顧園園

(黑龍江省農(nóng)墾建三江人民醫(yī)院 156300)

尿是一種容易獲得的檢驗(yàn)材料，其組成的變化不僅能反映泌尿生殖道的病變，而且不少全身性疾病也可引起尿成分的變化。一直以來，驗(yàn)?zāi)虮徽J(rèn)為是一種重要的診病手段。隨著醫(yī)學(xué)發(fā)展診斷疾病方法有很多，但尿分析的作用并未稍減。筆者就自動(dòng)化尿分析改良方法介紹如下。

1 自動(dòng)化試劑條評(píng)價(jià)

1.1 試劑條的新進(jìn)展 用自動(dòng)化試劑條技術(shù)代替手工進(jìn)行尿化學(xué)測(cè)定，已應(yīng)用多年。由尿中的血紅蛋白、亞硝酸鹽和白細(xì)胞酯酶間接推算是否存在紅細(xì)胞、細(xì)菌和白細(xì)胞的過篩價(jià)值及實(shí)用性，已為大多數(shù)臨床及檢驗(yàn)專家所接受。因?yàn)楸M管尿中出現(xiàn)血紅蛋白不一定同時(shí)存在紅細(xì)胞、引起泌尿系感染的細(xì)菌并非都還原硝酸鹽、尿中的淋巴細(xì)胞等與沒有酯酶活性，但畢竟是少數(shù)。新一代的試條在相關(guān)的試劑墊塊(pad)中，加了抗壞血酸氧化酶或碘鹽以分解或氧化抗壞血酸;有的試條則另加一個(gè)測(cè)抗壞血酸的墊塊作為對(duì)照。此外，有的試條還另加一個(gè)空白塊，用于消除尿本身有深顏色時(shí)對(duì)結(jié)果的干擾。目前大部分試條都加了一個(gè)含多電解質(zhì)試劑的，偏堿性并含有pH指示劑的墊塊，用于測(cè)尿比重。與化學(xué)試驗(yàn)比較起來，測(cè)比重試條的準(zhǔn)確性稍差。因此有些現(xiàn)代化尿分析儀，并不采用此法。

1.2 自動(dòng)化尿分析儀的改進(jìn) 試條法是通過化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化進(jìn)行測(cè)定的。早期是用肉眼觀察顏色變化及深淺，并與一標(biāo)準(zhǔn)色板進(jìn)行比較而作定性或半定量。這種方法目前在一些標(biāo)本量少的單位和供個(gè)人使用的試條仍大量使用。但在大批量檢查時(shí)顯得效率太低，而且肉眼比色受主觀因素的影響，精密度較差。人眼對(duì)顏色深度的微細(xì)差別往往不及儀器，因此靈敏度也較差。當(dāng)前應(yīng)用最廣的是半自動(dòng)尿分析儀，該儀器實(shí)質(zhì)上是一臺(tái)反射式光度計(jì)。經(jīng)過改進(jìn)，精密度及靈敏度不斷提高，已成為當(dāng)前國(guó)內(nèi)外臨床檢驗(yàn)最常用的儀器之一。新式的儀器往往采用多個(gè)波長(zhǎng)，有的用了壽命較長(zhǎng)的發(fā)光二級(jí)管作為光源，有的多達(dá)十多個(gè)檢測(cè)器，并配有功能齊全的電腦。最先進(jìn)的全自動(dòng)儀器，如Supertron，Clinitek Atlas等，自動(dòng)化程度很高。例如Atlas型儀器將490個(gè)試條連在一起，并卷成圓筒，置于儀器內(nèi);同時(shí)有一個(gè)可放50個(gè)尿樣管的轉(zhuǎn)盤和自動(dòng)定量吸加液裝置。測(cè)定時(shí)，將貼了條形碼的尿樣管排列于轉(zhuǎn)盤上，啟動(dòng)儀器，轉(zhuǎn)動(dòng)著的試條簡(jiǎn)使試條轉(zhuǎn)至光路區(qū)。儀器即自動(dòng)按順序吸尿樣加至每個(gè)試塊，自動(dòng)進(jìn)行測(cè)定。熒屏顯示結(jié)果及打印，全部按程序自動(dòng)進(jìn)行，無需人看管。該儀器還有一特制白色濾紙墊塊。用于檢測(cè)尿的顏色(最新的儀器已能測(cè)定尿的清濁度)。同時(shí)有校正儀器用的專用試條，測(cè)定中(配合質(zhì)控液)可插入對(duì)儀器進(jìn)行質(zhì)控的試條。這種儀器除了效率高、測(cè)定項(xiàng)目多、污染少以外，最大的優(yōu)點(diǎn)是加尿量及讀取結(jié)果的時(shí)間一致，而半自動(dòng)儀器的試條靠手工浸尿液后再置入儀器中，易造成污染，且條件難以一致，往往影響結(jié)果。所以這種儀器的精密度和準(zhǔn)確性都大大提高。

