孫超，孫發(fā)，2＊＊，邢俊平，樊國軍，趙伊立，王成躍，唐開發(fā)，2＊＊

(1.貴陽醫(yī)學(xué)院附院泌尿外科，貴州貴陽550004;2.貴陽醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所，貴州貴陽550004;3.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院泌尿外科，陜西西安710061)

低促性腺激素性性腺功能減退癥(hypogonadotropic hypogonadism，HH)是一種先天性促性腺功能低下或合并有嗅覺缺失聯(lián)合出現(xiàn)的病征，發(fā)病率男性為1/10 000，女性為1/50 000，患者多因性功能低下、男性不育、兩性畸形等原因就診［1-2］。目前臨床上對(duì)HH的輔助檢查包括下丘腦-垂體-性腺軸功能，染色體核型分析，GnRH激發(fā)試驗(yàn)，人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin，HCG)激發(fā)試驗(yàn)，頭顱影像學(xué)檢查，骨齡測(cè)定及性激素測(cè)定［3］。骨鈣素(osteocalcin，OC)又稱骨鈣蛋白，是由成骨細(xì)胞分泌的一種特異性非膠原蛋白，血清中OC水平變化，直接反映成骨細(xì)胞活性，是成骨細(xì)胞功能和骨質(zhì)礦化的特殊標(biāo)志物，作為骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物逐漸被臨床應(yīng)用，其作為骨代謝的標(biāo)志物在臨床應(yīng)用中敏感性、特異性高［4］。本研究通過測(cè)定HH患者血清骨鈣素(OC)水平及性激素水平，探討血清OC與HH的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2007年3月～2013年12月低促性腺激素性性腺功能減退癥男性患者98例作為病例組，并選取同期、同區(qū)域、同年齡匹配的健康男性100例作為對(duì)照組。病例組和對(duì)照組在年齡、性別、來自的區(qū)域等均匹配，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析兩組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。病例組98例患者均為男性，年齡15～26歲，平均(17.38±2.65)歲;正常對(duì)照組:100例健康對(duì)照均為男性，年齡16～28歲，平均(17.40±2.94)歲。所有研究對(duì)象均填寫一個(gè)調(diào)查問卷包括:個(gè)人史、生育史、既往史及家族史等，并填寫科研知情同意書，該項(xiàng)研究得到貴陽醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 診斷及納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

(1)性腺發(fā)育落后:表現(xiàn)為性腺發(fā)育障礙、性幼稚體型，可伴隨生長落后，性激素水平表現(xiàn)為低血清睪酮，低促卵泡生成素(follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH)或合并低促黃體酮生成素(luteinizing hormone，LH);(2)或合并嗅覺功能障礙:X-性染色體連鎖KS患者幾乎均有不同程度的嗅覺缺陷;(3)或合并多種先天畸形:如色盲、聽力減退、高腭弓、腭裂、單腎發(fā)育不全和先天性心臟病等;(4)染色體核型分析:所有患者血淋巴細(xì)胞染色體核型均男性為46，XY;(5)GnRH激發(fā)試驗(yàn):垂體對(duì)外源性GnRH激發(fā)反應(yīng)差異較大;(6)HCG激發(fā)試驗(yàn):患者對(duì)HCG刺激反應(yīng)波動(dòng)較大;(7)頭顱影像學(xué)檢查:大多數(shù)患者無明顯異常發(fā)現(xiàn)，或顱內(nèi)MRI證實(shí)部分患者無嗅球和嗅管，并存在不同程度的大腦嗅溝非對(duì)稱性發(fā)育不良;(8)骨齡測(cè)定:HH患者骨齡通常較同齡人滯后。排除標(biāo)準(zhǔn):排除Kinefelter綜合征和Turner綜合征。

1.3 研究方法

血清性激素檢測(cè)對(duì)所有研究對(duì)象空腹采取外周靜脈血5 mL，2 000 g離心5 min分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)分別測(cè)定血清FSH、LH、泌乳素(prolactin，PRL)，孕酮(progesterome，P)，雌二醇(estradiol，E2)和睪酮(testosterone，T)，每份樣本均行3次檢測(cè)并取平均值。

1.4 血清骨鈣素檢測(cè)

