黃彩英

[摘要] 目的 為了比較膠體金（Collodal Gold TPCG）與快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)（ RPR）法篩查梅毒抗體區(qū)別與聯(lián)系，以便對(duì)這兩種方法有更明確的認(rèn)識(shí)，合理選擇檢測(cè)方法，減少誤診與漏診。方法 2013年該院門診和住院患者中需要檢測(cè)梅毒抗體的標(biāo)本，先用TPPA法檢測(cè)，TPPA法檢測(cè)出的陽(yáng)性標(biāo)本322例，再同時(shí)進(jìn)行TPCG法和用RPR滴度檢測(cè)。結(jié)果 322例TPPA法陽(yáng)性標(biāo)本中TPCG法320例，陰性2例；RPR陽(yáng)性114例，陰性208例。在TPPA陽(yáng)性的標(biāo)本中TPCG和RPR陽(yáng)性率有顯著性差異，TPCG陽(yáng)性率高于RPR。結(jié)論 TPCG法比較RPR更適合醫(yī)院篩查，尤其是基層醫(yī)院。

[關(guān)鍵詞] 梅毒抗體；TPCG；RPR；TPPA；梅毒篩查

[中圖分類號(hào)] R [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2014）12（c）-0169-02

梅毒是由蒼白螺旋體感染所致的系統(tǒng)性傳播疾病，其次是母嬰傳播及血液傳播。目前臨床對(duì)梅毒的診斷除了臨床癥狀以外，更依賴于實(shí)驗(yàn)室診斷。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)梅毒感染的方法很多，比較常用的篩查方法有RPR、TPCG，酶聯(lián)，發(fā)光法等，確證TPPA、TPHA和免疫印跡法較為常用。RPR和TPCG法由于實(shí)驗(yàn)要求低，操作簡(jiǎn)便，作為篩查方法被廣泛應(yīng)用，尤其是基層醫(yī)院。選自該院2013年住院及門診檢測(cè)梅毒項(xiàng)目的血清樣本，并用上術(shù)兩種方法進(jìn)行檢測(cè)，為了對(duì)這兩種篩查方法有更明確的認(rèn)識(shí)，合理應(yīng)用于臨床，減少誤診與漏診的發(fā)生，對(duì)兩種方法進(jìn)行比較，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

標(biāo)本選自該院住院及門診檢測(cè)梅毒項(xiàng)目的血清標(biāo)本，均24 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

1.2 試劑與儀器

梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)診斷試劑盒，試劑均當(dāng)天配置或在4～8℃冰箱保存并24 h內(nèi)用于檢測(cè)；TPCG法梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒；RPR試劑；移液器經(jīng)質(zhì)檢部門校準(zhǔn)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

對(duì)該院住院需要首次用TPPA法檢測(cè)梅毒抗體的患者，抽取靜脈血并分離血清，用TPPA法定性檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)陽(yáng)性的血清標(biāo)本，再用TPCG法和RPR法同時(shí)檢測(cè)。

1.4 實(shí)驗(yàn)操作及結(jié)果判斷

嚴(yán)格按操作說(shuō)明書完成。TPPA法以1：80為判斷陰陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)，以標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)板為判斷陰陽(yáng)性依據(jù)。TPCG法在膠體金試紙平放，在加樣區(qū)加100 uL樣本，20 min觀察結(jié)果，兩條紫紅色線者為陽(yáng)性，僅有對(duì)照線一條線者為陰性。RPR法進(jìn)行原倍-1：32的滴度檢測(cè)，滴度大于等于原倍者凝集者記作陽(yáng)性，各滴度均不凝集者記作陰性。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

（1）結(jié)果 結(jié)果見(jiàn)表1。322例TPPA法陽(yáng)性標(biāo)本320例，陰性2例（稀釋后復(fù)檢仍陰性，無(wú)前帶現(xiàn)象），與TPHA符合度99.38%，；RPR陽(yáng)性114例，陰性208例，與TPPA符合度35.40%。TPCG法和RPR法結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=206，P<0.005），其中2例RPR出現(xiàn)了前帶現(xiàn)象，分別在1：2和1：4時(shí)陽(yáng)性。

表1 TPCG和RPR復(fù)查322例TPPA陽(yáng)性標(biāo)本的結(jié)果

4 討論

梅毒血清學(xué)檢測(cè)根據(jù)不同抗原類型可分為非特異類脂質(zhì)抗原試驗(yàn)和特異性螺旋體試驗(yàn)兩大類。RPR法所用的抗原為心磷脂， 卵磷脂和膽固醇的混合物， 主要用于檢測(cè)血清中的反應(yīng)素； TPCG法是應(yīng)用現(xiàn)代生物工程技術(shù)制備的高度純化的單克隆梅毒螺旋體的基因工程抗原，高度選擇地找尋與之相結(jié)合的抗體的原理，是一種將TPAb標(biāo)記技術(shù)、免疫檢測(cè)技術(shù)和層析分析技術(shù)等多種方法有機(jī)結(jié)合在一起的固相標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)，當(dāng)金標(biāo)蛋白在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí)，在反應(yīng)區(qū)肉眼可見(jiàn)紅色或粉紅線，檢測(cè)的是血清中特異性抗體。

