陳 沖 石 妍 任 賀 劉 瑩

1.北京通達(dá)首誠(chéng)司法鑒定所（100192）；2.北京警察學(xué)院 ；3.北京市公安局法醫(yī)檢驗(yàn)鑒定中心

1 資料

某男子（以下稱被控父）因撫養(yǎng)糾紛不承認(rèn)與孩子存在親子關(guān)系，且被診斷為嚴(yán)重少精子癥患者。受某法院委托，來(lái)本機(jī)構(gòu)對(duì)其與孩子進(jìn)行親子鑒定，以確認(rèn)其是否為孩子的生物學(xué)父親。采集被控父、孩子及孩子母親指血，DNA IQ快速法提取DNA。分別用GoldeneyeTM20A試劑盒（北京基點(diǎn)認(rèn)知公司）、AGCU 21＋1試劑盒（無(wú)錫中德美聯(lián)公司）進(jìn)行39個(gè)常染色體短串聯(lián)重復(fù)（STR）基因座復(fù)合擴(kuò)增，被控父用AGCU Y24試劑盒（無(wú)錫中德美聯(lián)公司）擴(kuò)增；運(yùn)用3130XL遺傳分析儀進(jìn)行毛細(xì)管電泳分離，GeneMapper ID v3.2軟件進(jìn)行基因座分型。采用北京地區(qū)人群調(diào)查數(shù)據(jù)，按《法庭科學(xué)DNA親子鑒定規(guī)范》（GA／T965－2011）中的方法計(jì)算累計(jì)非父排除率（CPE）和親權(quán)指數(shù)（PI）。檢測(cè)的39個(gè)STR基因座分型結(jié)果見表1。孩子每個(gè)基因座中的兩個(gè)等位基因其中一個(gè)可在母親的基因型中找到來(lái)源，另一個(gè)等位基因均可在被控父的基因型中找到來(lái)源，符合遺傳規(guī)律。根據(jù)上述39個(gè)STR基因座分型結(jié)果，被控父為孩子的生物學(xué)父親的父權(quán)指數(shù)為7.41×1017。被控父24個(gè)Y－STR基因座分型見圖1。

表1 被控父與孩子及孩子母親39個(gè)STR基因座分型結(jié)果與親權(quán)指數(shù)（PI）

圖1 被控父24個(gè)Y－STR基因座分型

2 討論

如果男性精液中精子濃度＜40×106／ml，其生育能力就會(huì)隨精子濃度減少而相應(yīng)下降。2010年出版的《世界衛(wèi)生組織人類精液分析實(shí)驗(yàn)室技術(shù)手冊(cè)》［1］將正常精子濃度的下限值從原來(lái)的20×106／ml降低到15×106／ml，嚴(yán)重少精子癥患者精子濃度應(yīng)＜5×106／ml。本資料中被控父精子濃度為0.91×106／ml，診斷為嚴(yán)重少精子癥。

目前全世界大約有15%的育齡夫婦不育，不育夫婦中大約有50%與各種因素導(dǎo)致的男性精子發(fā)生障礙有關(guān)，其中30%的男性精子發(fā)生障礙是由染色體異常和基因突變、缺失等遺傳因素造成的［2］。人類基因組序列及大片段功能遺傳序列檢測(cè)證實(shí)人類Y染色體上存在許多精子發(fā)生相關(guān)基因，這些基因缺失或突變是導(dǎo)致男性原發(fā)性不育的遺傳病因［3］。Tiepolo等［4］首次發(fā)現(xiàn)了Y染色體長(zhǎng)臂1區(qū)1帶存在精子發(fā)生相關(guān)基因，稱為無(wú)精子因子（AZF）。Vogt等［5］又將 AZF區(qū)域劃分為 AZFa、AZFb與AZFc三個(gè)亞區(qū)，分別對(duì)應(yīng)臨床無(wú)精子與嚴(yán)重少精子癥。葉峻杰等［6］對(duì)236例不育男性進(jìn)行17個(gè)Y－STR基因座的研究，發(fā)現(xiàn)在AZF無(wú)精子區(qū)域9個(gè)Y－STR基因座（DYS438、DYS439、DYS437、DYS389Ⅰ、DYS389 Ⅱ、DYS392、DYS385a／b、DYS448）均有不同程度的缺失。在AZFa、AZFb與AZFc三亞型中缺失率分別為5%、5%與75%，無(wú)精子主要在AZFc區(qū)，其對(duì)應(yīng)基因座為DYS448。本資料中被控父24個(gè)Y－STR基因座均有分型，無(wú)等位基因的缺失，并未出現(xiàn)上述研究類似結(jié)果。

本例被控父診斷為嚴(yán)重少精子癥，自然生育概率很小。通過(guò)遺傳學(xué)分析與統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算確認(rèn)其為孩子的生物學(xué)父親，但在Y染色體無(wú)精子因子AZF區(qū)域的Y－STR又全部檢出分型，進(jìn)行初篩并未檢測(cè)出Y染色體缺失，故提示即使臨床診斷嚴(yán)重少精子癥，也不排除具有生育能力。

［1］ World Health Organization.WHO Laboratory Manual for the examination and processing of human semen［M］.5th ed.Geneva：World Health Organization，2010：10－56.

［2］ Akgul M，Ozkinay F，Ereal D，et al.Cytogenetic abnormalities in 179cases with infertility in Western Region of Turkey：report and review ［J］.J Assist Reprod Genet，2009，26（2－3）：119－122.

［3］ Ferlin A，Raicu F，Gatta V，et al.Male infertility：role of genetic background［J］.Reprod Biomed Online，2007，14（6）：734－735.

［4］ Tiepolo L，Zuffardi O.Localization of factors controlling spermatogenesis in the nonfluorescent Portion of the human Y chromosome long arm ［J］.Hum Genet，1976，34（2）：119－124.

［5］ Vogt PH，Edelmann A，Kirsch S，et al.Human Y chromosome azoospermia factors（AZF）mapped to different subregions in Yq11.Hum Mol Genet，1996，5：933－943.

［6］ 葉峻杰，李宗芳，陳燕祥，等.男性不育人群17個(gè)Y染色體短串聯(lián)重復(fù)基因座無(wú)效等位基因分析［J］.中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2013，30：330－334.