所有研究對(duì)象空腹采取外周靜脈血5 mL，2 000×g離心5 min分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清OC，每份樣本均行3次檢測(cè)并取平均值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

該研究數(shù)據(jù)均采用SPSS 11.6進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，組間差異采用方差分析，血清OC與FSH、LH及T之間的相關(guān)性采用logistic回歸分析，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清性激素與OC水平

對(duì)照組FSH、LH及T明顯高于病例組，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)，而PRL、P和E2在兩組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。對(duì)照組OC水平明顯高于病例組，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。見表1。

2.2 血清OC與FSH、LH、T相關(guān)性

在病例組中，采用logistic回歸分析的方法對(duì)血清T、FSH、LH及OC水平分析，血清OC與T呈正性相關(guān)(β=0.490，95%CI=0.080～0.150，P＜0.001)，OC與FSH呈正性相關(guān)(β=0.240，95%CI=0.046～0.167，P=0.001)，OC與LH無明顯相關(guān)性(β=0.093，95%CI=-0.020～0.109，P=0.175)。見表2。

表1 對(duì)照組與病例組血清性激素及骨鈣素水平Tab.1 The serum sex hormone levels and osteocalcin levels in normal control group and patient group

3 討論

1856年Maestrede Sanjuan報(bào)道存在性功能低下伴嗅覺障礙這一疾病，1944年美國紐約的精神病遺傳學(xué)家Kallmann首先報(bào)道了3個(gè)家族中的12例類無睪癥，其中9例伴有嗅覺缺失，并開始提出這是一種遺傳性疾病，此后各國相繼有多個(gè)家族性和散發(fā)病例報(bào)道。低促性腺激素性性腺功能減退癥患者主要表現(xiàn)為第二性征低下、性功能障礙同時(shí)常伴有嗅覺缺失或部分缺失，且被認(rèn)為是男性不育的重要原因之一［1-5］。HH在臨床上主要表現(xiàn)為性腺發(fā)育落后(如性幼稚等)，嗅覺功能完全喪失或減退，合并多種先天畸形(如腭裂、隱睪等)以及頭顱影像學(xué)檢查大多數(shù)患者無明顯異常，但近年頭顱MRI發(fā)現(xiàn)部分患者無嗅球和嗅管［6］。目前在臨床上HH患者的診斷主要通過臨床表現(xiàn)、體格檢查及輔助檢查下丘腦-垂體-性腺軸功能檢測(cè)，染色體核型分析，GnRH激發(fā)試驗(yàn)，人絨毛膜促性腺激素(HCG)激發(fā)試驗(yàn)，頭顱影像學(xué)檢查以及骨齡測(cè)定等［7-9］。

表2 病例組血清OC水平與FSH、LH及T回歸分析Tab.2 The logistic analysis of OC and FSH，LH，and T in patient group

骨鈣素又稱骨γ-羧基谷氨酸蛋白(BGP)，是成熟成骨細(xì)胞合成和分泌的一種特異的非膠原骨基質(zhì)蛋白［10］。血清骨鈣素主要生理功能是維持骨正常鈣化速率，抑制軟骨礦化速率，直接反映骨形成和骨重建［11］。既往研究認(rèn)為血清骨鈣素水平與空腹血糖、胰島素濃度，體脂含量呈負(fù)相關(guān)，確立了骨鈣素調(diào)節(jié)糖代謝的重要作用，對(duì)其機(jī)制的了解將為治療糖尿病提供新的靶點(diǎn)［12］。Overvad等［13］研究發(fā)現(xiàn)血液中非羧基化骨鈣素可作用于β細(xì)胞、脂肪細(xì)胞及睪丸間質(zhì)細(xì)胞，促進(jìn)胰島素，脂聯(lián)素和睪酮的分泌，對(duì)能量代謝和雄性生殖起調(diào)節(jié)作用。臨床數(shù)據(jù)也顯示骨鈣索與糖尿病、非酒精性脂肪肝等多種能量代謝病存在密切的相關(guān)性。另外，Oury等［14］在研究骨骼系統(tǒng)和生殖的相關(guān)性中發(fā)現(xiàn)骨鈣素可以影響睪丸對(duì)睪酮的產(chǎn)生和分泌。

