馮力彬　武艷　邢軍鋒(石家莊市藁城人民醫(yī)院檢驗(yàn)科　河北　石家莊　0560;河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn)科　河北　石家莊　0500;石家莊市藁城人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科　河北　石家莊　0560)

靜脈輸注脂肪乳對(duì)微柱凝膠法交叉配血的影響

馮力彬1武艷2邢軍鋒3
(1石家莊市藁城人民醫(yī)院檢驗(yàn)科河北石家莊052160;2河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院檢驗(yàn)科河北石家莊050031;3石家莊市藁城人民醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科河北石家莊052160)

摘要目的:探討靜脈輸注脂肪乳對(duì)微柱凝膠法交叉配血的影響。方法:運(yùn)用微柱凝膠法對(duì)45例擬輸血患者靜脈輸注脂肪乳前后兩組標(biāo)本進(jìn)行ABO、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體檢測(cè)和交叉配血試驗(yàn)。結(jié)果:輸注脂肪乳后，45例患者標(biāo)本各試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)有明顯的異常凝集現(xiàn)象，只有1例出現(xiàn)1 +以下的異常凝集現(xiàn)象，輸注脂肪乳前后兩組無(wú)顯著性差異( P＞0. 05)。結(jié)論:靜脈輸注脂肪乳后采集的標(biāo)本對(duì)微柱凝膠法交叉配血試驗(yàn)的影響較小，可以按通常標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。

關(guān)鍵詞擬輸血;脂肪乳;微柱凝膠;交叉配血

常見(jiàn)的交叉配血方法主要有鹽水法、抗人球蛋白法、凝聚胺法、微柱凝膠試驗(yàn)法。微柱凝膠試驗(yàn)( MGT)是20世紀(jì)90年代進(jìn)入國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室并用于交叉配血的新方法。在一些先進(jìn)國(guó)家已成為常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)［1］。微柱凝膠法具有標(biāo)準(zhǔn)化程度高、重復(fù)性強(qiáng)、試驗(yàn)結(jié)果明確可靠、患者血標(biāo)本用量少、操作簡(jiǎn)單、結(jié)果易于觀察及保存時(shí)間長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)［2］。筆者運(yùn)用微柱凝膠法對(duì)45例擬輸血患者靜脈輸注脂肪乳前后標(biāo)本進(jìn)行ABO、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體檢測(cè)和交叉配血試驗(yàn)，報(bào)告如下:

1.　資料與方法

1. 1一般資料

選擇2014年4月－10月本院45例擬輸血患者，在靜脈輸注脂肪乳前后分別采集靜脈血EDTA抗凝標(biāo)本。這45例患者分別來(lái)自普通外科、骨科、重癥醫(yī)學(xué)科、血液內(nèi)科。交叉配血標(biāo)本均來(lái)自河北省血液中心無(wú)償自愿獻(xiàn)血，實(shí)驗(yàn)完畢立即置4℃冰箱保存。

1. 2試劑與儀器

( 1) ABO、RhD血型定型檢測(cè)卡

( 2)交叉配血抗人球蛋白檢測(cè)卡

( 3)不規(guī)則抗體抗人球蛋白檢測(cè)卡

( 4) ABO血型反定型試劑

包括4%A1紅細(xì)胞，4%B紅細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)時(shí)需稀釋為0. 5%－0. 8%濃度。

以上檢測(cè)試劑生產(chǎn)廠家:長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限公司

( 5)不規(guī)則抗體篩檢細(xì)胞

包括檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ、檢測(cè)細(xì)胞Ⅱ、檢測(cè)細(xì)胞Ⅲ

實(shí)驗(yàn)時(shí)需稀釋為0. 5%－0. 8%濃度。

生產(chǎn)廠家:長(zhǎng)春博德生物技術(shù)有限公司

( 6) TD－3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)