322例TPPA法陽(yáng)性標(biāo)本，用TPCG法復(fù)查陽(yáng)性320例，2例陰性，陽(yáng)性符合度99.38%，以TPPA法為金標(biāo)準(zhǔn)，TPCG法漏檢率為0.343%（2/322），與TPPA相比陽(yáng)性符合度>95%，這與一些結(jié)論不同[1-3]。RPR滴度陽(yáng)性114例，與TPPA相比陽(yáng)性符合度35.40%。TPCG法和RPR法相比檢測(cè)結(jié)果存在顯著性差異。TPCG法與TPPA的符合率高于RPR法。這主要是TPPA法和TPCG法均檢測(cè)的是特異性抗體，為同一種抗體，TPPA法明膠顆粒上包被的是梅毒螺旋體總抗原，檢測(cè)的梅毒螺旋體的總抗體；TPCG法試紙上包被的是梅毒螺旋體的基因片段，檢測(cè)的是梅毒螺旋體抗體的部分點(diǎn)位；而RPR檢測(cè)的是梅毒螺旋體的非特異性抗體。

TPCG法檢測(cè)在322例TPPA陽(yáng)性標(biāo)本中未出現(xiàn)抗體過(guò)多的前帶現(xiàn)象，RPR出現(xiàn)2例前帶現(xiàn)象，分別在1：2和1：4時(shí)出現(xiàn)陽(yáng)性。若使用兩者篩查，RPR法會(huì)因?yàn)榭贵w過(guò)剩而發(fā)生假陰性，在使用TPCG檢測(cè)中未發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象，也未發(fā)現(xiàn)此方面的報(bào)道，這一點(diǎn)膠體金法優(yōu)于RPR法。

TPCG法和RPR在檢測(cè)梅毒抗體時(shí)，根據(jù)報(bào)道均存在假陽(yáng)性。關(guān)于RPR法假陽(yáng)性的報(bào)道很多[4-5]，馬紅霞報(bào)道RPR陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為63.2%[4]。RPR試驗(yàn)作為血清梅毒抗體檢測(cè)的一種篩選試驗(yàn)， 它是檢測(cè)患者體內(nèi)血清中的反應(yīng)素（抗脂質(zhì)抗體）。而反應(yīng)素亦可在非密螺旋體患者血清中出現(xiàn)，例如風(fēng)疹、水痘等病毒性感染，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫病，麻風(fēng)、瘧疾，以及吸毒者，妊娠、甚至個(gè)別健康人也可呈生物學(xué)假陽(yáng)性，對(duì)此已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)界的共識(shí)。對(duì)TPCG法假陽(yáng)性報(bào)道也較多[6-8]，由于TPCG法反應(yīng)步驟簡(jiǎn)單，不能有效地將與其結(jié)合的雜抗體分離，具有較高的假陽(yáng)性率。兩種方法陽(yáng)性時(shí)均需要用TPPA＼TPHA等確證。

TPCG法和RPR法均具有快捷、簡(jiǎn)便、結(jié)果易于判斷的特點(diǎn)，均用于篩查試驗(yàn)，篩查方法還有酶聯(lián)和發(fā)光法。RPR是傳統(tǒng)的篩查方法，是世界衛(wèi)生組織推薦的篩查方法。由于梅毒螺旋體感染后心磷脂抗體的出現(xiàn)晚于特異性抗螺旋體抗體，而且梅毒晚期又可能轉(zhuǎn)陰，與TPPA 比RPR靈敏度低，不適于一期梅毒早期、三期梅毒診斷，對(duì)潛伏期和神經(jīng)梅毒也不敏感[9-11]，在一期和三期中存在假陰性。近年來(lái)一些中國(guó)學(xué)者陸續(xù)提出用特異性抗體方法篩查，確證后再檢測(cè)RPR確定療效[12]。endprint

TPCG法近幾年發(fā)展迅速，常用于侵入性檢查和急診術(shù)前，也有用于獻(xiàn)血人員傳染病篩查[13]。輸血及手術(shù)前進(jìn)行血液篩查時(shí)，醫(yī)院應(yīng)盡可能選用敏感性高的試劑，以避免因漏檢給醫(yī)院在法律上帶來(lái)不必要的麻煩。因此，在梅毒項(xiàng)目上，應(yīng)使用敏感性高且能發(fā)現(xiàn)既往感染的梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)。產(chǎn)前檢查時(shí)也應(yīng)選擇敏感性高且不能區(qū)分既往和現(xiàn)癥感染的梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)。感染過(guò)梅毒的孕婦即使經(jīng)過(guò)足量治療而癥狀消失，在懷孕的應(yīng)激狀態(tài)下也易出現(xiàn)復(fù)發(fā)等情況。因此，無(wú)論是現(xiàn)在或者過(guò)去曾經(jīng)感染梅毒，都應(yīng)提醒臨床特別加以注意。

由于現(xiàn)在流動(dòng)人口較多，基層醫(yī)院在梅毒的檢測(cè)方面應(yīng)發(fā)揮重要的作用，但由于基層醫(yī)院基礎(chǔ)條件設(shè)施差，標(biāo)本量少，很多方法不適合基層醫(yī)院檢測(cè)梅毒抗體。研究者認(rèn)為TPCG法比RPR法更適合基層醫(yī)院的篩查。陽(yáng)性者可到上一級(jí)醫(yī)院復(fù)查確證。TPCG法檢測(cè)梅毒抗體，治愈后很長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)仍然存在較高的陽(yáng)性率，因此，陽(yáng)性只說(shuō)明正在感染或曾經(jīng)感染過(guò)，不能判斷梅毒疾病活動(dòng)與否。RPR常作為疾病活動(dòng)與否的標(biāo)志。RPR適合在確證陽(yáng)性后檢測(cè)其滴度，既可以避免前帶現(xiàn)象，又可判斷和觀察病情，但少量患者也存在血清抵抗現(xiàn)象。

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（收稿日期：2014-09-20）endprint