在該項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)，低促性腺激素性性腺功能減退癥患者組骨鈣素水平顯著低于正常健康對(duì)照組(P＜0.001);同時(shí)低促性腺激素性性腺功能減退癥患者組血清睪酮、促卵泡生成素，促黃體酮生成素水平均顯著低于正常健康對(duì)照組(P＜0.001，P＜0.001，P＜0.001)。經(jīng)logistic回歸分析后發(fā)現(xiàn)血清骨鈣素水平分別與血清睪酮、促卵泡生成素成正性相關(guān)(β=0.490，P＜0.001;β=0.240，P=0.001)，而與血清促黃體酮生成素?zé)o明顯相關(guān)(β=0.093，P=0.175)。因此，導(dǎo)致低促性腺激素性性腺功能減退癥患者血清睪酮降低的原因除了與血清促卵泡生成素水平低存在相關(guān)性，也可能與血清骨鈣素水平較低存在相關(guān)性。然而，該研究僅從血清骨鈣素水平以及性激素水平來分析骨鈣素與低促性腺激素性性腺功能減退癥的相關(guān)性。同時(shí)存在病例數(shù)較少、人種單一，單中心等因素。因此骨鈣素與低促性腺激素性性腺功能減退癥的相關(guān)性以及發(fā)病機(jī)制均有待于進(jìn)一步研究。

［1］Tang KF，Wu QF，Zou TJ，et al.Molecular analysis of KAL-1 in a series of Kallmann syndrome and normosmic idiopathic hypogonadotropic hypogonadism patients from Northwestern China［J］.Asian J Androl，2009(6):711-715.

［2］肖幫惠，時(shí)立新，彭年春，等.特發(fā)性低促性腺激素性性功能減退癥4例［J］.貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013(3):335-336.

［3］Zhang SL，Tang YP，Wang T，et al.Clinical assessment and genomic landscape of a consanguineous family with three Kallmann syndrome descendants［J］.Asian JAndrol，2011(1):166-171.

［4］Villafan-Bernal JR，Sanchez-Enriquez S，Munoz-Valle JF.Molecular modulation of osteocalcin and its relevance in diabetes(Review)［J］.Int JMol Med，2011(3):283-293.

［5］彭年春，時(shí)立新，張巧，等.Kallmann綜合征2例報(bào)告［J］.貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008(3):325-326.

［6］Zaghouani H，Slim I，Zina NB，et al.Kallmann syndrome:MRI findings［J］.Indian J Endocrinol Metab，2013(Suppl 1):S142-S145.

［7］Mccabe MJ，Bancalari RE，Dattani MT.Diagnosis and evaluation of hypogonadism［J］.Pediatr Endocrinol Rev，2014(Suppl2):214-229.

［8］Paun D，Gherlan I，Popescu I，et al.Phenotypic spectrum and hormonal profile in hypogonadotropic hypogonadism［J］.J Med Life，2014(1):42-45.

［9］Hosseinifar H，Sabbaghian M，Chehrazi M，et al.Assessment of deoxyribonucleic acid fragmentation index，testicular volume，semen parameters，and hormone profile in gonadotropin-treated men with hypogonadotropic hypogonadism［J］.Urology，2013(6):1291-1295.

［10］Sarkar PD，Choudhury AB.Relationships between serum osteocalcin levels versus blood glucose，insulin resistance and markers of systemic inflammation in central Indian type 2 diabetic patients［J］.Eur Rev Med Pharmacol Sci，2013(12):1631-1635.

［11］梁劍，黃玉宇，杜南進(jìn).血清骨鈣素、降鈣素、睪酮及甲狀旁腺激素在老年男性骨質(zhì)疏松癥中臨床意義［J］.廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008(5):10-12.

［12］張堯.骨鈣素(OC)對(duì)糖代謝的影響及其活性調(diào)節(jié)［J］.復(fù)旦學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版，2013(2):242-245.

［13］Overvad S，Bay K，Bojesen A，et al.Low INSL3 in Klinefelter syndrome is related to osteocalcin，testosterone treatment and body composition，as well as measures of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis［J］.Andrology，2014(3):421-427.

［14］Oury F，Sumara G，Sumara O，et al.Endocrine regulation of male fertility by the skeleton［J］.Cell，2011(5):796-809.