( 7) FYQ型免疫微柱37℃孵育器

以上儀器生產(chǎn)廠家:長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限公司

1. 3檢測(cè)方法

對(duì)45例擬輸血患者靜脈輸注脂肪乳前后標(biāo)本分別進(jìn)行ABO、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體檢測(cè)和交叉配血試驗(yàn)，嚴(yán)格按照微柱凝膠法檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。各項(xiàng)操作步驟如下:

( 1)將微柱凝膠試劑卡的6只凝膠微管標(biāo)號(hào)。

( 2)將待檢者0. 5%－0. 8%紅細(xì)胞懸液分別加入第一至第四只微管中，每管50ul。

( 3)將待檢者血清分別加入第五只和第六只微管，每管50ul。

( 4)將已知A型和B型紅細(xì)胞0. 5%－0. 8%濃度懸液分別加入第五只和第六只微管中，每管50ul。

( 5)即刻使用TD－3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)離心5分鐘，900rpm 2分鐘，1500 rpm 3分鐘，取出，觀察結(jié)果。

1. 3. 2不規(guī)則抗體檢測(cè)

( 1)將試劑卡做好標(biāo)記。

大月亮，細(xì)月亮，哥哥在堂屋里學(xué)篾匠，嫂嫂在廚房里蒸淘飯，淘飯蒸得噴噴香。不把得哥哥呷，不把得哥哥嘗，提起袋里撞你咯娘。

( 2)分離被檢者血清(或血漿)。

( 3)用低離子溶液將篩檢紅細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分別配成0. 5%－0. 8%濃度，分別加入標(biāo)記好的微管中，各1滴(或50 ul)。

( 4)分別立即加入被檢者血清(或血漿) 1滴(或50 ul)。

( 5)加樣后的試劑卡，置37℃中孵育15分鐘。

( 6)使用TD－3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)離心5分鐘，900rpm 2分鐘，1500 rpm 3分鐘，取出，觀察結(jié)果。

1. 3. 3交叉配血試驗(yàn)

( 1)將受血者和獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞和血清(或血漿)分離。

( 2)用低離子溶液分別將受血者與獻(xiàn)血者紅細(xì)胞配成0. 5%－0. 8%濃度紅細(xì)胞懸液。

( 3)將獻(xiàn)血者紅細(xì)胞1滴(或50 ul)與受血者血清(或血漿) 1滴(或50 ul)加入到主側(cè)管中。

( 4)將受血者紅細(xì)胞1滴(或50 ul)與獻(xiàn)血者血清(或血漿) 1滴(或50 ul)加入到次側(cè)管中。

( 5)加樣后的試劑卡，置37℃中孵育15分鐘。

( 6)使用TD－3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)離心5分鐘，900rpm 2分鐘，1500 rpm 3分鐘，取出，觀察結(jié)果。

1. 3. 4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17. 0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)資料進(jìn)行X2檢驗(yàn)，P＜0. 05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.　結(jié)果

2. 1這45例標(biāo)本分別來(lái)自普通外科8例、骨科6例、重癥醫(yī)學(xué)科16例、血液內(nèi)科15例，血型分布: A型10例、B型16例、AB型6例、O型12例、以上RhD均陽(yáng)性，有1例標(biāo)本O型，RhD陰性(標(biāo)本科室分布見(jiàn)表1)。

2. 2靜脈輸注脂肪乳前，45例標(biāo)本各試驗(yàn)無(wú)異常凝集現(xiàn)象，包括血型正反定型均相符，與相同血型的標(biāo)本交叉配血均相合，即無(wú)凝集無(wú)溶血，不規(guī)則抗體檢測(cè)陰性。靜脈輸注脂肪乳后，45例患者標(biāo)本各試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)有明顯的異常凝集現(xiàn)象，只有1例出現(xiàn)1 +以下的異常凝集現(xiàn)象，來(lái)自血液內(nèi)科(具體結(jié)果詳見(jiàn)表2)。