2 尿沉渣檢查的標(biāo)準(zhǔn)化和自動(dòng)化

2.1 現(xiàn)代化的尿分析儀對(duì)紅、白細(xì)胞和細(xì)菌的檢測(cè)是靠化學(xué)試驗(yàn)間接(推測(cè))求得的，特異性都不太強(qiáng)。試條也不能檢出管型、上皮細(xì)胞、滴蟲、精子、結(jié)晶等等。當(dāng)篩查結(jié)果有疑問時(shí)，儀器往往給出警示信號(hào)，提示要進(jìn)行鏡檢確定。目前，不管多么先進(jìn)的尿分析儀，都不能完全取代尿沉渣的顯微鏡檢查，只能起初篩作用。關(guān)于何種情況下需要進(jìn)行鏡檢。

2.2 尿沉渣鏡檢首先遇到的問題是方法如何統(tǒng)一。例如，取多少尿離心，離心力、離心時(shí)間，最后留下多少沉淀尿液，取多少用于鏡檢;加蓋片時(shí)，蓋片的面積、顯微鏡放大倍率、高倍鏡物鏡鏡頭的直徑，觀察多少視野以及報(bào)告方式等等，目前國(guó)內(nèi)外很不一致。例如，NCCLS的GP66-T指南(1992)規(guī)定:取尿12ml離心，相對(duì)離心力(RCF)為400xg，離心5分鐘，棄上清后留下0.2ml(用一種特制的帶尖頭的離心管，傾去上清后，恰好剩下0.2ml)，吸取20μl，加于載玻片上，加22m2的蓋片，根據(jù)高倍鏡頭直徑算出高倍視野面積，最后以每毫升尿中的細(xì)胞數(shù)報(bào)告。

2.3 尿紅細(xì)胞定位檢查是臨床常用的方法，傳統(tǒng)的相差顯微鏡法同樣存在人為的誤差并應(yīng)用受限。尿常規(guī)自動(dòng)分析法以多項(xiàng)指標(biāo)辨別血尿定位，包括尿沉渣分析的均質(zhì)和非均質(zhì)紅細(xì)胞、管型及小圓上皮測(cè)定，Clinitek 500的蛋白和潛血測(cè)定。尿均質(zhì)和非均質(zhì)紅細(xì)胞測(cè)定將直接分析紅細(xì)胞的來源，管型、小圓上皮及蛋白為腎損害的有利佐證。潛血檢驗(yàn)可間接推測(cè)非均質(zhì)紅細(xì)胞的存在。因非均質(zhì)紅細(xì)胞即血紅蛋白逸出的紅細(xì)胞。潛血測(cè)定為過氧化酶法，對(duì)尿中的紅細(xì)胞破壞釋放出的血紅蛋白敏感。潛血陽(yáng)性說明紅細(xì)胞中血紅蛋白逸出增多。因此，尿自動(dòng)分析法可用于血尿定位分析。L1F-100對(duì)尿管型、小圓上皮、結(jié)晶和細(xì)菌的測(cè)定不夠準(zhǔn)確，可作為診斷參考，必要時(shí)用顯微鏡法確定。尿自動(dòng)分析法可較準(zhǔn)確的檢驗(yàn)?zāi)虺Ｒ?guī)指標(biāo)，其結(jié)果能滿足和符合臨床診斷。除特殊標(biāo)本及病例可取代顯微鏡檢查尿沉渣方法。