王振昊++++++李靜

[摘要] 目的 探討雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)有核紅細(xì)胞（NRBC）的準(zhǔn)確性。 方法 2012年3月—2014年2月取鏡檢確認(rèn)的外周血涂片有NRBC的標(biāo)本102例，分別用顯微鏡鏡檢計(jì)數(shù)法和細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法兩種方法計(jì)數(shù)，得到兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析。結(jié)果 當(dāng)標(biāo)本中NRBC百分比<5%時(shí)，兩種檢測(cè)方法比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)有核紅細(xì)胞準(zhǔn)確。當(dāng)標(biāo)本中NRBC百分比≥5%時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩種檢測(cè)方法有明顯差異，說(shuō)明在此種情況下檢測(cè)有一定偏差。 結(jié)論 雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)有核紅細(xì)胞時(shí)準(zhǔn)確性較差，如在檢測(cè)時(shí)有NRBC的提示時(shí)，一定要推血涂片鏡檢計(jì)數(shù)，并用公式計(jì)算出白細(xì)胞總數(shù)。

[關(guān)鍵詞] 有核紅細(xì)胞；雅培CELL-DYN Ruby；顯微鏡鏡檢

[中圖分類(lèi)號(hào)] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2014）12（c）-0026-02

除新生兒以外，健康成人外周血中不會(huì)出現(xiàn)有核紅細(xì)胞[1]，只有在病理狀態(tài)下才會(huì)出現(xiàn)。因此，對(duì)外周血有核紅細(xì)胞的準(zhǔn)確計(jì)數(shù)對(duì)疾病的鑒別、病情的診斷、療效觀察、有著重要的意義[2]。隨著血細(xì)胞分析儀功能的不斷完善，有核紅細(xì)胞在血細(xì)胞分析儀上也能檢測(cè)。2012年3月—2014年2月通過(guò)對(duì)外周血中還有有核紅細(xì)胞的標(biāo)本進(jìn)行雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)和金標(biāo)準(zhǔn)法血涂片顯微鏡鏡檢計(jì)數(shù)法相比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，對(duì)雅培CELL-DYN Ruby計(jì)數(shù)NRBC的準(zhǔn)確性評(píng)估，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該院經(jīng)過(guò)染色鏡檢確認(rèn)的外周血中存在有核紅細(xì)胞的成人標(biāo)本102例。其中，溶血性貧血52例、白血病35例、MDS8例、骨髓纖維化6例、紅血病1例。

1.2 儀器與試劑

①美國(guó)雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，原廠試劑、質(zhì)控液、校準(zhǔn)液；②奧林巴斯CX-21顯微鏡；③貝索瑞氏-吉姆薩染液。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

患者2 mL，在4 h內(nèi)分別進(jìn)行CD+NRBC計(jì)數(shù)并制作血涂片3張進(jìn)行鏡檢計(jì)數(shù)。①CD+NRBC計(jì)數(shù)：將雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀調(diào)至Ready狀態(tài)，用雅培質(zhì)控血在多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則下進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控，室內(nèi)質(zhì)控通過(guò)后將儀器模式調(diào)到CD+NRBC模式。分別對(duì)患者采集的EDTA-K2抗凝血進(jìn)行標(biāo)號(hào)，應(yīng)用手動(dòng)加樣方式將標(biāo)本進(jìn)行計(jì)數(shù)。每份標(biāo)本計(jì)數(shù)三次，記錄NRBC的百分?jǐn)?shù)值取平均值做為該標(biāo)本儀器計(jì)數(shù)的結(jié)果。②鏡檢計(jì)數(shù)：取患者采集的EDTA-K2抗凝血50 uL滴于干凈玻片上制作三張血涂片，放于玻片架上20 min待血涂片干燥后，用貝索瑞氏-吉姆薩染液A液滴于血涂片上至全部覆蓋3 min，再將B液滴于血涂片上用吸爾球?qū)⑷疽夯靹?，靜置5 min用清水沖洗血涂片，晾干后分別由三名有經(jīng)驗(yàn)閱片老師在奧林巴斯CX-21顯微鏡下對(duì)血涂片進(jìn)行有核紅細(xì)胞鏡檢計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)100個(gè)有核細(xì)胞，計(jì)算NRBC的百分比，取三個(gè)結(jié)果的平均值作為鏡檢計(jì)數(shù)的結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

取鏡檢確認(rèn)的外周血涂片有NRBC的標(biāo)本102例，分別用顯微鏡鏡檢計(jì)數(shù)法和細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法兩種方法計(jì)數(shù)，對(duì)比研究結(jié)果顯示，當(dāng)標(biāo)本中NRBC百分比<5%時(shí)，兩種檢測(cè)方法比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），說(shuō)明雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)有核紅細(xì)胞準(zhǔn)確。當(dāng)標(biāo)本中NRBC百分比≥5%時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩種檢測(cè)方法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩種方法差異情況對(duì)比（x±s）

