染，可發(fā)展相應(yīng)的疫苗，并由此類疫苗接種來保護(hù)孕產(chǎn)婦及新生兒。目前GBS疫苗尚在臨床評估中，臨床仍以藥物治療為主。本組研究GBS圍產(chǎn)期孕婦感染B型(34.65%)、A 型(30.69%)、G 型(21.78%)為多見。

由于GBS圍產(chǎn)期感染有上升趨勢，且會對母嬰造成不良影響，故臨床應(yīng)加大對孕產(chǎn)婦GBS感染的篩查力度，重視對GBS感染的研究,密切關(guān)注耐藥流行株的發(fā)展和傳播，加強(qiáng)臨床監(jiān)測；采取可行方法，避免GBS感染可能給母嬰帶來的嚴(yán)重后果。發(fā)現(xiàn)高危孕產(chǎn)婦GBS陽性，應(yīng)及時干預(yù)治療。

[1]Wessels M,蔣佩茹,曹云.圍生期新生兒B族鏈球菌感染作[J].中國循證兒科雜志,2011,6(4):241-244.

[2]江敏,汪偉山.孕婦B族溶血性鏈球菌帶菌狀況與母嬰預(yù)后的研究[J].中華全科醫(yī)學(xué),2012,10(4):506-507.

[3]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:452-471.

[4]Renee DS,Jeremy MK,Laura EE,et al.Risk factors for group Bstreptococcal genitourinary tract colonization in pregnant women[J].Obstet Gynecol,2005,106(6):1246-1252.

[5]嚴(yán)育忠,華靜,范惠清,等.圍產(chǎn)期B族鏈球菌感染的研究進(jìn)展[J].中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,2(l4),758-762.

[6]時春艷,曲首輝,楊 磊,等.妊娠晚期孕婦B族鏈球菌帶菌狀況的檢測及帶菌對妊娠結(jié)局的影響 [J].中華婦產(chǎn)科雜志,2010,45(l),l2-l6.

[7]Davies HD,Miller MA,Faro S,et al.Multicenter study of a rapid molecular-based assay for the diagnosis of group B streptococcal colonization in pregnancy women[J].Clin Infect Dis,2004,39(8):1129-1135.

[8]Honest H,Sharma S,Khan KS.Rapid tests for group B streptococcal colonization in laboring women:a system-atic review[J].Pediatrics,2006,117(4):1055-1066.

[9]Edwards RK,Novak-Weekley SM,Koty PP,et al.Rapid group B streptococci screening using a Real-Time poly-merase chain reaction assay[J].Obstet Gynecol,2008,111(6):1335-1341．

[10]陳慧慧,范建霞.圍產(chǎn)期B族溶血性鏈球菌感染的研究新進(jìn)展[J].中國婦幼健康研究,2009,20(3):343-345.

[11]陳恒,江立千,萬芳,等.圍產(chǎn)期B群鏈球菌感染及相關(guān)研究[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(18):2370-2371.

[12]李亞梅,張利俠,秦利,等.圍產(chǎn)期孕婦B族鏈球菌的感染和耐藥性檢測及對妊娠結(jié)局的影響[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2013,28(1):87-89.

[13]莊濤,江麗婭.景德鎮(zhèn)地區(qū)193株B群鏈球菌的藥敏分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2009,27(4):374-375．

[14]Decoster L，F(xiàn)rans J，BIanckaert H，et a1．Antimicrobial susceptibillty of group B streptococci coliected in two Belgian hospitals[J].Acta Clin Belg,2005,60(4):180-184．