郭欣桐

(河北大學臨床醫(yī)學院 河北 保定 071000)

淺議維生素C保護糖尿病大鼠主動脈的作用機制

郭欣桐

(河北大學臨床醫(yī)學院 河北 保定 071000)

目的：分析維生素C保護糖尿病大鼠主動脈的作用機制。方法：隨機將通過鏈脲佐菌素腹腔注射法誘導建立的1型糖尿病大鼠模型分為包括糖尿病組和維生素C治療組在內的造模組和正常對照組。連續(xù)治療4個月后對大鼠G-LDL、HbA1c、HDL、LDL、TC、TG、BG等指標變化進行觀察。麻醉處死大鼠后，對其主動脈進行分離，分析HE染色和免疫組織化學檢測在主動脈內膜FN表達情況。結果：造模組大鼠發(fā)生血脂異常和主動脈病理形態(tài)改變情況。維生素C不會影響大鼠血糖，但可顯著降低G-LDL、HbA1c、LDL、TC、TG以及主動脈纖維連接蛋白表達，并顯著升高HDL。結論：維生素C無明顯降糖功效，可通過降血脂及抑制主動脈纖維連接蛋白表達形式的方式保護糖尿病大鼠主動脈。

主動脈;糖尿病大鼠;維生素C

根據(jù)大量臨床研究報告結果，可知脂代謝紊亂已經(jīng)成為DM(糖尿病)血管病變的獨立損傷危險因素之一，DM大血管病變發(fā)生發(fā)展與血脂異常存在密切關聯(lián)。在人體血漿之中，維生素C是最有效的一種水溶性抗氧化劑，可將氧自由基有效清除，對自由基引發(fā)的氧化反應進行阻斷，確保生物可以不遭受氧化損傷或者過氧化損傷［1］。本文旨在分析維生素C保護糖尿病大鼠主動脈的作用機制，現(xiàn)匯報如下:

1.資料與方法

1.1 一般資料

①研究對象:選擇某大學動物部提供的50只2個月左右的雄性大鼠，對其進行1周左右適應性喂養(yǎng)后用于實驗中。②試劑與儀器:維生素C(國藥準字H20054964，陜西渭南華仁制藥有限責任公司)、日立全自動生化儀、SP免疫組化染色試劑盒、手持式快速全血葡萄糖測試儀、兔抗鼠纖維連接蛋白、鏈脲佐菌素。

1.2 方法

①動物造模方法:預養(yǎng)大鼠1周之后，使其保持12h空腹狀態(tài)，50只大鼠中有38只注射1%SZT檸檬酸鈉緩沖液，另12只大鼠注射同等劑量的檸檬酸鈉緩沖液，然后采血進行血糖測量，若血糖在16.7mmol/L之上則表示建立模型成功。排除死亡和造模失敗大鼠，本組研究共納入28只糖尿病大鼠。②正常對照組12只，造模組28只隨機分為糖尿病組14只以及維生素C治療組14只。維生素C治療組大鼠每天給予100mg/kg維生素C灌胃治療。為有效維持糖尿病大鼠生存和避免發(fā)生酮癥情況，糖尿病組大鼠間隔1日腹腔注射2-4U長效胰島素，通過斷尾取血方法檢測血糖，確保血糖波動控制在25mmol/L范圍內，實驗時間為3個月。

1.3 結果判斷標準

采用全自動生化檢測儀對G-LDL、HbA1c、LDL、TC、TG、HDL等指標進行檢測。麻醉處死大鼠后，對其主動脈進行分離，按照免疫試劑盒的說明進行操作，分析HE染色和免疫組織化學檢測在主動脈內膜FN表達情況。根據(jù)著色程度進行判斷:無黃色表示陰性(-);淡黃色表示弱陽性(+);黃色表示陽性(++);深黃色或黃褐色表示強陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計學處理

2.結果

造模組大鼠發(fā)生血脂異常和主動脈病理形態(tài)改變情況。維生素C不會影響大鼠血糖，但可顯著降低G-LDL、HbA1c、LDL、TC、TG以及主動脈纖維連接蛋白表達，并顯著升高HDL。

3.討論

據(jù)相關研究報告顯示，動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展與高血脂癥、血小板功能異常以及高血糖等多種疾病關系緊密，在高脂血癥的狀態(tài)下容易產(chǎn)生超氧陰離子，從而導致低密度脂蛋白氧化修飾成為動脈粥樣硬化的高危因素。I、IV、V型膠原蛋白和FN是糖尿病大鼠主動脈壁ECM的主要成分，在LN(層黏連蛋白)和蛋白多糖共同組成。在ECM諸多成分中，反應迅速且持久的是FN，其在I、IV、V型膠原蛋白之前，膠原蛋白沉積的必須具備的條件，F(xiàn)N數(shù)量不斷增加，主動脈的順應性就會不斷降低，從而使主動脈功能受到嚴重影響。糖尿病發(fā)病時，氧化應激、生長因子以及高血糖、非酶唐化產(chǎn)物等不斷生長增多，均會在一定程度上刺激FN合成，并對其降解進行抑制。血管肥厚是糖尿病大鼠主動脈結構重建的主要特征，膠原纖維面積開始出現(xiàn)進行性增大，但彈性纖維面積卻在不斷減小，動脈壁內大量增加的FN，與動脈粥樣硬化可能存在一定的關聯(lián)［2］。

本組研究表明，造模組大鼠發(fā)生血脂異常和主動脈病理形態(tài)改變情況。維生素C不會影響大鼠血糖，但可顯著降低G-LDL、HbA1c、LDL、TC、TG以及主動脈纖維連接蛋白表達，并顯著升高HDL。這種作用并不是因為降低血糖之后引起的，分析其作用機制，可能包括以下兩方面:①糖基化蛋白量不斷增加的同時會產(chǎn)生大量自由基，糖尿病體內氧化應激不斷增加，但維生素C具有的強抗氧化性則能在一定程度上對高糖環(huán)境中氧化應激過程的某些環(huán)節(jié)進行抑制;②維生素C會抑制蛋白質非酶糖基化反應，控制AGEs不斷生成，其可通過發(fā)揮抗氧化糖基化的作用保護糖尿病大血管［3］。

綜上所述，維生素C無明顯降糖功效，可通過降血脂及抑制主動脈纖維連接蛋白表達形式的方式保護糖尿病大鼠主動脈。

［1］宋志霞，郭銀鳳，周敏，等.活性維生素D3通過抑制TRPC6表達發(fā)揮糖尿病腎病的保護作用［J］.東南大學學報(醫(yī)學版)，2014，33 (6)：683-690.

［2］梁應平，胡衍輝，周志東，等.維生素C對糖尿病大鼠腎缺血-再灌注損傷的影響［J］.臨床麻醉學雜志，2011，27(5)：504-506.

［3］孫青，梁曉春，王普艷，等.筋脈通對糖尿病大鼠周圍神經(jīng)組織誘導型一氧化氮合酶和硝基酪氨酸表達的影響［J］.中國中藥雜志，2012，37(3)：348-352.

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1009-6019(2015)13-0074-02