3組數(shù)據(jù)中當(dāng)NRBC<5%時(shí)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，儀器法和鏡檢法檢測(cè)NRBC無(wú)明顯差別，雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)NRBC準(zhǔn)確。當(dāng)NRBC≥5%時(shí)，其余兩組數(shù)據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩種方法有檢測(cè)NRBC有差異，雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)NRBC有誤差。

3 討論

血細(xì)胞分析儀自動(dòng)計(jì)數(shù)外周血中NRBC是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新技術(shù)，逐漸開(kāi)始應(yīng)用于臨床[3-4]。隨著日益增多的血液病患者，外周血有核紅細(xì)胞的檢測(cè)也顯得尤為重要。由于NRBC的檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用時(shí)間較短，臨床特別需要了解其方法學(xué)特點(diǎn)診斷效率及應(yīng)用范圍等，該研究正是對(duì)上述內(nèi)容的進(jìn)行探討。美國(guó)雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀是具有四種檢測(cè)模式CD、CD+NWBC、CD+NRBC、網(wǎng)織紅細(xì)胞，我們?cè)谶@里用到CD和CD+NRBC模式。在CD模式下計(jì)數(shù)白細(xì)胞是將紅細(xì)胞溶解后，在鞘流的作用下對(duì)剩下的細(xì)胞核進(jìn)行計(jì)數(shù)得到白細(xì)胞總數(shù)，如果標(biāo)本里含有NRBC這樣就計(jì)數(shù)在白細(xì)胞數(shù)內(nèi)，造成白細(xì)胞偏高，有核細(xì)胞未被檢出[5-6]。而對(duì)含有NRBC的標(biāo)本在CD+NRBC模式下檢測(cè)，標(biāo)本會(huì)得到進(jìn)一步處理，延長(zhǎng)紅細(xì)胞的裂解時(shí)間，并在孵育池內(nèi)添加了活性物質(zhì)，使有核紅細(xì)胞充分溶解后，在注入計(jì)數(shù)池計(jì)數(shù)，得到白細(xì)胞數(shù)。這樣可以計(jì)算出有核紅細(xì)胞的數(shù)量，使白細(xì)胞數(shù)更為準(zhǔn)確。外周血中出現(xiàn)NRBC時(shí)，生理性主要見(jiàn)于新生兒。病理性主要見(jiàn)于（1）增生性貧血：各種溶血性貧血、急性失血、巨幼貧等。（2）骨髓造血功能異常：MDS、紅血病、紅白血病、白血病。（3）髓外造血、骨髓纖維化。（4）人體嚴(yán)重缺氧[7-10]。本實(shí)驗(yàn)包括了大部分病例，通過(guò)該次試驗(yàn)對(duì)雅培CELL-DYN Ruby檢測(cè)NRBC做了評(píng)估。

該研究取鏡檢確認(rèn)的外周血涂片有NRBC的標(biāo)本102例，分別用顯微鏡鏡檢計(jì)數(shù)法和細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法兩種方法計(jì)數(shù)，結(jié)果顯示，當(dāng)標(biāo)本中NRBC百分比<5%時(shí)，兩種檢測(cè)方法比較，相關(guān)性良好，相關(guān)系數(shù)為0.938，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)有核紅細(xì)胞準(zhǔn)確。當(dāng)標(biāo)本中NRBC百分比≥5%時(shí)，兩種方法的相關(guān)性隨著有核紅細(xì)胞的數(shù)量增加而變大，相關(guān)系數(shù)為0.622，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩種檢測(cè)方法有明顯差異，說(shuō)明在此種情況下檢測(cè)有一定偏差。健康成人外周血片中找到1NRBC/100WBC就有意義，但過(guò)去認(rèn)為≥2NRBC/100WBC時(shí)臨床才有意義且需要報(bào)告，≥10NRBC/100WBC時(shí)需校正WBC總數(shù)。該研究結(jié)果表明，儀器法NRBC≥5.00%時(shí)，有82.2%以上的標(biāo)本儀器檢測(cè)結(jié)果大于手工法結(jié)果。如果有NRBC報(bào)警提示時(shí)就需要進(jìn)行CBC+NRBC研究提示，雅培CELL-DYN Ruby全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)有核紅細(xì)胞時(shí)準(zhǔn)確性較差，如在檢測(cè)時(shí)有NRBC的提示時(shí)，一定要推血涂片鏡檢計(jì)數(shù)，并用公式計(jì)算出白細(xì)胞總數(shù)。綜上所述：雅培CELL-DYN Ruby血細(xì)胞分析儀對(duì)有核紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)不能代替顯微鏡鏡檢計(jì)數(shù)。在儀器提示NRBC時(shí)，打開(kāi)CD+NRBC模式不能準(zhǔn)確的排除有核紅細(xì)胞的干擾。必須進(jìn)行顯微鏡染色鏡檢計(jì)數(shù)，利用公式進(jìn)行計(jì)算出白細(xì)胞總數(shù)以及NRBC的百分比，時(shí)至今日仍是血液病診斷重要的方法[6]。

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（收稿日期：2014-10-28）endprint