3.　討論

凝膠分子篩是微柱凝膠技術(shù)的核心，凝膠分子之間存在著間隙，而這個(gè)間隙只可讓單個(gè)紅細(xì)胞通過(guò)。如果紅細(xì)胞發(fā)生凝集，凝膠微柱層析分子就會(huì)將其阻滯于凝膠之內(nèi)，而沒(méi)有發(fā)生凝集的紅細(xì)胞就會(huì)穿過(guò)凝膠分子之間的間隙運(yùn)動(dòng)至柱底，以此來(lái)區(qū)別有無(wú)凝集。

脂肪乳是一種營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充藥，為人體提供能量和必需的脂肪酸，三甘油酯、卵磷脂和甘油是脂肪乳的主要成分。脂肪乳粒子體內(nèi)清除的速度與乳糜微粒相近，其大小也和乳糜微粒相差不多。而乳糜微粒在人血漿脂蛋白顆粒中體積是最大的。

從表2我們可以看出，45例標(biāo)本輸注脂肪乳前后對(duì)比，通過(guò)X2檢驗(yàn)，P＞0. 05，兩組無(wú)顯著性差異.

以上試驗(yàn)出現(xiàn)的1例異常凝集標(biāo)本，不排除有其他因素造成的異常凝集(如標(biāo)本污染等)。當(dāng)然，也存在另一種可能:在短時(shí)間內(nèi)輸注大量或高濃度脂肪乳時(shí)，血液中大量脂肪乳粒子積聚，在這個(gè)時(shí)候采集血標(biāo)本，用微柱凝膠法進(jìn)行ABO、RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體檢測(cè)和交叉配血，脂肪乳粒子就有可能聚集在凝膠分子間隙，阻礙紅細(xì)胞穿過(guò)微孔運(yùn)動(dòng)至柱底。從而在外觀上出現(xiàn)類似凝集的現(xiàn)象，影響判斷交叉配血所有試驗(yàn)的結(jié)果。本試驗(yàn)兩組對(duì)比雖然無(wú)顯著性差異，但輸注脂肪乳對(duì)微柱凝膠法交叉配血試驗(yàn)的影響還需進(jìn)一步研究.

綜上所述，靜脈輸注脂肪乳對(duì)微柱凝膠法交叉配血試驗(yàn)的影響無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明靜脈輸注脂肪乳后采集的標(biāo)本對(duì)微柱凝膠法交叉配血試驗(yàn)的影響較小，輸過(guò)脂肪乳的標(biāo)本可以按通常標(biāo)本進(jìn)行交叉配血。但是，靜脈輸注脂肪乳對(duì)微柱凝膠法交叉配血試驗(yàn)影響的可能性還是存在的.如果微柱凝膠法交叉配血有凝集現(xiàn)象，可以用其他方法(如凝聚胺法等)重新交叉配血，或者在患者體內(nèi)脂肪乳降解后重新采集血標(biāo)本進(jìn)行交叉配血。在實(shí)際工作中，建議臨床醫(yī)師在靜脈輸注脂肪乳前或脂肪乳在人體內(nèi)被降解吸收后再采血，然后進(jìn)行交叉配血，以避免脂肪乳對(duì)微柱凝膠法交叉配血試驗(yàn)可能的影響。

參考文獻(xiàn)

［1］李勇，楊貴貞.人類紅細(xì)胞血型學(xué)實(shí)用理論與實(shí)驗(yàn)技術(shù)［M］.北京，中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社，1999:274.

［2］王德付.微柱凝膠試驗(yàn)在交叉配血中的應(yīng)用［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8( 16) :2045－2046.

【中圖分類號(hào)】R446. 11

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

【文章編號(hào)】1009－6019( 2015) 12－0045－02

作者簡(jiǎn)介:馮力彬，男，39歲，工作單位:石家莊市藁城人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，職稱:主管檢驗(yàn)師。